一種裂環多氧取代環己烯類化合物及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于天然藥物領域，涉及一種裂環多氧取代環己烯類化合物及其應用，具 體是一種來源于毛葉鷹爪花的具有新穎結構的裂環多氧取代環己烯類化合物及其在抗腫 瘤藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 隨著腫瘤發生機制的不斷被闡明以及抗腫瘤作用靶點的不斷被發現，多靶點抑制 腫瘤信號轉導成為新型抗腫瘤藥物開發的重要方向。相對于單靶點藥物和多種單靶點藥 物聯合用藥來說，多靶點藥物具有更多的優越性。多靶點藥物可有效避免產生藥物之間的 相互作用，減少不良反應，治療作用更全面等優點。在各種分子靶點中，蛋白酷氨酸激酶 (protein tyrosine kinase，PTK)是目前效果最明顯且應用前景最廣闊的抗腫瘤藥物作用 靶點之一。PTK是一組催化蛋白質酪氨酸殘基磷酸化的酶系，其在細胞內的信號轉導中起著 十分重要的作用，與腫瘤細胞的生長、增殖、分化和凋亡密切相關，通過抑制PTK可破壞腫 瘤細胞的信號傳遞，抑制腫瘤細胞增殖，從而達到抗腫瘤的目的。目前已有多種酪氨酸激酶 抑制劑類抗腫瘤藥物上市或進入臨床研宄，并取得了良好的臨床療效，如伊馬替尼等靶向 抗腫瘤藥物。
[0003] 番落枝科（Annonaceae)鷹爪花屬（Artabotrys)植物，通常為攀援灌木植物，全世 界約有100種，分布于熱帶和亞熱帶地區，我國產4種，即毛葉鷹爪花（A.pilosus Merr. et Chun)、狹辦鷹爪花（A. hainanensis R. Ε· Fries)、香港鷹爪花（A. hongkongensis Hance)和 鷹爪花（A. hexapetalus (L. f. )Bhandari)，分布于西南部至東南部，其中毛葉鷹爪花和狹瓣 鷹爪花為海南特有植物[中國科學院中國植物志編委會.中國植物志.第30卷.科學出 版社.北京：1979，pl21-128.]。在民間，鷹爪花屬植物作藥用植物已有很長歷史，具有清 熱解毒，消炎止痛的功效，常用作治療瘧疾和頭頸部淋巴結核等。現代藥理學研宄表明，該 屬植物具有廣泛的生物活性，如抗腫瘤、抗菌、抗瘧以及殺蟲等活性[顧關云；蔣昱.番荔枝 科植物細胞毒成分的研宄概況III.國外醫藥（植物藥分冊），1995, 10:153-156. ;RadlofT P.D,Philipps J, Nkeyi M,et al.Arteflene compared with mefloquine for treating Plasmodium falciparum malaria in children. American Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 1996, 55:259-262. ；Singh D. K, Basha S. A, Sarma, B. K, et al. Antifungal activity of a phytoterpenoid (AOS-A) isolated from Artabotrytis odoratissimus on spore germination of some fungi. Mycobiology, 2006, 34:120-123. ；Srivastava B,Singh P,Srivastava A. K, et al. Efficacy of Artabotrys odoratissimus oil as a plant based antimicrobial against storage fungi and a flatoxin BI secretion. International Journal of Food Science and Technology,2009, 44:1909-1915.； Tattersfield F, Potter C.The insecticidal properties of certain species of Annona and of an Indian strain of Mundulea sericea.Annals of Applied Biology, 1940, 27:262-273.]。正因為如此，多年來，該屬植物備受植物化學界和藥理 學界的青睞，截至目前已從該屬多種植物中分離鑒定了大量類型極其豐富并具有廣 泛生物活性的化合物，如生物堿類化合物[Zhou Q，Fu Y.H，Li X.B，et al.Bioactive benzylisoquinoline alkaloids from Artabotrys hexapetalus. Phytochemistry Lett. 2015, 11:296-300. ；Sichaem JjRuksilp TjWorawalai Wj et al.A new dimeric aporphine from the roots of Artabotrys spinosus. Fitoterapia 2011，82:422-425.]、 砲類化合物[Gupta C，Prasad S，Sahai M，et al. Artabotryols A_E，New Lanostane Triterpenes from the Seeds of Artabotrys odoratissimus. Helv.Chim. Act. 2010, 93:1925-1932. ；Zhang LjZhou W. Sj Xu X. X. et al.A new sesquiterpene peroxide(yingzhaosu C)and sesquiterpenol(yingzhaosu D)from Artabotrys unciatus(L. )Meer. J. Chem. Soc.，Chem. Commun. 1988, 8:523-524. ]、丁內醋類化合物[Wong H. Fj Brown,G.D. β -Methoxy-γ-methylene-α , β -unsaturated-γ -butyrolactones from Artabotrys hexapetalus. Phytochemistry，2002, 59:99-104·]以及黃酮類化合物 [Li T. Mj Li W. Kj Yu J. G. Flavonoids from Artabotrys hexapetalus. Phytochemistry 1997,45:831-833. ；Singh A. Pj Sahai M. Isolation of flavonol glycosides from the leaves of Artabotrys odoratissmus. Planta med. 1996, 62:192-194·]等多種結構類型化 合物。
[0004] 裂環多氧取代環己烯類化合物是一類極其罕見的化合物類型，分布植物類群極 其狹窄，主要分布于番荔枝科紫玉盤屬植物中，截至目前為止僅報道7個該類型化合物 [Chen Zj Liu Y. Lj Xu Q. M. et al. New polyoxygenated cyclohexene and polyoxygenated seco-cyclohexene from Uvaria boniana. J.Asian Nat. Prod. Res. 2013, 15, 53-58.； Zhang C. RjWu YjYue J. M. Chin. J. Nat. Med. 2010, 8, 84-87. ；Wang SjChen R. Yj Yu S. S. et al. Uvamalols D-Gmovel polyoxygenated seco-cyclohexenes from the roots of Uvaria macrophylla. J. Asian Nat. Prod. Res. 2003, 5, 17-23. ；Lu Y. Pj Mu Q，Zheng H. L. et al. Two new constituents from Uvaria microcarpa. Chin. Chem. Lett. 1995, 6, 775-778.]。
[0005] 毛葉鷹爪花（(A. pilosus)為番荔枝科鷹爪花屬植物，常生于低海拔至中海拔的 山地林中，為我國特有植物，僅分布于海南島。前期初步研究發現，毛葉鷹爪花的乙醇提取 物具有很好的抗 HIV 活性[He J.J，Park I.W，Chen G.Y.et al. Extracts of medicinal plant and uses thereof. PCT Int.Appl. 2011，TO 2011014561 Al 20110203·]，除此之外， 目前國內外均未見有關毛葉鷹爪花中化學成分及其生物活性的研究報道。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的是提供一種裂環多氧取代環己烯類化合物及其應用，是從毛葉鷹爪 花枝葉中分離得到的具有新穎結構的裂環多氧取代環己烯類化合物artabotrol A。多種體 外活性篩選表明：該化合物具有顯著的抗腫瘤活性和與陽性對照藥相當的蛋白酪氨酸激酶 的抑制活性，可以進一步開發成以蛋白酪氨酸激酶為靶標的抗腫瘤藥物。
[0007] 本發明所提供的裂環多氧取代環己烯類化合物artabotrol A的化學結構如下：
[0008]
[0009] -種從毛葉鷹爪花枝葉中分離純化化合物artabotrol A的分離純化方法，其詳細 步驟包括：
[0010] A.將毛葉鷹爪花枝葉用甲醇或95%乙醇溶液提取3次，過濾，收集濾液，再減壓濃 縮干燥，獲得醇提取物；
[0011] B.將醇提取物加水制成混懸液，依次用石油醚和乙酸乙酯進行萃取，乙酸乙酯萃 取液減壓濃縮，得乙酸乙酯萃取浸膏；
[0012] C.將乙酸乙醋萃取浸膏進行柱色譜分離純化，得到單體化合物artabotrol A。
[0013] 進一步的，上述制備方法的步驟C包括：1、將乙酸乙酯萃取浸膏用硅膠柱層析劃 段，分別按體積比20:1，10:1，5:1，1:1進行石油醚-丙酮梯度洗脫，收集體積比為10:1的 石油醚-丙酮的洗脫物；2、取石油醚-丙酮（體積比10:1)洗脫物經MCI樹脂柱層析去除 色素，分別按體積比30:70, 50:50, 70:30進行甲醇-水梯度洗脫，收集體積比為70:30的 甲醇-水的洗脫物；3、取甲醇-水（體積比70:30)洗脫物進行反相硅膠柱層析，按體積 比60:40,65:45, 70:30進行甲醇-水梯度洗脫，收集體積比為60:40的甲醇-水的洗脫物 濃縮；4、取甲醇-水（體積比60:40)洗脫物用制備型高效液相色譜分離，流動相為體積比 35:65的乙腈-水，得到單體化合物artabotrol A。
[0014] 本發明所提供的化合