新型的具有5個連接的ctl表位的肽的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種作為癌癥抗原肽有用的新型肽。更詳細而言，本發明涉及一種新 型癌癥抗原肽及利用其的藥物組合物，所述新型癌癥抗原肽為將具有HLA-A限制性的CTL 誘導能力的5個肽連接而成。
【背景技術】
[0002] 癌癥占日本人的死亡原因的第1位，一年約35萬人死亡，目前仍然為嚴重的疾病。 作為所確立的癌癥療法，主要有外科切除術、抗癌藥物治療及放射線療法。但是，所述療法 存在復發、生命質量（QOL)降低、以及在為不能接受前面敘述的療法的中期癌癥的情況下 沒有其他治療選項等的問題。
[0003] 長期以來，癌癥免疫療法（癌癥疫苗療法）被期待作為新的療法，從可以鑒定人類 腫瘤抗原中的表位肽的1990年起，在全世界開始了癌癥肽疫苗的臨床研究。但是，肽單獨 施用或并用療法中的臨床研究成果的分析結果指出，在1，〇〇〇例以上的給藥例中，成功率 僅為2. 7% (非專利文獻1)，難以實用化。
[0004] 另一方面，在日本還繼續進行長期使用特有的癌癥肽疫苗的臨床研究，其成果逐 漸變得顯著。近年來，作為以提高治療成績為目標的方法之一，還開始采用施用多種癌癥肽 而不是施用1種癌癥肽的戰略。例如，通過預先檢查患者的HLA分型及特異性免疫應答，實 施了選擇多種待施用的肽的特制（tailor-made)型的癌癥肽疫苗療法，且安全性及抗腫瘤 效果得到確認。具體而言，通過特制型肽疫苗的單獨施用或與抗癌劑的并用，在腦腫瘤、宮 頸癌、前列腺癌、以及胰腺癌方面實現了優異的臨床效果以及安全性（非專利文獻2、3、4)。
[0005] 在癌癥肽疫苗療法中，被認為是主要的效應細胞的表位特異性細胞毒性T淋巴細 胞（以下，簡稱為CTL)引起的細胞性免疫是HLA限制性的，實施了以具有特定的HLA分型、 且具體而言僅以具有對象患者數多的HLA-A2或HLA-A24分型的患者為對象的癌癥肽疫苗 開發。
[0006] 但是，這2種HLA分型持有比例在日本人中分別為約40%、60% (非專利文獻5)， 存在具有這2種以外的HLA分型的患者不能接受癌癥肽疫苗的好處的問題。因此，在治療 開始前需要HLA分型檢查成為使治療的開始時期延遲、使患者負擔增大的一個原因。由以 上考慮，期望不需要HLA分型檢查、可適用于全部癌癥患者的癌癥肽疫苗的開發、研究。
[0007] 另外，已知在癌癥肽疫苗療法中，除了作為細胞免疫的CTL的活化之外，通過誘導 作為體液免疫的免疫球蛋白產生，有助于延長壽命的效果（非專利文獻6)。
[0008] 現有技術文獻
[0009] 非專利文獻
[0010] 非專利文獻 I :Rosenberg SA et al.，Nature Med. 2〇04, 10 (9) : 9O9-I5
[0011] 非專利文獻 2 :Terasaki M et al.，J Clin Oncol. 2011，29(3) :337-44
[0012] 非專利文獻 3:Noguchi M et al. , Cancer Immunol, lmmunother. 2010, 59(7):1001-9
[0013] 非專利文獻 4 :Yanagimoto H et al.，Cancer Sci. 2007, 98 (4) :605-11
[0014] 非專利文獻 5 :Sette A et al.，Immunogenetics. 1999, 50 (3-4) : 201-12
[0015] 非專利文獻 6 :Noguchi M et al.，Cancer Biol. Ther. 2011，10(12) :1266-79
【發明內容】
[0016] 本發明的目的在于，提供一種癌癥抗原肽，所述癌癥抗原肽可作為癌癥肽疫苗施 用于廣泛的癌癥患者，而不需要HLA分型檢查、且不限于具有特定HLA分型的患者。
[0017] 本發明人等為了解決上述課題進行了潛心研究，結果發現：通過將選自報道具有 HLA-A2、HLA-A24、HLA-A26或HLA-A3超型的任一種的限制性CTL的誘導能力或具有上述多 種HLA-A限制性的CTL的誘導能力的CTL表位肽中的5個肽經由接頭連接而得到的具有5 個連接的CTL表位的肽，可以施用于廣泛的癌癥患者而不需要HLA分型檢查、且不限于具有 特定的HLA分型的患者，從而施用該具有5個連接的CTL表位的肽，由此，較強地誘導對構 成該肽的CTL表位肽特異性的CTL及免疫球蛋白，直至完成了本發明。
[0018] SP，本發明具有以下特征。
[0019] [1] -種具有5個連接的表位的肽，其從由以下的CTL表位肽：序列號1所示的肽 (PEPl)、序列號2所示的肽（PEP2)、序列號3所示的肽（PEP3)、序列號4所示的肽（PEP4)、 序列號5所示的肽（PEP5)、序列號6所示的肽（PEP6)、及序列號7所示的肽（PEP7)構成的 組中可以重復選擇的5個肽經由接頭分別連接而成，并且
[0020] 所述具有5個連接的表位的肽具有選自以下的（1)~（12)的一個或多個特征：
[0021] (1)含有PEP5和PEP2經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0022] (2)含有PEP2和PEP4經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0023] (3)含有PEP4和PEP6經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0024] (4)含有PEP6和PEP3經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0025] (5)含有PEP4和PEPl經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0026] (6)含有PEPl和PEP3經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0027] (7)含有PEP4和PEP2經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0028] (8)含有PEPl和PEP4經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0029] (9)含有PEP5和PEPl經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0030] (10)含有PEP6和PEP5經由接頭從N末端側依次相鄰的序列；
[0031] (11)在C末端含有PEP2 ;以及
[0032] (12)在 C 末端含有 PEP3。
[0033] [2]根據[1]的具有5個連接的表位的肽，其包含在N末端含有PEP5和PEP2、PEP6 和PEP5、或PEP4和PEP6經由接頭從N末端側依次相鄰的序列和/或在C末端含有PEP7 和 PEP3、PEP4 和 PEP3、PEP6 和 PEP3、PEPl 和 PEP3、PEP5 和 PEP2、PEP4 和 PEP2、或 PEP5 和 PEP3經由接頭從N末端側依次相鄰的序列。
[0034] [3]根據[2]的具有5個連接的表位的肽，其含有選自以下的（a)~（p)中的序 列：
[0035] (a) PEP5-PEP2-PEP4-PEP7-PEP3 ；
[0036] (b)PEP5-PEP2-PEP7-PEP3-PEP4 ；
[0037] (c) PEP4-PEP6-PEP5-PEP7-PEP3 ；
[0038] (d)PEP5-PEP2-PEP4-PEP6-PEP3 ；
[0039] (e)PEP5-PEP2-PEP4-PEPl-PEP3 ；
[0040] (f)PEP4-PEP5-PEP2-PEP7-PEP3 ；
[0041] (g)PEP7-PEP3-PEP4-PEP5-PEP2 ；
[0042] (h)PEP5-PEP7-PEP3-PEP4-PEP2 ；
[0043] (i)PEP6-PEPI-PEP4-PEP5-PEP2 ;
[0044] (j)PEP6-PEP5-PEPl-PEP4-PEP2 ；
[0045] (k)PEP4-PEP5-PEPI-PEP6-PEP3 ;
[0046] (1)PEP7-PEP2-PEP4-PEP5-PEP3 ；
[0047] (m)PEP4-PEP2-PEP7-PEP5-PEP3 ；
[0048] (η)PEP7-PEP2-PEP5-PEP4-PEP3 ；
[0049] (o)PEP5-PEP2-PEP7-PEP4-PEP3 ;或
[0050] (p)PEP5-PEP2-PEP4-PEP3-PEP7 ；
[0051] 其中，式中表示接頭。
[0052] [4]根據[1]~[3]中任一項的具有5個連接的表位的肽，其中，所述接頭為氨基 Ife接頭。
[0053] [5]根據[4]的具有5個連接的表位的肽，其中，所述氨基酸接頭為連接2個精氨 酸的精氨酸二聚體。
[0054] [6] -種CTL，其通過使用根據[1]~[5]中任一項的具有5個連接的表位的肽刺 激外周血淋巴細胞而得到。
[0055] [7] -種用于治療或預防癌癥的藥物組合物，其含有根據[1]~[5]中任一項的具 有5個連接的表位的肽、或根據[6]的CTL作為有效成分。
[0056] [8]根據[7]的藥物組合物，其為免疫治療劑。
[0057] [9] 一種癌癥的治療方法，其包括：將根據[1]~[5]中任一項的具有5個連接的 表位的肽、或根據[6]的CTL施用于癌癥患者。
[0058] [1