新地錢素a的人工合成方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于藥物化學技術領域，具體涉及一種天然藥物化合物的制備方法，尤其涉及新地錢素A的人工合成方法。
[0002]
【背景技術】
[0003]苔類植物在全球有6000余種，其中我國特有種類約100多種。對苔類植物活性成分的研宄表明，苔類植物是生物活性天然產物的重要來源。近年來從苔類植物中分離獲得了大量結構新穎并且活性顯著的化合物，其中許多可作為新藥研宄的先導化合物。新地錢素A (Neomarchantin A)是一種新型雙聯節類化合物，由山東大學天然藥物化學課題組在對采自四川樂山的粗裂地錢的化學成分進行分析時首次獲得。研宄發現，新地錢素A對人肺腺癌細胞株A-549作用突出，對P-388白血病細胞株毒也具有中等的細胞毒作用。但因其天然產物的生長周期相對較長，含量相對偏低，分離技術復雜，這些因素增加了對其生物學和藥理學活性方面的研宄難度，阻礙了對該物質的進一步研宄和應用。
[0004]
【發明內容】
[0005]解決的技術問題:針對現有的天然產物新地錢素A獲取量少，阻礙了對該物質的進一步研宄和應用方面存在的不足，本發明提供一種新地錢素A的人工合成方法，該方法能夠持續、大量地合成新地錢素A，為后續實現該藥物的規模化生產提供良好的技術支持。
[0006]技術方案:本發明提供一種新的制備新地錢素A的方法，該方法以4-羥基-3-甲氧基苯甲醛、對溴苯甲酸甲酯為起始原料，通過化學反應最終制備得到新地錢素A，具體包括以下步驟:
(1)化合物I的合成:
1)將3.9mL N, N-二甲基甲酰胺和4.7mL硫酸二甲酯的混合溶液在50_60°C加熱3_5h，形成DMF-DMS加合物；
2)將5g4-羥基-3-甲氧基苯甲醛用30mL 二氯甲烷溶解，然后加入7.2mL的丙二醇，再加入上述制備得到的DMF-DMS加合物，20-30°C反應20_26h，反應結束后，將體系置于冰浴下，向反應體系中加入6-8mL三乙胺，用20-25mL乙醚萃取三次，合并有機層，用含有5%亞硫酸氫鈉和飽和乙酸鈉的溶液洗滌三次，再用飽和氯化鈉和飽和乙酸鈉等比例混合液洗三次，所得有機相用無水硫酸鈉干燥，旋蒸，重結晶得到棕色晶體，即為化合物I ;
(2)化合物2的合成:
將化合物I和間溴苯甲醛用吡啶攪拌溶解后，再依次加入碳酸鈣粉末、碳酸鉀粉末，氧化銅粉末，加熱至沸騰后回流，TLC檢測至反應完全，減壓蒸餾除去溶劑，然后加二氯甲烷浸取，過濾，濃縮濾液，經柱層析分離，得粗產品，最后乙醇重結晶得白色粉末，即為化合物2，其中化合物I與間溴苯甲醛物質的量之比為1: (0.95-1.05)，優選為1:1.05，碳酸鈣與碳酸鉀物質的量之比為1: (1-5)，回流時間為15-20h，優選18h ；
(3)化合物3的合成:
將3.72g對溴苯甲酸甲酯、2.5g異香蘭素溶于10mL吡啶中，用機械攪拌器攪拌后，再依次加入3.58g碳酸鉀粉末、0.68g碳酸鈣粉末、0.65g氧化銅粉末，加熱回流15_20h，TLC檢測至反應完全，減壓蒸餾除去溶劑吡啶，然后加30ml 二氯甲烷浸取，過濾，濃縮濾液，經柱層析得到粗產品，最后乙醇重結晶得淡黃色固體，即為化合物3 ;
(4)化合物4的合成:
將3.14g化合物3溶于60mL無水乙醇中，在0-5°C下加入0.17g硼氫化鈉粉末，攪拌10-20min，然后室溫下攪拌反應約3h，TLC檢測至反應完全，加水至無氣泡產生為止，攪拌30min，旋蒸濃縮，用二氯甲烷萃取，再用飽和乙酸鈉和飽和氯化鈉的等比例混合溶液洗三次，有機相用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得白色固體，即為化合物4 ;
(5)化合物5的合成:
將2.53g化合物4、3.16 g三苯基膦氫溴酸鹽依次投入到100 mL圓底燒瓶中，加入50mL乙腈溶解，磁子攪拌，加熱至沸騰回流2h，停止加熱，降至室溫，減壓濃縮，經柱層析分離，得白色固體，即為化合物5 ；
(6)化合物6的合成:
將3.6g化合物3、1.7446g化合物5溶于50ml 二氯甲烷中，然后加入1.54g碳酸鉀，用18-冠-6催化，加熱至沸騰回流20-24h，濾液濃縮，剩余物經柱層析分離得到油狀固體，即為化合物6;
(7)化合物7的合成:
將2.0448g化合物6溶解于40mL乙酸乙酯中，加入0.2Ig Pd/C和4.5mL三乙胺，通入氫氣，常溫攪拌20-24h，TLC檢測至反應完全，過濾，減壓濃縮，剩余物經柱層析分離，得淡黃色油狀物即為化合物7 ;
(8)化合物8的合成:
依次將1.7834g化合物7、0.18g四氫鋰鋁加入到25mL無水四氫呋喃中，在0_5°C下攪拌l_2h，反應結束后，慢慢滴加水10ml，減壓濃縮，用30ml 二氯甲烷萃取，有機相再用飽和氯化鈉溶液洗三次，再用無水硫酸鈉干燥，蒸干溶劑得無色油狀物，即為化合物8 ;
(9)化合物9的合成:
將1.3804g化合物8溶于60mL乙醇中，然后加2.5ml濃鹽酸和25mL的水，室溫攪拌14h，反應完畢后，滴加6ml飽和碳酸氫鈉溶液至無氣泡，減壓濃縮，加乙酸乙酯溶解，用碳酸氫鈉和氯化鈉飽和混合溶液洗三次，合并有機相，用無水硫酸鈉干澡，減壓濃縮，經柱層析分離，得無色油狀物，即為化合物9 ;
(10)化合物10的合成:
將0.986g化合物9、0.74g三苯基膦氫溴酸鹽投入到30mL乙腈中，攪拌加熱至沸騰回流2h，TLC檢測至反應完全，降至室溫，減壓濃縮，經柱層析分離，得白色固體，即為化合物10 ；
(11)化合物11的合成:
將0.86g甲醇鈉加入到200mL 二氯甲烷中，將1.58g化合物10用300 mL二氯甲烷溶解后緩滴加至上述的甲醇鈉的二氯甲烷溶液中，反應12 h，TLC檢測至反應完全，減壓濃縮，經柱層析分離，得白色粉末，即為化合物11;
(12)化合物12的合成:
將0.768g化合物11溶解于20mL乙酸乙酯中，加入0.07g Pd/C，通入氫氣，室溫攪拌24h，TLC檢測至反應完畢后過濾，濾液減壓濃縮，剩余物經柱層析分離得白色粉末，即為化合物12 ；
(13)化合物13的合成:
將0.7430g化合物12溶解到30mL 二氯甲烷中，然后在-40°C下滴入1.5mL三溴化硼的20ml 二氯甲烷溶液，在-10°C時反應12h，TLC檢測至反應完畢，在0_5°C下滴加水1ml水，用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，蒸干得白色粉末，即為化合物13，所述化合物13即為新地錢素A。
[0007]所述步驟(2)中的TLC檢測至反應完全的具體步驟為:用電吹風機將反應體系的溶劑蒸發，再用二氯甲烷溶解，用化合物1、間溴苯甲醛的二氯甲烷溶液點板，用二氯甲烷作流動相進行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應體系中的無化合物I的斑點，即反應完全。
[0008]所述步驟(3)中的TLC檢測至反應完全的具體步驟為:用電吹風機將反應體系的溶劑蒸發，再用二氯甲烷溶解，用對溴苯甲酸甲酯、異香蘭素的二氯甲烷溶液點板，用二氯甲烷作流動相進行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應體系中的無異香蘭素斑點，即反應完全。
[0009]所述步驟(4)中的TLC檢測至反應完全的具體步驟為:用化合物3的二氯甲烷溶液以及反應體系點板，用二氯甲烷作流動相進行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應體系中的無化合物3的斑點，即反應完全。
[0010]所述步驟(7)中的TLC檢測至反應完全的具體步驟為:用化合物6的乙酸乙酯溶液以及反應體系點板，用乙酸乙酯和二氯甲烷混合液作流動相進行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應體系中的無化合物6的斑點，即反應完全；其中乙酸乙酯與二氯甲烷體積比為 1: (0.5-2)，優選 1:1。
[0011]所述步驟(10)中的TLC檢測至反應完全的具體步驟為:用化合物9的二氯甲烷溶液以及反應體系點板，用乙酸乙酯作流動相進行色譜分離，至在紫外線作用下觀察反應體系中的無化合物9的斑點，即反應完全。
[0012]所述步驟(11)中的TLC檢測至反應完全的具體步驟為:用化合物10的二氯甲烷溶液以及反應體系