一種從白屈菜中提取的白屈菜多糖及其應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥領域，特別是涉及一種從白屈菜中提取的白屈菜多糖及其應用。
【背景技術】
[0002] 近年來，隨著社會科技的進步，生活水平的提高及公眾自我保健意識的增強，越來 越多的人將目光聚焦在能夠增強免疫作用的產品上，大大促進了免疫增強產品的研宄。植 物多糖是一類從天然藥物中提取的成分，現代研宄表明，植物多糖具有提高人體免疫力、抗 腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、愈潰瘍等方面的活性。并且，許多研宄表明， 多糖具有較強的生物活性，為天然藥物發揮作用的主要有效成分。
[0003] 白屈菜為罌粟科白屈菜屬植物白屈菜（Chelidonium majus L)的干燥全草，為 2010版中華人民共和國藥典（一部）新增品種。其味苦，性涼，有毒：全草入藥，有解痙鎮 痛、止咳平喘之功效；用于胃脘攣痛，咳嗽氣喘，百日咳。目前天然藥物化學及藥理學方面的 研宄主要集中在白屈菜的生物堿類成分方面，但對其多糖類成分的提取分離及其藥理活性 的研宄卻未見報道。
【發明內容】
[0004] 針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種從白屈菜中 提取的白屈菜多糖及其應用，可有效解決白屈菜多糖的提取，并有效用于增強免疫力產品 中的問題。
[0005] 本發明解決的技術方案是，一種從白屈菜中提取的白屈菜多糖，所述白屈菜多糖 的提取方法包括以下步驟：
[0006] (1)取白屈菜藥材粉末，加入10~40倍白屈菜藥材粉末重量的水，60~100°C提 取2~3次，每次1~3h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至40°C相對密度1. 10~1. 20,得到多 糖濃縮液；
[0007] (2)在步驟（1)的多糖濃縮液中加入體積分數95%~100%乙醇至含醇量達到 80%，靜置過夜，取底部沉淀，對所得沉淀物依次用沉淀物重量50~100倍的無水乙醇、丙 酮、無水乙醚各洗絳1~2次，干燥，得到粗多糖；
[0008] (3)取步驟（2)的粗多糖0. 2~1.0 g溶于IOmL水中，上樣于HPD-600型大孔吸附 樹脂柱，并以200~300mL水洗脫，流速為0. 5~I. 5mL/min，收集洗脫液，再減壓濃縮至洗 脫液原體積的1/2-2/3 ;加入體積分數95%~100%乙醇至含醇量達到80%，靜置過夜，取 底部沉淀，對所得沉淀物依次用沉淀物重量50~100倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各洗滌 1~2次，干燥，得到白屈菜多糖。
[0009] 步驟（1)中的白屈菜藥材粉末為過2號藥典篩的粉末。
[0010] 本發明的技術方案還在于提供一種白屈菜多糖在制備增強免疫功能藥物中的應 用。
[0011] 本發明的技術方案還在于提供一種白屈菜多糖在制備增強免疫功能保健食品中 的應用。
[0012] 本發明從白屈菜中提取白屈菜多糖，原料為天然中藥材，來源廣泛，成本低廉。本 發明的白屈菜多糖為灰褐色粉末，具有較強的增強機體免疫力的作用，應用于藥物中，能夠 實現白屈菜在制備增強機體免疫力的藥物和保健食品中的應用，開辟了白屈菜藥材的應用 新前景，具有很好的社會效益和經濟效益，是中藥上的創新。同時，本發明方法簡單，易于工 業化推廣。
【具體實施方式】
[0013] 以下結合實施例對本發明的【具體實施方式】作詳細說明。
[0014] 實施例1
[0015] 本實施例的白屈菜多糖的提取方法包括以下步驟：
[0016] (1)取白屈菜藥材粉末，加入10倍白屈菜藥材粉末重量的水，60°C提取2次，每次 lh，過濾，合并濾液，減壓濃縮至40°C相對密度1. 10,得到多糖濃縮液；
[0017] (2)在步驟（1)的多糖濃縮液中加入體積分數95%乙醇至含醇量達到80%，靜置 過夜，取底部沉淀，對所得沉淀物依次用沉淀物重量50倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各洗 滌1次，干燥，得到粗多糖；
[0018] (3)取步驟（2)的粗多糖0. 2g溶于IOmL水中，上樣于HPD-600型大孔吸附樹脂 柱，并以200mL水洗脫，流速為0. 5mL/min，收集洗脫液，再減壓濃縮至洗脫液原體積的1/2 ; 加入體積分數95 %乙醇至含醇量達到80 %，靜置過夜，取底部沉淀，對所得沉淀物依次用 沉淀物重量50倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各洗滌1次，干燥，得到白屈菜多糖。
[0019] 實施例2
[0020] 本實施例的白屈菜多糖的提取方法包括以下步驟：
[0021] (1)取白屈菜藥材粉末，加入40倍白屈菜藥材粉末重量的水，100°C提取3次，每次 3h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至40°C相對密度1. 20,得到多糖濃縮液；
[0022] (2)在步驟（1)的多糖濃縮液中加入體積分數100%乙醇至含醇量達到80%，靜置 過夜，取底部沉淀，對所得沉淀物依次用沉淀物重量100倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各 洗滌2次，干燥，得到粗多糖；
[0023] (3)取步驟⑵的粗多糖1.0 g溶于IOmL水中，上樣于HPD-600型大孔吸附樹脂 柱，并以300mL水洗脫，流速為I. 5mL/min，收集洗脫液，再減壓濃縮至洗脫液原體積的2/3 ; 加入體積分數100%乙醇至含醇量達到80%，靜置過夜，取底部沉淀，對所得沉淀物依次用 沉淀物重量100倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各洗滌2次，干燥，得到白屈菜多糖。
[0024] 實施例3
[0025] 本實施例的白屈菜多糖的提取方法包括以下步驟：
[0026] (1)取白屈菜藥材粉末，加入25倍白屈菜藥材粉末重量的水，80°C提取2次，每次 2h，過濾，合并濾液，減壓濃縮至40°C相對密度1. 15,得到多糖濃縮液；
[0027] (2)在步驟（1)的多糖濃縮液中加入體積分數98%乙醇至含醇量達到80%，靜置 過夜，取底部沉淀，對所得沉淀物依次用沉淀物重量60倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各洗 滌1次，干燥，得到粗多糖；
[0028] (3)取步驟⑵的粗多糖0. 5g溶于IOmL水中，上樣于HPD-600型大孔吸附樹脂 柱，并以250mL水洗脫，流速為1.0 mL/min，收集洗脫液，再減壓濃縮至洗脫液原體積的1/2 ; 加入體積分數98 %乙醇至含醇量達到80 %，靜置過夜，對所得沉淀物依次用沉淀物重量60 倍的無水乙醇、丙酮、無水乙醚各洗滌1次，干燥，得到白屈菜多糖。
[0029] 本發明的白屈菜多糖可用于藥品的制備，特別是用于增強免疫力藥物，并經試驗 得到了充分證明，有關試驗資料如下：
[0030] 檢驗結果
[0031] 實施例1所得白屈菜多糖為灰褐色粉末，多糖得率為15. 63%，經苯酚-硫酸法測 定多糖含量為51. 48%。
[0032] 白屈菜多糖增強免疫功能的實驗
[0033] 實驗材料
[0034] 1.實驗動物：昆明種清潔級健康小鼠，體重18~22g，雌雄各半，由山東魯抗醫藥 股份有限公司實驗動物室提供，合格證號：SCXK魯20130001。
[0035] 2.實驗藥品：白屈菜多糖，瑞士染液，香菇多糖片（開封制藥集團有限公司），注射 用環磷酰胺（山西普德藥業有限公司），枸櫞酸鈉，氯化鈣，氯化鈉，酒石酸鉀鈉，氯化鉀，葡 萄糖，磷酸氫二鉀，磷酸二氫鉀，酚紅。
[0036] 二、實驗方法
[0037] 1.白屈菜多糖對免疫低下小鼠溶血素和溶血空斑形成的影響
[0038] 取昆明種小鼠300只，體重20g左右，雌雄各半，隨機分6組，每組50只，分別為： 空白對照組、模型組、陽性對照組、白屈菜多糖50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg劑量組。除了 空白對照組外，其余各組均腹腔注射濃度為8mg/mL的環磷酰胺溶液連續3天，建立環磷酰 胺免疫低下小鼠模型。7~10天內除空白組小鼠免疫功能全部降低。造模后第1天各組小 鼠均腹腔注射〇. 2mL/只的5%的綿羊紅細胞生理鹽水混懸液進行免疫。造模結束后第1-7 天，陽性對照組（香葫多糖l〇〇mg/kg)，白屈菜多糖50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg劑量組分 別按照相應的劑量每天給藥一次；對空白對照組、模型組小鼠每天一次灌服等體積生理鹽 水溶液，每天給藥1次，持續給藥7天。第7天給藥2h后，小鼠摘眼球取血，離心，得到上層 血清，血清用生理鹽水稀釋100倍。吸ImL的血清稀釋液、0. 5mL體積分數5%綿羊紅細胞 混懸液與0. 5mL體積分數10 %豚鼠血清混合均勾，置于37 °C水浴鍋30min后，置于冰水中 終止反應，以2500r/min離心10min。另設不加血清空白管作對照，取上清液于540nm處測 吸光度，得各組小鼠的溶血素形成情況，結果見表1。
[0039] 將摘眼球取血后的小鼠脫頸椎處死，解剖取脾臟，勻漿，并調整脾細胞