一種磷脂酰膽堿的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種磷脂酰膽堿的制備方法，屬于化學工程技術領域。
【背景技術】
[0002]磷脂酰膽堿是一種天然、安全、高效的乳化劑，可用于輸液或靜脈注射用乳化劑，是注射劑領域最常用、最安全的乳化劑。同時，磷脂酰膽堿由于其脂質體的特征，可作為抗癌藥物和其他緩釋藥物的載體，顯著提高藥物的活性、降低毒副作用，與其它藥物載體相比具有低毒高效的優點。當磷脂酰膽堿用于注射、脂質體等用途時，對磷脂酰膽堿的純度、雜質含量、水含量均有嚴格要求，通常要求磷脂酰膽堿純度大于95?98%，同時磷脂酰乙醇胺和溶血性磷脂酰膽堿的含量小于1%，水含量低于2%，同時對熱原、重金屬含量均有限量要求。
[0003]現有技術中常見的制備磷脂酰膽堿的方法有多種，其中有逆流萃取，萃取后純度相對較高，但全流程的收率仍然較低，萃取劑通常為乙腈或一元醇，萃取選擇性低，物料損耗嚴重。超臨界0)2提取制得脫除中性脂肪的磷脂酰膽堿，純度僅為70%，且普遍存在純度低，存在收率低、設備投資大的不足。而膜分離與柱層析相結合分離磷脂酰膽堿的方法，該方法存在膜易污染、不易再生、重復性差、成本昂貴、處理量小等不足，并且分離選擇性低，不能完全分離分子量相近的磷脂組分。
【發明內容】
[0004]本發明主要解決的技術問題:針對利用逆流萃取，超臨界CO2提取和膜分離與柱層析相結合分離法制得的磷脂酰膽堿，收率低，純度低，同時會設備投資大，所需成本高的問題，提供了一種磷脂酰膽堿的制備方法，本發明主要首先將菜籽餅中的油脂去除掉，并粉碎成顆粒物，并利用狗寶中的酶進行微生物發酵，發酵完成后，利用乙醇溶液淹沒發酵物，并收集濾液，對其減壓濃縮，取上層液，在一定條件下，加入丙酮，靜置風干即可。本發明所制備的磷脂酰膽堿純度較高，高達95%以上，同時成本較低，制備工藝步驟簡單。
[0005]為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案:
(1)取I?2kg菜籽餅放入容器中，按固液比1:3取大豆與雞蛋黃放入榨汁機中進行榨汁，取榨出的液體置于容器中浸泡菜籽餅，靜置20?30min后，將浸泡后的菜籽餅放入粉碎機中粉碎成40?60目顆粒物；
(2)將上述所得的顆粒物放入容器中，向其中加入質量分數為I?2%的硫酸亞鐵溶液淹沒顆粒物I?3cm，在溫度為80?90°C下，攪拌25?30min后過濾，將所得的過濾物放入發酵池內，向其中加入200?400g狗寶，攪拌均勾后，再向其中分別加入80?120g葡萄糖、300?400g牛肉膏、I?3g磷酸氫二鉀及20?50g磷酸銨攪拌均勻，使用質量分數為40%的氫氧化鈉調節pH為6.5?7.0，密封發酵10?15天，溫度保持為40?45°C ；
(3)待上述發酵結束后，向其中加入質量分數為80?85%的乙醇溶液淹沒發酵物3?5cm，在轉速為2000?3000r/min下，攪拌30?40min后快速過濾，收集過濾液置于容器中；
(4)對上述容器進行減壓，減壓至400?600Pa，并在溫度為70?80°C下，將液體濃縮至原體積的30?40%，將所得的濃縮液與丙二醇按體積比1:1進行均勻混合，靜置10?30min后分層，取上層液；
(5)將所得的上層液放入容器中，在溫度為80°C下，攪拌40?50min后，向其中攪拌加入溫度為10?15°C的丙酮，直至無沉淀產生，再靜置10?15min后過濾，將所得的過濾物放入風干機中風干即可。
[0006]本發明的應用:將上述制備的磷脂酰膽堿為原料，加入甘油或大豆油稀釋后，用明膠包裹而成，制成卵磷脂膠囊，或直接以顆粒形式服用，服用該產品，能夠有效促進大腦發育，增強記憶力，同時還可以去除青春痘，滋潤皮膚。
[0007]本發明的有益效果是:
(1)磷脂酰膽堿純度較高，高達95%以上；
(2)制備步驟簡單，成本低。
【具體實施方式】
[0008]首先取I?2kg菜籽餅放入容器中，按固液比1:3取大豆與雞蛋黃放入榨汁機中進行榨汁，取榨出的液體置于容器中浸泡菜籽餅，靜置20?30min后，將浸泡后的菜籽餅放入粉碎機中粉碎成40?60目顆粒物；再將上述所得的顆粒物放入容器中，向其中加入質量分數為I?2%的硫酸亞鐵溶液淹沒顆粒物I?3cm，在溫度為80?90°C下，攪拌25?30min后過濾，將所得的過濾物放入發酵池內，向其中加入200?400g狗寶，攪拌均勻后，再向其中分別加入80?120g葡萄糖、300?400g牛肉膏、I?3g磷酸氫二鉀及20?50g磷酸銨攪拌均勻，使用質量分數為40%的氫氧化鈉調節pH為6.5?7.0，密封發酵10?15天，溫度保持為40?45°C;待上述發酵結束后，向其中加入質量分數為80?85%的乙醇溶液淹沒發酵物3?5cm，在轉速為2000?3000r/min下，攪拌30?40min后快速過濾，收集過濾液置于容器中；對上述容器進行減壓，減壓至400?600Pa，并在溫度為70?80°C下，將液體濃縮至原體積的30?40%，將所得的濃縮液與丙二醇按體積比1:1進行均勻混合，靜置10?30min后分層，取上層液；將所得的上層液放入容器中，在溫度為80°C下，攪拌40?50min后，向其中攪拌加入溫度為10?15°C的丙酮，直至無沉淀產生，再靜置10?15min后過濾，將所得的過濾物放入風干機中風干即可。
[0009]實例I
首先取2kg菜籽餅放入容器中，按固液比1:3取大豆與雞蛋黃放入榨汁機中進行榨汁，取榨出的液體置于容器中浸泡菜籽餅，靜置30min后，將浸泡后的菜籽餅放入粉碎機中粉碎成60目顆粒物；再將上述所得的顆粒物放入容器中，向其中加入質量分數為2%的硫酸亞鐵溶液淹沒顆粒物1cm，在溫度為90°C下，攪拌30min后過濾，將所得的過濾物放入發酵池內，向其中加入400g狗寶，攪拌均勾后，再向其中分別加入120g葡萄糖、400g牛肉膏、3g磷酸氫二鉀及50g磷酸銨攪拌均勻，使用質量分數