毒素堆積型肥胖基因個體化干預飲品的制備方法及其系統的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種肥胖基因個體化干預飲品，尤其涉及一種毒素堆積型肥胖基因個 體化干預飲品的制備方法及其系統。
【背景技術】
[0002] 肥胖作為一種疾病，正嚴重威脅人類的健康。世界衛生組織專家委員會提出以體 質指數（Body-Masslndex，BMI)作為身體超重或肥胖的標準，即BMI在25~28之間為超重， 28~32為肥胖，高于32為非常肥胖。肥胖癥是一種與遺傳因素及生活方式密切相關的慢性 疾病，它會引發血脂升高，容易造成脂肪肝、動脈血管病變、心臟病、糖尿病，肥胖的兒童還 會引發性功能發育不良并導致成人期各種疾病發病率和死亡率上升。
[0003]目前肥胖癥的臨床治療方法主要是飲食和運動療法，但存在著碳水化合物、脂肪 以及蛋白質攝入量控制"一刀切"和盲目采用減肥藥物的非個體化治療方式。由于至少有 40%軀體脂肪量的差異是由遺傳因素引起的，所以很容易明確遺傳對肥胖有很大影響。遺傳 體質不同的人在患肥胖癥時應采取不同的減肥策略，利用現代科學研究成果，開發一項基 于分子遺傳基礎的體重管理分子檢測產品并制備相應的減肥食品以提供個性化的體重管 理建議，具有較強的社會意義和市場前景。
[0004] 外源性有毒化學物質通過不同途徑被吸收進入機體后，將發生一系列化學變化并 形成一些分解產物或衍生物，即生物轉化，形成致癌物質。人體內有一些酶可以通過一系列 反應和這些物質或其代謝反應產物結合，降低這些物質的毒性，以一定的形式排泄出體外 從而使細胞免受損害。由于遺傳體質的不同，不同機體的解讀排毒能力也有所差異，而這種 差異會影響到機體對諸多疾病如肥胖、癌癥等疾病的易感性。
[0005] 體內廢棄物的長久堆積無法排出，也是導致身材臃腫的罪魁禍首。毒素是所有對 身體造成危害的物質，或是可以引起身體的排異性反應、過敏癥狀。如果毒素長期在體內堆 積的話，會使細胞與組織受傷，引起身體新陳代謝系統的紊亂而使體內毒素堆積，導致人體 脾胃的運化代謝機能下降、血液毒素多、粘稠度高，造成全身肥胖、記憶力減退、面色暗沉、 便秘和痔瘡等疾病。
[0006] 谷胱甘肽硫轉移酶（Glutathione S_transferase，GSTs)屬于II相代謝酶超級家 族，是體內重要的解毒酶系。它可直接與親電子化合物反應，增加其水溶性而有利于排除體 外，從而達到解毒的目的。GSTM1、GSTT1、GSTP1是谷胱甘肽硫轉移酶的三種重要亞型。已 發現GSTM1、T1、P1具有人群多態性，并有種族差異。其中GSTM1和GSTT1基因多態性均為 編碼基因完全缺失，導致具有該基因型個體酶活性極低，GSTP1基因在5號外顯子的遺傳學 多態表現為GSTP1 Vall05Ile，也導致GSTP1酶活性降低。GSTs基因突變對臨床有非常重 要的影響。通過谷胱甘肽和化學物質或其代謝反應產物結合，可以降低這些物質的毒性，從 而使細胞免受損害。當谷胱甘肽與多種氧化鏈代謝產物反應后，產生的減毒結合物可使其 易于進入下一步代謝，并最后以硫醇尿酸的形式排泄出體外。編碼這一類酶的基因一旦產 生影響其正常功能的變異，就會影響機體對有毒有害物質正常的解毒作用。
[0007] 細胞色素P450酶（CYP1A1、CYP1B1等）是一組含亞鐵血紅素，結構和功能相關的 超家族基因編碼的同工酶，這類酶在外源性和內源性化合物代謝中起著非常重要的作用， CYP450廣泛存在于機體內，但主要存在于肝細胞內質網上，參與內源性物質（包括膽固醇、 脂肪酸等）的生物合成與降解和外源性物質（包括藥物和環境污染物）的代謝，其中CYP1A1 是CYP450酶系中的重要成員之一，不僅參與了藥物的代謝，而且還能催化許多前致癌物和 前毒物的活化過程，在肝臟可被高度誘導。已有實驗證實，肝微粒體CYP1A1表達增強與羥 自由基的生成增多及脂質過氧化有關。羥自由基是脂質過氧化反應的啟動劑，高脂飲食可 增加線粒體或微粒體對脂肪酸的氧化而導致氧化應激，故脂肪酸可誘導CYP1A1的產生。隨 著CYP1A1表達的上調，P0S生成增加，脂質過氧化反應加劇，形成惡性循環。
【發明內容】
[0008] 本發明的目的是提供一種毒素堆積型肥胖基因個體化干預飲品的制備方法及其 系統，針對個人不同的基因體質制作不同的干預飲品，從而達到更好的減肥效果。
[0009] 為實現上述目的，本發明提供了一種毒素堆積型肥胖基因個體化干預飲品的制備 方法，所述方法是通過對個體與毒素堆積型肥胖相關的多個基因多態性進行聯合檢測，并 根據檢測結果確定其發生毒素堆積型肥胖的風險等級，然后針對個體聯合基因型發生毒素 堆積型肥胖的風險等級制備針對性的減肥飲品，所述方法包括以下步驟： 步驟一、聯合基因型風險等級的建立 (1) 選擇與毒素堆積型肥胖相關的基因多態性位點，根據文獻給出的數據或自行采樣 研究確定各遺傳風險因素相關多態性位點的不同基因型的單基因風險度； (2) 將采用的所有多態性位點的各基因型排列組合，然后根據各單基因風險度乘積建 立聯合基因型風險等級。
[0010] 其中，步驟（1)中自行采樣研究確定各遺傳風險因素相關多態性位點的不同基因 型的單基因風險度的具體方法為： A. 利用病例-對照關聯分析方法，采用卡方檢驗或Fisher精確概率法，可信區間CI取 95%，顯著性差異取p〈0. 05,對毒素堆積型肥胖在特定人群中的遺傳風險因素的相關位點進 行篩選； B. 利用網上SPSS統計學軟件計算相對風險度OR，CI取95%，p〈0. 05,作為各相關多態 性位點不同基因型的單基因風險度。
[0011] 優選地，步驟（1)中選擇與毒素堆積型肥胖相關的基因多態性位點可根據文獻資 料查找中國人群中毒素堆積型肥胖常見的遺傳風險因素進行選擇。
[0012] 優選地，與毒素堆積型肥胖相關的基因多態位性點選自于下表1中的至少兩個： 表1
在本發明的一種優選實施方式中，根據大規模中國人群中的分子流行病學相關研究成 果查閱，采納的上表中各相關多態性位點的風險度如下表2所示： 表2
進一步地，步驟（2)的具體方法為： 每個與毒素堆積型肥胖相關的基因多態性位點分別有三種亞型，將所選位點所有亞型 出現的可能進行排列組合；然后將這些亞型的風險度相乘獲得不同排列組合的風險度乘 積；將獲得的風險度乘積從小到大或從大到小排列，合并風險度乘積相等的組；最終按風 險度乘積的大小確定各組風險度的高低。
[0013] 上述方法是將各位點作為獨立因素進行加權處理的，風險度乘積越大，評估風險 越大；用上述方法計算得出的聯合基因型遺傳高風險個體可表述為其自身引發毒素堆積型 肥胖的遺傳風險因素較多或結果確定性較強。
[0014] 進一步地，將不同的相關多態性位點標記為a、b、c……，將不同的亞型標記為1、 2、3,即攜帶位點1亞型1+位點2亞型1+位點3亞型1的單倍型表示為alblcl ;在本發 明的一個優選實施例中，選取的相關多態性位點為rsl695 (MTT5/)、rsl048943 (67尸7乂7)和 ^4646903(67/^^7)，將它們分別標記為a、b、c，根據上述表格中所列的單基因風險度計算 風險度乘積結果如表3所不： 表3
優選地，風險度乘積采用PHP編制程序，然后在計算機中輸入各單基因風險度值后進 行計算。
[0015] 然后將上表3中的單倍型按風險度乘積從低到高排列并分組，如表4所示；風險等 級越高，風險度乘積越大，即個體自身引發毒素堆積型肥胖的遺傳風險越高。
[0016]表 4
步驟二、個體基因檢測 對從個體中獲得的DNA進行步驟一中所選的基因多態性位點的聯合基因型檢測。
[0017] 優選地，所述聯合基因型檢測采用TaqMan?-MCB技術進行；進一步優選地，對不同 的風險位點采用同樣的擴增程序，在不同的反應孔中，同時進行聯合檢測。熒光定量PCR反 應后，將每個反應孔中的樣品在熒光定量PCR儀上讀取熒光量數據，對于每個個體的樣本 可得到對應不同風險位點的圖，將其組合獲得該個體的聯合基因型。
[0018] 優選地，聯合檢測的風險位點為rsl695 (MTT5/)、rsl048943 (67/似7)和 『84646903(67尸以7)。
[0019] 優選地，上述基因多態性位點聯合檢測采用的引物和探針設計如下表5所示： 表5
優選地，熒光定量PCR反應的擴增條件為，先預熱：50°C、2分鐘，95°C、10分鐘，然后進 行60個循環的95 °C、30秒，60 °C、1分鐘。
[0020] 在本發明的另一較佳實施方式中，聯合基因型檢測的手段也可以采用基因芯片測 序技術。