Vegfr3抑制劑的制作方法
【專利說明】VEGFR3抑制劑
[0001] 本發明涉及抑制血管內皮生長因子受體3 (VEGFR3)(又稱為Fms相關酪氨酸激酶 4 (FLT4))的2，4, 5-取代嘧啶、其制備方法或含有所述化合物的藥劑或組合物。本發明還涉 及一種使用所述化合物來治療增殖性疾病（如癌癥）以及治療通過控制和/或抑制淋巴管 發生來改善的疾病的方法。
[0002] 背景
[0003] 在21世紀，癌癥仍然是死亡的主要原因。因此，目前將相當大的藥物研宄和開發 努力放在發現可為癌癥患者提供壽命延長或治愈選擇的治療劑上。
[0004] 雖然存在許多不同種類的癌癥，每種癌癥表現出不同組的遺傳和生長特性，但許 多實體癌類型的共同點是能夠轉移。腫瘤局限于身體的一個區域并且可通過手術介入和/ 或放射療法來控制，直到發生轉移。然而，轉移導致癌細胞擴散至身體的不同部分并且雖然 手術介入可去除原發性腫瘤病變，但所有轉移性病變的去除極難控制。
[0005] 腫瘤轉移為多階段過程，其涉及分解細胞外基質、浸潤局部組織實質、內滲到局部 血管（regionalbloodvessel)和淋巴管中、在循環中存活并且最后在次生組織部位中外 滲、存活和生長（Front.Biosci.(Elite編著）。2012 ;4 :1888-1897)。
[0006] 可通過血管或淋巴管發生轉移。在若干方面，淋巴管不同于血管。大集合淋巴管 在其壁中含有血管平滑肌細胞以及瓣膜，所述瓣膜防止淋巴液回流。然而，不像典型的毛 細血管，毛細淋巴管缺乏周皮細胞和連續基膜并且含有大的內皮間瓣膜樣開口（J.Theor. Med. 2003 ;5 :59-66)。由于其更大的滲透性，毛細淋巴管比毛細血管在允許腫瘤細胞穿 過上更有效。實驗證據表明正在生長的腫瘤病變內的淋巴管發生（新淋巴管的形成）促 進通過淋巴管的轉移。淋巴管發生的控制為預防淋巴結轉移呈現具有吸引力的治療策略 (J.Clin.One. 2007 ;25 :4298-4307)。
[0007] 淋巴系統由毛細管和由內皮細胞連續排列的較大的集合管構成，其使外滲的流體 和大分子從胞間隙返回至血液循環。通過淋巴管轉移至區域淋巴結是許多癌癥類型共同的 腫瘤進展過程。淋巴結累及程度為許多類型癌癥分期的主要決定因素并且為用作受影響的 淋巴結的手術介入和放射治療介入的基礎的重要預后因素。
[0008] 通過生長因子VEGFC或VEGFD結合至其膜受體VEGFR3的分子信號傳導已顯示在 淋巴管發生過程中起到核心作用（Brit.J.Cancer2006 ;94 :1355-1360)。VEGFR3受體的 刺激通過磷酸化其細胞內區域發生并且觸發驅動淋巴內皮細胞增殖、迀移和分化從而導致 淋巴管形成的下游信號傳導級聯（Exp.CellRes. 2006 ;312 :575-583)。VEGFC或VEGFD的 表達增加已顯示促進腫瘤相關的淋巴管發生，從而使淋巴介導的向區域淋巴結的轉移成為 可能。已針對若干不同腫瘤類型報道了這些觀察，包括結腸直腸癌（Oncol.Rep. 2009 ;22: 1093-1100)、肺癌（Ann.Oncol. 2010;21:223-231)、胃癌（Surgery2009;146:896-905)、 腎癌（Oncol.R印? 2008 ;20 :721-725)、前列腺癌（Clin.CancerRes. 2004 ; 10 :5137-5144) 以及卵巢癌（Cancer2004;101:1364-1374)。在嚙齒動物中的若干腫瘤實驗模型中，阻斷 VEGFC、VEGFD/VEGFR3介導的信號傳導已顯示抑制淋巴管發生并且遏制淋巴結轉移（Ann. N.Y.Acad.Sci. 2008 ；113 ： ,225-234 ；Int.J.Cancer2009 ；125 :2747-2756)〇
[0009]VEGFR3為在胚胎發生過程中廣泛表達于內皮細胞中的跨膜酪氨酸激酶受體 (Biochem.J. 2011 ;437 :169-183)。在發育后期，VEGFR3表達變得局限于發育淋巴管。在 成人中，VEGFR3表達主要局限于淋巴內皮和⑶34+造血細胞的子集。另外，某些內分泌器 官中的有孔毛細血管和靜脈以及單核細胞、巨噬細胞和一些樹突細胞（DC)在成人中繼續 表達VEGFR3。小鼠胚胎中VEGFR3基因的破壞導致血管網絡形成失敗并且在胚胎第9. 5天 之后死亡（Biochem.J. 2011 ;437 :169-183)。這項觀察表明VEGFR3在胚胎脈管系統的發育 中起到關鍵作用。在癌癥中，VEGFR3在轉移性淋巴結和淋巴管瘤中的淋巴竇中過表達。此 外，在許多情況下，癌細胞自身表達VEGFR3。表達VEGFR3的癌細胞已顯示出其增殖依賴于 VEGFR3/VEGFC信號傳導（Eur.J.Canc. 2011 ;47 :2353-2363)。
[0010] 基于上文，顯而易見，VEGFR3信號傳導的抑制具有作為用于哺乳動物受試者的治 療策略的強烈可能，所述哺乳動物受試者已被診斷患有特征在于表達這個受體的內皮細胞 的增殖的疾病。在癌癥的情況下，靶向VEGFR3可能通過遏制淋巴轉移和遏制表達VEGFR3 的癌細胞的生長而產生治療益處。
[0011] 有趣的是，并且從VEGFR3軸線內的靶選擇觀點來看可能重要的是，在其中VEGFC 和VEGFD基因純合缺失的小鼠中，血液脈管系統正常發育，不像VEGFR3純合敲除小鼠的 胚胎心血管表型：即，這兩個配體的缺失與受體的缺失不相同（Mol.Cell.Biol. 2008 ;28 : 4843-4850)。這些數據提高了以下可能性：存在VEGFR3的另一個配體或VEGFR3可能夠通 過不依賴于其配體VEGFC和VEGFD的尚且未知的方式起作用。上文表明與單獨靶向VEGFC 或VEGFD相比，靶向VEGFR3對阻斷VEGFC/D-VEGFR3信號傳導更有利。
[0012] 雖然存在許多涉及具有各種水平的VEGFR3活性和選擇性的酪氨酸激酶抑制劑 的已報道的研宄（Nat.Rev.DrugDiscov. 2006 ;5 :835-844 ;Mol.CancerTher. 2007 ;6 : 2012-2021;CancerRes. 2009 ;69 :8009-8016 ;Mol.CancerTher. 2012 ;11 :1637-1649)，但 這些研宄在其它酪氨酸激酶上具有一些至少部分由抑制導致的限制。
[0013] 盡管如此，總體來說這些研宄加強了以下結論：VEGFR3的抑制可遏制或減少淋巴 管發生和/或淋巴引起的轉移。
[0014] 因此，選擇性抑制VEGFR3的化合物將有用于治療增殖性疾病，如癌癥。
[0015] 如上所述，VEGFR3在淋巴管發生的控制上起到重要作用。因此，VEGFR3的抑制劑 可用于治療其中淋巴管發生的控制/抑制具有治療益處的除癌癥以外的疾病。淋巴系統在 慢性炎癥性疾病和移植排斥中起主要作用。通過遏制VEGFR3功能來抑制淋巴管發生可在 這些病狀中提供可行的治療策略。
[0016]例如，臨床前研宄已表明，VEGFR3在角膜和眼部表面中的表達在角膜新血管形成 過程中調節并且VEGFR3介導角膜樹突細胞至淋巴結的迀移和對角膜移植的免疫性的誘 導。其中在發炎和高度血管化的宿主床上進行移植的高危角膜移植具有非常低的成功率， 其中排斥率高達90% (J.LeukocBiol. 2003 ;74 :172-178)。在臨床前模型中，用VEGFR3抗 體治療導致角膜移植排斥的顯著遏制（Nat.Med. 2004 ; 10 :813-815)。
[0017] 在眼睛的脈絡膜層中產生新血管的脈絡膜新血管形成（CNV)導致慢性炎癥， 所述慢性炎癥涉及年齡相關黃斑變性（AMD)的發病機理并且由包括血管內皮生長因 子（VEGF)家族成員VEGFA和VEGFC的非控制表達的因素驅動（J.Cell.Physiol. 2012; 227(1) :116-26)。已開發了靶向VEGFA的用于AMD的治療劑，例如抗VEGFA抗體蘭尼單抗 (ranibizumab)和貝伐單抗（bevacizumab)以及抗VEGF適體哌加他尼，但迄今為止還沒有 治療劑被臨床評價為通過調節VEGFC及其同源受體VEGFR3來介導作用。
[0018] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于預防和/或治療眼睛疾病，例如角膜移植排 斥和年齡相關黃斑變性。
[0019] 此外，有越來越多的證據表明淋巴管對皮膚的慢性炎癥具有積極作用。淋巴內皮 細胞增殖和淋巴增生已在小鼠的慢性皮膚炎癥中有所描述并且已針對牛皮癬患者的皮膚 病變有所報道（Blood2004 ; 104 :1048-1057)。
[0020] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于預防和/或治療皮膚炎癥，如患有牛皮癬的 患者的皮膚病變。
[0021] 還發現淋巴管發生與腎移植排斥相關。產生VEGFC的巨噬細胞誘導新淋巴管的 形成，所述新淋巴管形成誘導和支持在腎移植物中維持同種異體免疫應答（Nat.Med. 2006; 12 :230-234)〇
[0022] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于預防和/或治療腎移植中的排斥。
[0023] 共同未決申請PCT/GB2012/000175公開了抑制FAK和VEGFR3的化合物。
[0024] 概述
[0025] 本發明人發現了有效作為VEGFR3抑制劑的特定種類的化合物。這些化合物可對 VEGFR3表現出比對如FAK和/或VEGFR2的激酶更高的選擇性。
[0026] 在第一方面，本發明提供以下式（I)的化合物或其異構體、鹽、溶劑合物或前藥：
[0027]
【主權項】
1. 一種式（I)化合物或其異構體、鹽、溶劑合物或前藥： 其中：
A為通過芳環碳原子連接至所述NH基團的任選取代的5-10元雜芳基，其中所述雜芳基 環系統含有1至4個選自N、O和S的雜原子，并且； A可帶有不在所述NH基團的α位的取代基Ria并且可任選地進一步帶有不在所述NH 基團的α位的一個、