一種具有神經保護作用的化合物及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明提供一種具有神經保護作用的化合物，同時還提供了該化合物的制備方 法及其醫用用途，屬于醫藥合成技術領域。
【背景技術】
[0002] 帕金森病（PD)是一種慢性中樞神經系統退化性失調。它會損害患者的肢體功能， 語言能力等，臨床表現為休息性震顫、僵直、運動遲緩和姿勢不穩定性與認知和情感障礙。 它的病因目前仍不明確，但其主要病理特征為黑質致密部中多巴胺能神經元的損失和被稱 為路易體的胞漿內包含體的存在。
[0003] 6-羥基多巴胺（6-0HDA)是一種廣泛地用于在實驗動物中誘導帕金森綜合征的化 學物質（Lane&Dunnett，2008)。6-0HDA經由多巴胺和去甲腎上腺素重吸收轉運蛋白進入神 經元。因此，6-0HDA通常與選擇性去甲腎上腺素重吸收抑制劑（比如地昔帕明）一起使 用以選擇性地僅殺死多巴胺能神經元。在體外，多巴胺的氧化可導致6-0HDA的產生，所 以6-0HDA被認為是內源性毒素（Jellingeretal.，1995)。確實的證據表明6-0HDA產生活 性氧簇，并降低谷胱甘肽和過氧化物歧化酶的活性（Betarbetetal.,2002)。在腦內注射 6-0HDA之后，紋狀體神經元在24小時內開始變性，并且在2-3天后紋狀體多巴胺耗盡。
[0004] 鹽酸他克林（"Cognex(益智膠囊）")，第一種FDA批準的用于阿爾茨海默病的藥 物，是一種乙酞膽堿酷酶抑制劑（卡特勒（Cutler)和斯讓麥克（Sramek),新英格蘭醫學 雜志（N.Engl.J.Med.) 328:808810, 1993)。然而，這種藥物已經示出在阿爾茨海默病患者 中產生認知改善，并且最初具有主要的副作用，如肝臟毒性。第二種FDA批準的藥物，多 奈呱齊（"安理申"），也是一種乙酞膽堿酷酶抑制藥，它比他克林更有效，在于在阿爾茨 海默病患者中顯示輕微的認知改善（巴爾納（Barner)和格雷（Gray),藥物治療紀事（Ann. Pharmacotherapy) 32:70-77, 1998;羅杰斯（Rogers)和氣瑞德哈夫（Friedhoff),歐洲神經 心理學（Eur.NeuroPsych. )8:67-75, 1998)，但不被認為是治愈。因此，清楚的是，對于用 于阿爾茨海默病患者的更有效的治療存在需要。
【發明內容】
[0005] 本發明目的在于提供了一種具有神經保護作用的化合物，對神經毒素損傷的神經 細胞系具有明顯的修復作用。
[0006] 本發明公開了一種具有神經保護作用的化合物的制備方法，可以用于工業化生 產。
[0007] 本發明進一步公開了所述化合物在神經保護作用方面的藥物應用。
[0008] 本發明提供的一種具有神經保護作用的化合物(簡稱為NNK0019)，具有如下結構 式：
化學命名為4, 6-二羥基-5-苯乙氧羰基-1，3苯二磺酸，分子式為C15H1401()S2,相對分 子質量為 418. 473g/mol。
[0009] 本發明所述的具有神經保護作用的化合物的制備方法，如下所述：
1) 以2, 6-二甲基苯甲酸和苯乙醇為原料以1 :(1.0~1. 5)比例混合，以二氯甲烷、 氯仿、乙酸乙酯、二甲基甲酞胺中之任意一種為溶劑，在〇°C回流溫度條件下，攪拌6-12 小時。反應完畢后，將全部反應液過濾；濾液濃縮后，通過硅膠柱層析、濃縮、結晶得到 2, 6-二甲基苯甲酸苯乙醇酯； 2) 將所得的2, 6-二甲基苯甲酸苯乙醇酯溶解于氯仿或二氯甲烷中，室溫攪拌，分批 加入1. 2當量的A1C13,室溫攪拌，TLC檢測，反應完全后，將反應液緩慢傾入水中，萃取 分離得到有機層，將有機層濃縮至干，通過硅膠柱層析或直接濃縮、結晶得2-羥基-6-甲 氧基苯甲酸苯乙醇酯； 3) 將所得到的2-羥基-6-甲氧基苯甲酸苯乙醇酯溶解于二氯甲烷或氯仿中，室溫 攪拌，分批加入2~3當量的AIC13,室溫攪拌，TLC檢測，反應完全后，將反應液緩慢傾 入水中，萃取分離得到有機層，將有機層濃縮至干，通過硅膠柱層析或直接濃縮、結晶得 2, 6-二羥基苯甲酸苯乙醇酯； 4) 過量濃硫酸加入所得2, 6-二羥基苯甲酸苯乙酸酯中，不斷攪拌使其充分反應，反應 完全后將反應液傾入大量水中，萃取分離得到有機層，將有機層濃縮至干，通過硅膠柱層 析或直接濃縮、結晶得4, 6-二羥基-5-苯乙氧羰基-1，3苯二磺酸。
[0010] 本發明的積極效果在于：提供一種新的化合物，具有神經保護作用，對神經毒素損 傷的神經細胞系具有明顯的修復作用，可用于制備治療該類疾病的藥物。本發明化合物由 取代的芳香酸和芳香醇混合制備，原料成本低，制備方法簡單，神經保護作用明顯，對預防 和治療帕金森病及老年癡呆病的效果也十分顯著。
【附圖說明】
[0011] 圖1為NNK0019對6-0HDA損傷的DPC12細胞的存活率的影響，細胞由NNK0019 (10yM，20yM)預處理3h，而后加入100yM6-0HDA處理24h。數據均以對照組的百分比呈 現，相比對照組###P〈〇.001，相比模型組（100yM6-0HDA) *#p〈0. 001。
[0012] 圖2為NNK0019對6-0HDA損傷的DPC12細胞的修復作用，細胞由NNK0019( 20yM) 預處理3h，而后加入100yM6-0HDA處理24h，control為空白組，model為模型組。
【具體實施方式】
[0013] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明 而不用于限制本發明范圍。此外應理解，在閱讀了本發明的內容之后，本領域技術人員可 以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附后權利要求書限定的范 圍。
[0014] 本發明指出一種具有所述化學式的化合物，具有明顯神經保護作用，可在治療或 預防老年癡呆和帕金森藥物或保健品中應用，所述化合物制備方法如下： 實施例1 稱取100mg2,6-二甲氧基苯甲酸，將其置于干燥的圓底燒瓶中，加入10mL無水CH2C12 攪拌；冰水浴使裝置中的混合液溫度降至〇°C，加入150mg二環己基碳二酞亞胺，攪拌50 分鐘后加入0.06mL苯乙醇、3mg4-N，N-二甲基-4-胺基吡啶，室溫攪拌，TLC檢測，反應完 全后，直接過濾，母液濃縮后經硅膠柱層析（石油醚：氯仿-2:3)分離得到2, 6-二甲基苯 甲酸苯乙醇酯，收率89.9%。加入1011^〇12(：12，攪拌，分批加入3.3當量的41(：1 3，室溫攪 拌，TLC檢測，反應完全后，將反應液緩緩傾入20mL水中，萃取