目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置、核酸精制裝置、目標(biāo)物質(zhì)的生成方法以及核酸擴(kuò)增方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置、核酸精制裝置、目標(biāo)物質(zhì)的生成方法以及核酸擴(kuò)增方法。
【背景技術(shù)】
[0002]使用二氧化硅粒子等核酸結(jié)合性固相載體與離液劑從生物體材料更加簡(jiǎn)便地提取核酸的方法，由Boom等的報(bào)告中提出(參照非專(zhuān)利文獻(xiàn)I)。包含該Boom等的方法，使用二氧化硅等核酸結(jié)合性固相載體與離液劑使核酸吸附于載體并提取的方法主要由以下三個(gè)工序構(gòu)成:(I)在離液劑存在下使核酸吸附于核酸結(jié)合性固相載體的工序(吸附工序)；
[2]為了除掉非特異地結(jié)合的夾雜物以及離液劑，而用清洗液清洗吸附有核酸的載體的工序(清洗工序)；以及(3)用水或者低鹽濃度緩沖液使核酸從載體溶出的工序(溶出工序)(參照專(zhuān)利文獻(xiàn)I以及2)。
[0003]專(zhuān)利文獻(xiàn)1:日本特開(kāi)平11-146783號(hào)公開(kāi)公報(bào)
[0004]專(zhuān)利文獻(xiàn)2:日本特開(kāi)2009-207459號(hào)公開(kāi)公報(bào)
[0005]非專(zhuān)利文獻(xiàn)I:J.Clin.Microb1l.，vol.28Νο.3，p.495-503 (1990)
[0006]然而，作為載體使用的磁性粒子是一粒粒非常小的微粒子，并且其表面為親水性，因此若由來(lái)自外部的磁力所實(shí)施的操作不充分則存在一部分殘留于作為水溶液的溶出液內(nèi)這一課題。若磁性粒子殘留于溶出液，則在進(jìn)行其后的擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)，會(huì)阻擋檢測(cè)用的激勵(lì)光從而阻礙對(duì)反應(yīng)的檢測(cè)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007]因此，本發(fā)明的目的在于，提供一種能夠高效地除去磁性體的目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置、核酸精制裝置、目標(biāo)物質(zhì)的生成方法以及核酸擴(kuò)增方法。
[0008]本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式是一種目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置，該目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置具有:毛細(xì)管，該毛細(xì)管具有長(zhǎng)度方向，并且在內(nèi)部依次具備由油構(gòu)成的液柱、由與油相分離并且從將目標(biāo)物質(zhì)保持為能夠裝卸的磁性體溶出上述目標(biāo)物質(zhì)的溶出液構(gòu)成的液柱以及由油構(gòu)成的液柱；磁力施加機(jī)構(gòu)，該磁力施加機(jī)構(gòu)對(duì)上述毛細(xì)管施加磁力來(lái)保持上述磁性體，控制上述磁性體在毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)；以及送液機(jī)構(gòu)，該送液機(jī)構(gòu)在上述磁力施加機(jī)構(gòu)對(duì)上述磁性體在上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)進(jìn)行限制的期間，使上述溶出液沿著上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向移動(dòng)。上述精制裝置也可以具有能夠安裝上述毛細(xì)管的安裝部。上述磁力施加機(jī)構(gòu)也可以具有永久磁鐵，上述送液機(jī)構(gòu)也可以具有加壓機(jī)構(gòu)，上述加壓機(jī)構(gòu)也可以為柱塞。
[0009]本發(fā)明的另一實(shí)施方式是一種核酸精制裝置，該核酸精制裝置具有:毛細(xì)管，該毛細(xì)管具有長(zhǎng)度方向，并且在內(nèi)部依次具備由油構(gòu)成的油液柱、由清洗液構(gòu)成的清洗液液柱、由與由油構(gòu)成的油液柱相分離并且從將核酸保持為能夠裝卸的磁性體溶出上述核酸的溶出液構(gòu)成的溶出液液柱以及由油構(gòu)成的油液柱；磁力施加機(jī)構(gòu)，該磁力施加機(jī)構(gòu)對(duì)上述毛細(xì)管施加磁力來(lái)保持上述磁性體，控制上述磁性體在毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)；以及送液機(jī)構(gòu)，該送液機(jī)構(gòu)在上述磁力施加機(jī)構(gòu)對(duì)上述磁性體在上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)進(jìn)行限制的期間，使上述溶出液液柱沿著上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向移動(dòng)。上述磁力施加機(jī)構(gòu)也可以使上述磁性體在與上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向相交的面內(nèi)移動(dòng)。也可以具備與上述毛細(xì)管的內(nèi)部連通的核酸擴(kuò)增用容器。上述核酸擴(kuò)增用容器也可以包含凍結(jié)干燥的核酸擴(kuò)增用試劑。
[0010]本發(fā)明的又一實(shí)施方式是一種目標(biāo)物質(zhì)的精制方法，該目標(biāo)物質(zhì)的精制方法包含:向毛細(xì)管內(nèi)導(dǎo)入保持有上述目標(biāo)物質(zhì)的磁性體的工序，上述毛細(xì)管具有長(zhǎng)度方向，并且在內(nèi)部依次具備由油構(gòu)成的液柱、由與油相分離并且從將上述目標(biāo)物質(zhì)保持為能夠裝卸的磁性體溶出上述目標(biāo)物質(zhì)的溶出液構(gòu)成的溶出液液柱以及由油構(gòu)成的液柱；從上述毛細(xì)管外施加磁力，來(lái)在上述溶出液液柱內(nèi)移動(dòng)并保持上述磁性體的工序；在上述溶出液內(nèi)使上述目標(biāo)物質(zhì)從上述磁性體溶出的工序；以及一邊限制上述磁性體在上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)，一邊使溶出了上述目標(biāo)物質(zhì)的上述溶出液沿著上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向移動(dòng)而從上述毛細(xì)管向外排出的工序。上述精制方法也可以具有使上述磁性體在與上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向相交的面內(nèi)移動(dòng)的工序。也可以通過(guò)對(duì)上述毛細(xì)管內(nèi)加壓而使溶出了上述目標(biāo)物質(zhì)的上述溶出液沿著上述毛細(xì)管的長(zhǎng)度方向移動(dòng)。也可以通過(guò)柱塞對(duì)上述毛細(xì)管內(nèi)加壓。
[0011]本發(fā)明的又一實(shí)施方式是對(duì)利用上述任一項(xiàng)的方法得到的上述目標(biāo)物質(zhì)即核酸進(jìn)行擴(kuò)增的核酸擴(kuò)增方法。
[0012]根據(jù)本發(fā)明能夠提供能夠高效地除去磁性體的目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置、核酸精制裝置、目標(biāo)物質(zhì)的生成方法以及核酸擴(kuò)增方法。
【附圖說(shuō)明】
[0013]圖1是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制裝置的示意圖。
[0014]圖2是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的毛細(xì)管內(nèi)的液柱附近的放大圖。
[0015]圖3是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的具有反應(yīng)容器及物質(zhì)提取用裝置的核酸的精制裝置的示意圖。
[0016]圖4是表示本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制裝置的使用方法的示意圖。
[0017]圖5是表示本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制裝置的使用方法的具體順序的示意圖。
[0018]圖6是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制裝置的示意圖。
[0019]圖7是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制方法中的向核酸的精制裝置加入檢體的溶解液的示意圖。
[0020]圖8是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制方法中的一邊擺動(dòng)磁性粒子一邊使其移動(dòng)至溶出液的示意圖。
[0021]圖9是本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式的核酸的精制方法中的從毛細(xì)管壓出溶出液的示意圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022]本發(fā)明的目的、特征、優(yōu)點(diǎn)及其想法通過(guò)本說(shuō)明書(shū)的記載，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言清楚易懂，根據(jù)本說(shuō)明書(shū)的記載，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易地再現(xiàn)本發(fā)明。以下記載的發(fā)明的實(shí)施方式以及具體的實(shí)施例等是表示本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式的例子，是用于例示或者說(shuō)明而示出的，本發(fā)明并不被它們所限定。在本說(shuō)明書(shū)所公開(kāi)的本發(fā)明的意圖以及范圍內(nèi)，基于本說(shuō)明書(shū)的記載，能夠進(jìn)行各種改變以及修飾，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見(jiàn)的。
[0023]==目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置==
[0024]如圖1的左圖所示，本發(fā)明的目標(biāo)物質(zhì)的精制裝置80的一個(gè)實(shí)施方式具有:毛細(xì)管12，其具有液柱狀的液體10 ;磁性體M，其在毛細(xì)管12內(nèi)將目標(biāo)物質(zhì)保持為能夠裝卸；磁力施加機(jī)構(gòu)20，其對(duì)毛細(xì)管12施加磁力，保持磁性體M，并且控制磁性體M的毛細(xì)管12的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)；以及送液機(jī)構(gòu)18，其在磁力施加機(jī)構(gòu)20限制磁性體M的移動(dòng)的期間，使液體沿著毛細(xì)管12的長(zhǎng)度方向移動(dòng)。
[0025]液柱狀的液體10優(yōu)選為水溶液，優(yōu)選為鹽溶液、特別優(yōu)選為緩沖液。毛細(xì)管12雖然也可以具有多個(gè)液柱，但在該情況下，為了使液柱狀的液體與液柱狀的液體獨(dú)立地存在，優(yōu)選在液柱之間設(shè)置液柱狀的蠟或者油。
[0026]毛細(xì)管12在內(nèi)部具有空洞，在該空洞內(nèi)具有能夠使液體沿著長(zhǎng)度方向流通的管狀的部分(也稱(chēng)為管部)。管部雖然具有長(zhǎng)度方向，但也可以彎曲。對(duì)于管部的內(nèi)部的空洞而言，只要液體能夠在管部?jī)?nèi)維持液柱形狀，則大小、形狀均不特別限定。另外，管部的內(nèi)部的空洞的大小、與長(zhǎng)度方向垂直的剖面的形狀，也可以沿著管部的長(zhǎng)度方向變化。液體能否在管部?jī)?nèi)維持液柱形狀，取決于管部的材質(zhì)、液體的種類(lèi)等條件，所以管部的與長(zhǎng)度方向垂直的剖面的形狀在液體能夠在管部?jī)?nèi)維持液柱形狀的范圍內(nèi)可以適當(dāng)?shù)剡M(jìn)行設(shè)計(jì)。管部的外形的與長(zhǎng)度方向垂直的剖面的形狀也不限定。并且，管部的壁厚也不特別限定。在管部的內(nèi)部的空洞的與長(zhǎng)度方向垂直的剖面為圓形的情況下，管部的內(nèi)徑(內(nèi)部的空洞的與長(zhǎng)度方向垂直的剖面的圓的直徑)例如能夠?yàn)?.5mm以上且3mm以下。若管部的內(nèi)徑處于該范圍，則能夠在管的材質(zhì)、液體的種類(lèi)它們的更寬的范圍內(nèi)容易形成液體的液柱，因此優(yōu)選。管部的材質(zhì)并不特別限定，例如能夠?yàn)椴Ａ?、高分子、金屬等。?duì)于管部的材質(zhì)，若選擇玻璃、高分子等在可見(jiàn)光中具有透明性的材質(zhì)，則因?yàn)槟軌驈墓懿康耐獠坑^察內(nèi)部(空洞內(nèi))而更加優(yōu)選。另外，對(duì)于管部的材質(zhì)，若選擇透過(guò)磁力的物質(zhì)、非磁性體，則因?yàn)樵谑勾判泽wM通過(guò)管部的情況等中，通過(guò)從管部外施加磁力來(lái)進(jìn)行，因此變得容易而優(yōu)選。
[0027]目標(biāo)物質(zhì)未被限定，可以是核酸(DNA、RNA等)、蛋白質(zhì)等高分子，也可以是化合物等低分子。磁性體M的形狀雖然不特別限定，但優(yōu)選為粒子狀。為了將目標(biāo)物質(zhì)保持為能夠裝卸，磁性體M與目標(biāo)物質(zhì)能夠裝卸地結(jié)合，或者具有與目標(biāo)物質(zhì)能夠裝卸地結(jié)合的目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合物質(zhì)。例如，在目標(biāo)物質(zhì)為核酸的情況下，磁性體M可以具有二氧化硅、玻璃、硅藻土等核酸結(jié)合分子，在目標(biāo)物質(zhì)為抗體的情況下，磁性體M可以具有ProteinA等抗體結(jié)合分子。
[0028]本發(fā)明的精制裝置80具備磁力施加機(jī)構(gòu)20。從毛細(xì)管12外向毛細(xì)管12施加磁力，能夠保持毛細(xì)管12內(nèi)的磁性體M，并且控制該磁性體M的移動(dòng)的磁力施加機(jī)構(gòu)20，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言能夠容易地設(shè)計(jì)出。例如，磁力施加機(jī)構(gòu)20具有被施加體支承部16支承的永久磁鐵等磁力施加體14，并能夠通過(guò)磁力施加體14的磁力保持磁性體M。磁力施加機(jī)構(gòu)20還能夠控制磁性體M在毛細(xì)管12的長(zhǎng)度方向的移動(dòng)，并能夠任意地使該移動(dòng)停止。這能夠通過(guò)例如設(shè)置能夠移動(dòng)磁力施加體14使其在優(yōu)選位置停止的機(jī)構(gòu)來(lái)實(shí)現(xiàn)。另夕卜，優(yōu)選該磁力施加機(jī)構(gòu)20在與毛細(xì)管12的長(zhǎng)度方向相交的面內(nèi)特別是正交的面內(nèi)，具有移動(dòng)磁性體M的移動(dòng)機(jī)構(gòu)，即能夠擺動(dòng)磁性體M。例如，磁性體M因?yàn)楸痪嚯x近的磁力施加體14吸引，所以設(shè)置兩個(gè)磁力施加體14來(lái)作為移動(dòng)機(jī)構(gòu)，若一方的磁力施加體14與毛細(xì)管接近，則磁性體M被吸引至該磁