一種銀杏葉提取物及其提取方法與應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及植物有效成分，具體地說，涉及一種銀杏葉提取物及其提取方法與應用。
【背景技術】
[0002]銀杏葉是近年來國內外研究開發的熱點之一，其提取物(Ginkgobilobaextracts，GBE)被廣泛用于心腦血管疾病，大量研究表明，銀杏葉提取物對心腦血管疾病的防治作用與其抗氧化活性密關。GBE中主要的生理活性成分是黃酮類化合物和銀杏萜內酯類，其中銀杏黃酮具有清除自由基、抗氧化、改善心腦血管循環、抗疲勞、降血脂、抑菌等多種功能，銀杏葉中黃酮類化合物的純度對其應用起著決定作用，即由銀杏葉提取物制成用于防治心腦血管疾病的藥物要求總黃酮純度為24%以上(通常把德國W.Svhwabe公司生產的EGB761作為銀杏葉的標準化提取物，這種提取物中含有24%的黃酮化合物)，銀杏黃酮也可以作為食品添加劑的成分，制作成抗疲勞、抗衰老的保健食品。銀杏葉中黃酮類化合物的提取早在70年代德國和法國就申請了銀杏葉提取物的專利，從常用的醇、酮等有機溶劑浸提法到近年來的超臨界流體萃取法，高純度和高收率且環保的提取方法一直是人們所追求的。
[0003]銀杏黃酮類化合物結構多具有游離酚羥基，一般易溶于極性較大的有機溶劑和堿性溶液中；銀杏葉中大部分黃酮都是以極性較大的黃酮苷的形式存在，極性大的黃酮苷和極性較大的黃酮苷元可用甲醇、乙醇、丙酮等極性較大的混合溶劑如乙醇一水按照一定的比例進行提取。
[0004]目前的銀杏黃酮苷提取方法大多數采用簡單溶劑提取。如公開號為CN101327228的中國專利申請公開了一種低酸銀杏黃酮及其提取方法，加入乙醇浸泡，回收乙醇后經樹脂出去脂類然后經過純化得到產品。公開號為CN101134767的中國專利申請公開了一種高純度銀杏黃酮類化合物高效提取制備方法，加入乙醇常溫攪拌下提取銀杏黃酮苷，然后用DM?130大孔樹脂用乙醇洗脫。上述技術方案雖然操作簡單，但是造成大量溶劑浪費，尤其是提取周期長，不利于節約資源能源。
[0005]公開號為CN102805755A的中國專利申請公開了一種從銀杏葉中提取高品質銀杏黃酮的制備方法。用去離子水從銀杏葉中提取粗提液，經過濾后醇沉除雜、澄清劑除雜、富集銀杏黃酮和內酯，利用極性、弱極性的大孔樹脂進行初分離。該技術方案利用水提取，雖然節省了溶劑成本，但是后續部分陸續用到醇沉除雜，高品質澄清劑，此外銀杏黃酮提取不充分，仍然不能提取出銀杏葉中極性較小的黃酮苷元成分。
[0006]此外，天然洗滌用品相比于化學洗滌產品往往具有溶解性差，去污能力小等缺點，主要原因是天然洗滌用品如以無患子皂苷、天然皂莢皂素和茶皂素為主要有效成分的洗滌用品的有效水溶功能基團為糖苷類非離子基團，該類基團由于在水溶液中不能電離出離子，而且分子量較大，影響了其水溶性，繼而影響其去污能力。
[0007]對于銀杏葉黃酮的利用，目前多利用其抗氧化的功能將其作為食品添加劑或用于藥用化妝品中。如公開號為CN101658478A的中國專利申請將銀杏葉提取液加入藥品化妝品中，證實其具有延緩皮膚衰老和減少皺紋等功能；公開號為CN102813683的中國專利申請采用微波提取銀杏葉得到產品具有抗衰老功能顯著的功能，將其應用于化妝品中；公開號為CN103655293A的中國專利申請將銀杏葉萃取物與丁香提取液等配制成具有補水、潤膚和抑菌等功效的銀杏護膚液。但是，對于銀杏葉黃酮能夠增強皂素或皂苷去污能力的研究至今未見報道。
【發明內容】
[0008]為了解決現有技術中存在的問題，本發明的目的是提供一種銀杏葉提取物及其提取方法與應用。
[0009]為了實現本發明目的，本發明首先提供一種銀杏葉提取物，其提取方法包括如下步驟:
[0010]I)將銀杏葉烘干，粉碎；
[0011 ] 2)取銀杏葉粉末，加入pH4.0?5.5的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液，加入纖維素酶，于50?60 °C的水浴中酶解I?2h ;
[0012]3)加入無水乙醇，于微波反應器中進行微波提取，控制微波功率為50?300W，微波溫度50?80°C，累計微波時間為I?8min ;
[0013]4)抽濾，濾液用石油醚萃取去除雜質，取水層旋轉蒸發濃縮，烘干，即得。
[0014]作為優選，所述步驟I)具體為將銀杏葉去雜，于烘箱中60°C烘干至恒重，粉碎，用60目標準篩過篩。
[0015]作為優選，所述步驟2)取銀杏葉粉末，加入pH4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液，加入纖維素酶，于50°C的水浴中酶解lh。
[0016]作為優選，所述步驟3)加入無水乙醇，于微波反應器中進行微波提取，控制微波功率為130W，微波溫度78°C，累計微波時間為4min。
[0017]進一步地，加入無水乙醇后，體系中乙醇的體積分數為50?80%。
[0018]進一步地，加入無水乙醇后，銀杏葉粉末與溶液體系的料液比為1:5?1:50。
[0019]本發明還提供了一種銀杏葉提取物的提取方法，所述方法包括如下步驟:
[0020]I)將銀杏葉烘干，粉碎；
[0021]2)取銀杏葉粉末，加入pH4.0?5.5的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液，加入纖維素酶，于50?60 °C的水浴中酶解I?2h ;
[0022]3)加入無水乙醇，于微波反應器中進行微波提取，控制微波功率為50?300W，微波溫度50?80°C，累計微波時間為I?8min ;
[0023]4)抽濾，濾液用石油醚萃取去除雜質，取水層旋轉蒸發濃縮，烘干，即得。
[0024]作為優選，所述步驟2)取銀杏葉粉末，加入pH4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液，加入纖維素酶，于50°C的水浴中酶解Ih ;
[0025]所述步驟3)加入無水乙醇，使體系中乙醇的體積分數為50?80%，于微波反應器中進行微波提取，控制微波功率為130W，微波溫度78°C，累計微波時間為4min。
[0026]本發明還提供了含有所述銀杏葉提取物的洗滌產品。
[0027]進一步地，所述洗滌產品含有皂苷和/或皂素。
[0028]本發明還提供了所述銀杏葉提取物在制備洗滌產品中的應用。
[0029]本發明的有益效果在于:
[0030]本發明充分利用溶劑乙醇水溶液將絕大多數的黃酮成分提取出來，同時結合微波快速高效的特點，不僅節約成本，而且節省時間，通過對微波功率、微波溫度和微波時間的限定，方便快速的提取出所需銀杏葉黃酮的絕大多數成分。
[0031]本發明提供的洗滌產品，由于添加有銀杏葉黃酮類提取物，黃酮類物質的酚羥基的供電子功能協同天然洗滌產品中的糖苷鍵，增強其供電功能，一定程度可增大其水溶能力，繼而增強其去污能力。
【附圖說明】
[0032]圖1為本發明實施例1中所述的吸光度-濃度曲線圖。
【具體實施方式】
[0033]以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。
[0034]實施例1銀杏葉提取物及其提取方法
[0035]將銀杏葉去雜，于烘箱中60°C烘干至恒重，粉碎，用60目標準篩過篩。稱取銀杏葉粉末10.0OOg,加入PH為4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液60mL，加入0.51g纖維素酶使之酶濃度分別為8.5g/L，于水浴50°C中酶解Ih后，加入140mL無水乙醇使體系為70%乙醇溶液，于微電腦微波反應器中微波功率100W，微波溫度75°C，累計微波時間為4min。
[0036]抽濾，濾液用石油醚萃取2次去除葉綠素和脂質，取水層旋轉蒸發濃縮，于烘箱中烘干，得產品。
[0037]用紫外-分光光度計測量產品中銀杏葉總黃酮的提取率，測量方法為:準確稱取銀杏葉提取物0.200g，用75%乙醇溶解并定容至10mL容量瓶中，準確吸取1.0mL的粗提取溶液置于25mL容量瓶中，再加入5%亞硝酸鈉水溶液1.0mL，搖勻，靜置8min ;加入10%硝酸鋁水溶液1.0mL，搖勻，靜置8min ;再加入4%氫氧化鈉水溶液10.0mL，加入75%乙醇溶液定容至25mL，靜置30min，與510nm出測量吸光度。吸光度_濃度曲線見圖1。并由吸光度根據標準曲線查出濃度Cmg/mL，則提取物中含量及提取率有以下公式算出:
[0038]提取物含量=[(CX25 X 100)/(0.200 X 1000) ] X 100%
[0039]提取率=[(粗提物總質量X提取物含量)/銀杏葉重]X 100%
[0040]提取率為2.80 %，提取物含量為9.50 %。
[0041]實施例2銀杏葉提取物及其提取方法
[0042]將銀杏葉去雜，于烘箱中60°C烘干至恒重，粉碎，用60目標準篩過篩。取銀杏葉粉末10.0OOg,加入pH分別為4.8的緩沖溶液60mL，加入0.510g纖維素酶使之酶濃度為8.5g/L，于水浴50°C中酶解Ih后，加入140mL無水乙醇使體系為70%乙醇溶液，于微電腦微波反應器中功率80W，微波溫度70°C，累計微波時間分別為2min。
[0043]抽濾，濾液用石油醚萃取2次去除葉綠素和脂質，取水層旋轉蒸發濃縮，于烘箱中烘干，得產品。
[0044]用紫外-分光光度計測量產品中銀杏葉總黃酮的提取率，測量方法同實施例1，測得提取率為2.53%，提取物含量為9.32%。
[0045]實施例3銀杏葉提取物及其提取方法
[0046]將銀杏葉去雜，于烘箱中60°C烘干至恒重，粉碎，用60目標準篩過篩。稱取銀杏葉粉末10.0OOg,加入pH分別為4.8的緩沖溶液60mL，加入0.51g纖維素酶使之酶濃度為8.5g/L，于水浴50°C中酶解Ih后，加入140mL無水乙醇使體系為70%乙醇溶液，于微電腦微波反應器中微波功率130W，微波溫度78°C，累計微波時間分別為4min。
[0047]抽濾，濾液用石油醚萃取2次去除葉綠素和脂質，取水層旋轉蒸發濃縮，于烘箱中烘干，得產品。
[0048]用紫外-分光光度計測量產品中銀杏葉總黃酮的提取率，測量方法同實施例1，測得提取率為3.96%，提取物含量為10.34%。
[0049]實施例4銀杏葉提取物及其提取方法
[0050]將銀杏葉去雜，于烘箱中60°C烘干至恒重，粉碎，用60目標準篩過篩。稱取銀杏葉粉末10.0OOg,加入pH為4.8的乙酸鈉-乙酸緩沖溶液60mL，加入0.454g纖維素酶使之酶濃度分別為7.56g/L于水浴50°C中酶解2h后，加入140mL無水乙醇使體系為70%乙醇溶液，于微電腦微波反應器中微波功率150W，微波溫度80°C，累計微波時間為4min。
[0051]抽濾，濾液用石油醚萃取2次去除葉綠素和脂質，取水層旋轉蒸發濃縮，于烘箱中烘干，得產品。
[0052]用紫外-分光光度計測量產品中銀杏葉總黃酮的提取率，測量方法同實施例1，提取率為3.46 %，提取物含量為9.76 %。