一種非接觸式顯微測量輔助裝置及其測量方法
【技術領域】
[0001]本發明屬于微生物顯微領域，尤其涉及一種非接觸式顯微測量輔助裝置及其測量方法。
【背景技術】
[0002]在動物學、植物學、細胞學和微生物學實驗和研宄中，經常測定細胞、微生物孢子、菌絲的大小，其中包括其寬度和長度，特別是進行真核生物研宄時，要求測定30個或者更多細胞或者孢子的平均寬度和長度。這就給使用繪圖顯微鏡或者利用顯微電腦操作系統的人帶來測量數據的麻煩。
[0003]目前，測定孢子或者細胞大小的方法主要有以下幾種:1、利用繪圖顯微鏡，手動繪出孢子的草圖，然后再計算一定數量的孢子的大小平均數；2、利用電腦和數碼成像系統系統，將顯微鏡視野中的圖像傳輸到電腦中，并通過處理軟件顯示出來，然后再去操作和計算孢子的大小；3、利用目鏡測微尺對孢子進行測定；4、用數碼相機拍出孢子圖片后再測量細胞或者孢子的大小。
[0004]以上測定孢子的方法，存在的缺點是:1、繪圖測量法太麻煩，操作時要不停前后和左右移動顯微鏡載物臺，而且玻片種細胞等位置形態各異，有時造成從任何角度都不能很好測量細胞大小的情況；2、利用顯微成像系統專業軟件處理和計算孢子大小，也存在鼠標頻繁移動、定位不準和無法處理特殊細胞大小的問題，費時、費力，而且配合顯微鏡的操作；
3、目鏡測微尺測定細胞大小時，需要前后、左右頻繁移動載物臺，而且測定角度不正的細胞時，要移動載物臺數次，才能定位準確，非常麻煩；4、用數碼相機拍出孢子圖片后再測量的方法，存在一次性要選取大量孢子的麻煩，再者還要把相關圖像打印或者洗出來，費時費力。
[0005]從手動繪圖或測定的角度來看，目前的測定方式要么利用手動，要么利用電腦測繪，手動方法自動性差，耗時長，容易出錯，記錄不準確，但是存在可選擇性，靈活性等優點，利用輔助測繪裝置的話，一般又不夠靈活，方式較死板，電腦測繪的話，自動性強，但是在識別和計算所需數據時，人工識別往往又不可替代，尤其是所測定樣本本身有多種雜質或是有選擇地測定特殊細菌或孢子的時候。
【發明內容】
[0006]本發明屬于多功能繪圖顯微鏡的配套儀器，利用手動繪制或者測量細胞或者孢子時，可以克服目前細胞或者孢子大小測定的缺點和麻煩，快速、有效和準確的解決該問題，具體優點如下:1、該產品屬于外置式和手持式，使用方便，移動靈活，不需要像目鏡測量尺一樣反復移動；2、可測量任意角度的細胞大小，測定培養樣本中的何種細菌或孢子可以方便選擇；3、不需要校正和換算，可以直接讀出近似讀數；4、廉價、簡易；5、配置專用記錄板，可實現數據及時記錄，可換紙利用，也可利用可擦寫紙，用后一擦即凈；7、使用可根據視野光線情況，靈活選用各種外源燈光等。
[0007]本發明要求保護一種非接觸式細菌或孢子顯微測量輔助裝置，其特征在于，組成如下:
由透明測定盤和套板，計數紙配件三部分組成；
透明測定盤由透明材料制成，其為圓形板狀，具有一定厚度，從圓心向外繪有若干條半徑線，該若干條半徑線均與接觸圓周處的法線垂直，該若干條半徑線上有垂直于該半徑線自身的均勻刻度線，每條半徑線上的均勻刻度線所對應的單位刻度均不同，每隔一定數量刻度線設置一個數值用于示意性讀數，在每個半徑線靠近圓心處都注以標示，以標明該半徑線上的單位刻度為何種大小，這里的標示可以是特定的形狀的符號，也可以是特定顏色的符號；
所述單位刻度可以為 lmm、0.5mm、0.2mm、0.1mm、0.05mm、0.02mm、0.01mm.0.005mm 尺寸，可以每2、5、10、20個單位刻度給出示意性讀數，標明該半徑線上的單位刻度為何種大小的標示可以為文字，厘米/毫米/十分之一毫米/百分之一毫米/微米，也可以為，英文簡稱，，cm/mm/1/lOmm/l/OOmm/um也可以為自行約定的符號，如α、β、γ等；
套板為長方形，在其長度方向相對的兩側，一側有用于放置透明測定盤的圓形槽，另一側有放置計數紙配件的計數紙槽，計數紙槽為正方形，圓形槽的厚度與透明測定盤相當；計數紙槽的厚度也可以較圓形槽為淺；
計數紙配件包括設在計數紙槽上下兩端的上卡槽和下卡槽，以及由上卡槽和下卡槽共同夾持的計數紙若干張，上卡槽、下卡槽、計數紙高度均低于計數紙槽的深度；
透明測定盤和套板的表面光滑或是有一定摩擦性，透明測定盤和套板表面均平整，透明測定盤和套板上的用于放置透明測定盤的圓形槽大小相適應，透明測定盤剛好可以卡入轉動并且不明顯松動；
所夾持的計數紙可以為長方形或正方形，計數紙上印有計數格，計數紙可以適于普通筆書寫或者適于熒光筆書寫；
前述的一種測量輔助裝置，利用其進行的非接觸式細菌或孢子顯微測量方法，其特征在于；
1)根據需要制備適合的裝置:
按用于測量的培養皿或培養平板的情況，選擇適合的透明測定盤的大小，并由此決定相配的套板和計數紙配件的尺寸:透明測定盤的尺寸可以比圓形槽尺寸小0.1mm-1mm距離不等。
[0008]三步滅菌:用環氧乙烷將透明測定盤、套板和計數紙槽中的上卡槽和下卡槽用環氧乙烷滅菌處理，并除去殘留；再用高溫蒸汽進行二次滅菌，干燥，然后將透明測定盤、套板和計數紙槽中的上卡槽和下卡槽和測定用的計數紙一起用紫外燈照射2-10min滅菌；
將透明測定盤卡入圓形槽、將所需數量的計數紙卡入上卡槽和下卡槽固定；即制得所需測量輔助裝置；圓形槽邊緣可以設有復數個沿圓形槽邊緣均勻分布的卡扣以固定透明測定盤;
2)利用顯微鏡針對培養皿或者培養平板上的細菌或孢子進行顯微測定，先選擇合適的培養皿或者培養平板，然后根據使用的培養皿或者培養平板的規格或尺寸，選擇或制備尺寸相符的測量輔助裝置；
3)根據培養皿或者培養平板上細菌或孢子處于靠上或靠下的位置，將測量輔助裝置放置在培養皿或者培養平板之上或之下，以便于測量；
根據放置在培養皿或者培養平板之上或之下的不同，圓形槽可以向上面開或者向下面開，透明測定盤可以是從上向下放置或者從下向上放置；
4)開啟顯微鏡，將培養皿或者培養平板與疊合的測量輔助裝置一并放置于載物臺上，調節顯微鏡，在視野中觀察尋找欲測量尺寸的種類的細菌或孢子；
這里的細菌或者孢子，可以是某一類或者某幾類，或者是某一類中尺寸在要求范圍內的，如革蘭氏陽性菌，或孢子尺寸在1um-1um之間的；
5)可借助外界光源輔助，調節顯微鏡視野內的光線強弱，針對視野中找到的欲測量尺寸的種類的細菌或孢子，調節顯微鏡，使得其清晰可辨，在此前提下，轉動透明測定盤，將符合顯微鏡放大倍數觀測需要的單位刻度的半徑線轉動到欲測量尺寸的種類的細菌或孢子附近，并依據該單位刻度及其上的標示將欲測量尺寸的種類的細菌或孢子的尺寸大致讀出，用筆記載在計數紙上；
6)在套板的圓形槽底部設置網格，網格線是水平垂直交叉的，或者是以圓形槽圓心處放射線與以該圓心為圓心的半徑不同的圓形線，網格線有反光特性，網格給予編號，在步驟4中欲測量尺寸的種類的細菌或孢子清晰可辨的前提下，確認其處于的網格編號，在登記其尺寸時一并登記；
在此，如果是以圓形線和半徑線切割成的區域，則可以以字母+數字來命名，例如最小圓與圓心之間切割成的扇形，最內圈區域以A1-A9編號，外一層用B1-B9編號，再外一層用C1-C9編號，依次類推，數字依半徑線