用于溶解含有阿拉伯木聚糖的物質的木聚糖酶的制作方法
【專利說明】用于溶解含有阿拉伯木聚糖的物質的木聚糖酶 發明領域
[0001] 本發明涉及具有不常見性質的木聚糖酶的應用，所述應用包括飼料、釀造或麥芽 制造、處理含有阿拉伯木聚糖的原材料如基于谷物（grain)的物質，例如用于生產生物燃 料或其他發酵產物，包括生物化學品（例如生物基異戊二烯），和/或用于小麥面筋-淀粉 分離工業中；和使用這些木聚糖酶的方法，以及包含所述木聚糖酶的組合物（如飼料添加 劑組合物）。本發明還涉及具有不常見性質的新木聚糖酶，所述不常見性質使得其可以用于 這樣的應用，包括飼料、釀造或麥芽制造、處理含有阿拉伯木聚糖的原材料如基于谷物的物 質，例如用于生產生物燃料或其他發酵產物，包括生物化學品（例如生物基異戊二烯），和/ 或用于小麥面筋-淀粉分離工業中。
[0002] 發明背景
[0003] 許多年以來，內切-0-1，4-木聚糖酶（EC 3. 2. 1.8)(在本文中稱為木聚糖酶）已 經用于改性來源于植物細胞壁材料的復雜糖。本領域所熟知的是，不同木聚糖酶（來源于 不同的微生物或植物）的功能十分不同。木聚糖酶是對一類將線性多糖0-1，4-木聚糖降 解為木寡糖或木糖從而分解半纖維素（植物細胞壁的主要成分之一）的酶的命名。
[0004] 基于結構和遺傳信息，已經將木聚糖酶分類至不同的糖苷水解酶（GH)家族 (Henrissat，（1991)Biochem. J. 280, 309-316)〇
[0005] 最初所有已知并表征的木聚糖酶屬于GH10或GH11家族。之后，進一步的工作鑒 定了屬于GH5，GH7、GH8和GH43家族的許多其他類型的木聚糖酶（Collins等（2005)FEMS Microbiol Rev. , 29(1), 3-23)〇
[0006] 迄今為止，GH11家族不同于所有其他GH，其是唯一一個僅由木聚糖特異性木聚糖 酶組成的家族。可以將GH11木聚糖酶的結構描述成0-Jelly卷結構或全鏈夾層折疊 結構（Himmel 等 1997Appl. Biochem. Biotechnol. 63-65, 315-325)。GH11 酶具有大約 20kDa 的催化結構域。
[0007] GH10木聚糖酶具有分子量在32-39kDa范圍內的催化結構域。GH10木聚糖酶 的催化結構域的結構由八倍0 / a桶組成（Harris等1996-Acta. Crystal log. Sec. D 52, 393-401)〇
[0008] 可以獲得大量GH10家族酶的三維結構，第一個解析的是變鉛青鏈霉菌 (Streptomyces lividans)木聚糖酶 A(Derewenda 等 J Biol Chem 1994Aug 19; 269(33)20811-4)、纖維單胞菌（C. fimi)end〇-glycanase Cex(White 等 Biochemistry 19940ct 25 ;33(42) 12546-52)和日本纖維弧菌（Cellvibrio japonicus)XynlOA(先前的 螢光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens)木聚糖酶亞種 A) (Harris 等 Structure 994Nov 15 ;2(11)1107-16.)。作為Clan GHA的成員，它們具有典型的（a/f3)8HM桶折疊，其具有 位于13 _鏈4(酸/堿）和7(親核基團）的C末端上的兩個關鍵活性位點谷氨酸（Henrissat 等 Proc Natl Acad Sci U S A 1995Jul 18 ;92(15)7090-4)。
[0009] 已經在充分表征的純底物上完成了表征木聚糖酶功能的廣泛研宄（Kormelink 等，1992Characterisation and mode of action of xylanases and some accessory enzymes. Ph. D. Thesis, Agricultural University ffageningen, Holland(第 175 頁，English and Dutch summaries))。這些研宄顯示，不同的木聚糖酶在阿拉伯木聚糖 (AX)的木糖主鏈的取代方面具有不同的特殊要求。一些木聚糖酶需要三個未取代的木糖殘 基，以水解木糖主鏈；其他僅需要一個或兩個。認為特異性上的這些差異的原因是由于催化 結構域內的三維結構，其繼而依賴于木聚糖酶的一級結構，即氨基酸序列。然而，當木聚糖 酶作用于復雜環境，如植物物質，例如飼料中時，將氨基酸序列中的這些差異翻譯成木聚糖 酶功能的差異迄今為止還沒有被文獻報道。
[0010] 傳統上，將植物物質，例如小麥中的木聚糖酶底物分為兩部分：水不可提取的 AX(WU-AX)和水可提取的AX(WE-AX)。對于為什么存在兩個不同的AX部分已經有了很 多解釋。較早的文獻（D'Appolonia 和 MacArthur_(1976, Cereal Chem. 53. 711-718)和 Montgomery 和 Smith (1955, J. Am. Chem. Soc. 77. 3325-332)描述了 WE-AX 與 WU-AX 之間在取 代程度上非常高的差異。最高的取代程度發現于WE-AX。這用于解釋為什么一些AX是可以 提取的。高的取代程度使得聚合物可溶，相對地較低的取代程度會引起聚合物之間的氫鍵 合以及由此沉淀。
[0011] 據認為，不同木聚糖酶的功能差異是由于木聚糖酶特異性的差異，由此其對WU-AX 或WE-AX底物的偏好性的差異。
[0012] 已經從近100種不同生物，包括植物、真菌和細菌中報道了木聚糖酶。這些木聚糖 酶被分類到40個以上糖基水解酶家族的幾個中。糖基水解酶，包括木聚糖酶、甘露聚糖酶、 淀粉酶、0 _葡聚糖酶、纖維素酶和其他糖酶，基于諸如氨基酸序列、其三維結構及其催化位 點的幾何學等性質來分類（Gilkes,等，1991，Microbiol. Reviews 55:303-315)。
[0013] 附圖簡述
[0014] 圖1顯示了本發明的木聚糖酶（FveXyn4)的多肽序列（SEQ ID No. 1)。這是前蛋 白原。序列劃線（小寫）部分反映了可以在酶成熟之前被剪切的N末端信號肽。黑體和斜 體顯示的氨基酸也可以在酶完全成熟之前通過翻譯后修飾而被剪切。
[0015] 圖2顯示了本發明的木聚糖酶（FveXyn4)的多肽序列（SEQ IDNo.2)。這是蛋白 原。黑體和斜體顯示的氨基酸也可以在酶完全成熟之前通過翻譯后修飾而被剪切。
[0016] 圖3顯示了本發明的木聚糖酶（FveXyn4)的多肽序列（SEQ IDNo. 3)。這是酶的 活性形式。這在本文中可以稱為酶的成熟形式。
[0017] 圖4顯示了編碼本發明的木聚糖酶（FveXyn4)的核苷酸序列（SEQ IDNo.4)。粗 體小寫核苷酸顯示了內含子序列。信號序列以粗體顯示（大寫）。
[0018] 圖5顯示了編碼本發明的木聚糖酶（FveXyn4)的核苷酸序列（SEQ ID No. 5)。信 號序列以粗體顯示（大寫）。
[0019] 圖6顯示了編碼本發明的木聚糖酶（FveXyn4)的核苷酸序列（SEQ ID No. 6)。 [0020] 圖7顯示了用于通過自動化間苯三酚法測定戊聚糖的自動化分析儀的示 意圖：(a)混有HC1的醋酸；(b)氣泡生成器（air bubbling) ; (c)乙醇中的間苯三 酚；（d)樣品；（e)樣品加速器；（f)流動室出口；（g)蠕動泵；(h)玻璃線圈；（i)恒溫 器（96 °C );(j)多波長分光光度計（410、510、550和620nm);(k)廢料；（1)計算機 (Rouau&Surget，l"4Ca;rbohydrate Polymers, 24, I23-32) 〇
[0021] 圖8顯示了戊聚糖（C-5糖）從小麥麩的釋放（戊聚糖的溶解），作為木聚糖酶劑 量的函數。所使用的木聚糖酶是與參照木聚糖酶（即Econase?XT)進行比較的本發明 木聚糖酶（FveXyn4)。
[0022] 圖9顯示了戊聚糖自cDDGS的溶解，作為木聚糖酶劑量的函數。所使用的木聚糖 酶是與參照木聚糖酶（即Econase?XT)進行比較的本發明的木聚糖酶（FveXyn4)。
[0023] 圖10顯示了 pZZH254的質粒圖譜。
[0024] 圖11顯示了 FveXyn4的pH活性譜。
[0025] 圖12顯示了 FveXyn4的溫度譜。
[0026] 圖13顯示了在體外動物模型（其中pH維持在6. 0)中通過FveXyn4對高粘度小 麥的粘度減小。
[0027] 圖14顯示了對于本發明木聚糖酶FveXyn4和參照酶Xylathin?，起始于pH5. 2,全 小麥粉中的RVA粘度譜。
[0028] 圖15顯示了本發明的木聚糖酶（FoxXyn2)的多肽序列（SEQIDNo. 9)。這是前蛋 白原。序列劃線（小寫）部分反映了可以在酶成熟之前被剪切的N末端信號肽。黑體和斜 體顯示的氨基酸也可以在酶完全成熟之前通過翻譯后修飾而被剪切。
[0029] 圖16顯示了本發明的木聚糖酶（FoxXyn2)的多肽序列（SEQIDNo. 10)。這是蛋 白原。黑體和斜體顯示的氨基酸也可以在酶完全成熟之前通過翻譯后修飾而被剪切。該序 列可以是蛋白質的活性形式并且可以是蛋白質的一種活性形式。這在本文中可以稱為酶的 成熟形式。
[0030] 圖17顯示了本發明的木聚糖酶（FoxXyn2)的多肽序列（SEQ ID No. 11)。這是酶 的另一種活性形式。在一些實施方案中，這在本文中可以稱為酶的成熟形式。
[0031] 圖18顯示了對于本發明木聚糖酶FoxXyn2和參照酶Xylathin?，在pH5. 2開始時， 全小麥粉中的RVA粘度譜。
[0032] 圖19顯示了編碼本發明的木聚糖酶（FoxXyn2)的核苷酸序列（SEQIDNo. 12)。 黑體的小寫核苷酸顯示內含子序列。以黑體顯示信號序列（大寫）。
[0033] 圖20顯示了編碼本發明的木聚糖酶（FoxXyn2)的核苷酸序列（SEQIDNo. 13)。 以黑體顯示信號序列（大寫）。
[0034] 圖21顯示了編碼本發明的木聚糖酶（FoxXyn2)的核苷酸序列（SEQIDNo. 14)。
[0035] 圖22顯示了 pZZH135的質粒圖譜。
[0036]圖 23 顯示了 FoxXyn2 的 pH 譜。
[0037] 圖24顯示了 FoxXyn2的溫度譜。
[0038] 圖25顯示了本發明的木聚糖酶（來自鐮孢菌屬（Fusarium)-Fusarium Comparative Sequencing Project, Broad Institute of Harvard and MIT(http://www. broadinstitute. org/))的多肽序列（SEQ ID No. 15)。在一些實施方案中，這在本文中可 以稱為酶的成熟形式。
[0039] 圖 26 顯示了 FveXyn4(SEQ ID No. 3)、FoxXyn2(SEQ ID No. 11)和本文示為 SEQ ID No. 15的木聚糖酶的成熟蛋白質的比對。
[0040] 圖27顯示了木聚糖酶和蛋白酶單獨和組合處理對戊聚糖和蛋白質自不溶性玉米 DDGS的溶解的影響。根據單因素方差分析（on-way AN0VA)和Holm-Sidak比較，字母a-d 具有顯著差異，整體顯著水平在P = 0.05。誤差線指示了 S.D。
[0041] 圖28顯示了木聚糖酶和蛋白酶單獨和組合處理對戊聚糖和蛋白質自不溶性小麥 DDGS的溶解的影響。根據單因素AN0VA和Holm-Sidak比較，字母a-d具有顯著差異，整體 顯著水平在P = 0. 05。誤差線指示了 S. D。
[0042] 圖29顯示了戊聚糖自cDDGS的溶解，作為木聚糖劑量的函數。所用的木聚糖酶是 本發明的木聚糖酶（FveXyn4和FoxXyn2)。
[0043] 圖30顯示了編碼來自鐮孢菌屬的用于本發明的木聚糖酶的核苷酸序列（SEQ ID No. 16)--獲自 Fusarium Comparative Sequencing Project, Broad Institute of Harvard and MIT(http://www. broadinstitute.org/)。黑體的小寫核苷酸顯不內含子序 列。以黑體顯示信號序列（大寫）。劃線標出與SEQ ID No. 4比較的變化。
[0044] 圖31顯示了編碼來自鐮孢菌屬的用于本發明的木聚糖酶的核苷酸序列（SEQ ID No. 17)--獲自 Fusarium Comparative Sequencing Project, Broad Institute of Harvard and MIT( http://www.broadinstitute.org/)。以黑體顯不信號序列（大寫）。劃 線標出與SEQ ID No. 5比較的變化。
[0045] 圖32顯示了編碼來自鐮孢菌屬的用于本發明的木聚糖酶的核苷酸序列（SEQ ID No. 18)--獲自 Fusarium Comparative Sequencing Project, Broad Institute of Harvard and MIT(http://www. broadinstitute.org)。劃線標出與 SEQ ID No. 6 比較的變 化。
[0046] 發明概述
[0047] 本發明開創性發現了從輪枝樣鐮刀菌（Fusarium verticilloides)分離的新木聚 糖酶，所述酶具有令人吃驚并且出乎預料的性質。尤其是，該酶在分解（溶解）不溶性阿拉 伯木聚糖（AXinsol)方面出乎預料的好。驚人的，已發現該酶可以自大范圍底物有效分解 (溶解）AXinsol，底物包括玉米、小麥、DDGS等，尤其是玉米和基于玉米的底物，特別是小麥 (包括基于小麥的）產品和玉米（包括基于玉米的產品）產品。其與已知的酶明顯不同，已 知的酶經常在溶解玉米或基于玉米的底物中的AXinsol方面表現較差，或在基于小麥和基 于玉米兩者的底物中無效。
[0048] 此外，本發明的酶不但特別善于分解（溶解）AXinsol，而且善于有效分解（或降 解）溶解的聚合物。通過能夠有效（快速）分解（降解）溶解的聚合物（從溶解AXinsol 獲得），獲得粘度的（快速）減小或使溶解的聚合物（從溶解AXinsol獲得）不能促進粘度 增加。后一種效果在一些要求保護的應用中至關重要。
[0049] 不期望被理論所限制，本發明的酶主要釋放聚合物，其不能促進粘度，因為所述釋 放的聚合物是短的。
[0050] 本發明人第一次分離并測序了這種新的木聚糖酶。
[0051] 典型地，常規的木聚糖酶可以分解AXinsol，但常常導致混合物粘度的增加。這種 增加的粘度在許多應用中是不利的。
[0052] 不期望被理論所限制，雖然一些常規的木聚糖酶分解AXinsol，但其導致高分子量 可溶性降解產物的增加，這導致混合物的粘度增加。
[0053] 進一步地或備選地，再次不期望被理論所限制，常規的木聚糖酶可以分解 AXinsol，但由于它們降解溶解的高分子量產物不夠快，混合物的粘度并不理想。相反地，與 常規酶相比，使用本發明的方法和用途，木聚糖酶分解AXinsol而不增加粘度和/或快速減 小粘度。不期望被理論所限制，據信通過本發明的酶不形成高分子量產物。
[0054] 已發現，本發明的且如本文所述的酶不僅分解（溶解）大范圍底物中的不溶性阿 拉伯木聚糖（AXinsol)，還有效地保證粘度不升高和/或降低粘度，所述底物包括玉米、小 麥、DDGS等，特別是玉米和基于玉米的底物，特別是小麥（包括基于小麥的）產品和玉米 (包括基于玉米的）產品。不期望被理論所限制，據信通過本發明的酶不形成高分子量產 物。
[0055]因此，本發明涉及能溶解戊聚糖，特別是溶解含有木聚糖的原料，例如阿拉伯木聚 糖，尤其是不溶性阿拉伯木聚糖的酶。特別的，該酶特別善于溶解廣譜底物中的戊聚糖，特 別是含有木聚糖的原料，如阿拉伯木聚糖，特別是不溶性阿拉伯木聚糖，所述底物包括基于 玉米的底物。
[0056] 本發明還涉及能夠降解AXsol或AXinsol的分解產物的酶，以保證反應混合物中 粘度不增加和/或減小。
[0057] 商品化用于飼料中溶解戊聚糖的許多木聚糖酶是GH11酶。本領域的技術人員一 直認為與GH11木聚糖酶相比，GH10木聚糖酶在溶解戊聚糖上并不強，特別是AXinsol。令 人吃驚地，已經發現，本文公開的新木聚糖酶（其為GH10木聚糖酶）特別善于降解廣譜底 物中的AXinsol，包括基于玉米的底物。令人吃驚地，本發明人已經發現，本發明的GH10木 聚糖酶比商品化的GH11木聚糖酶在其溶解戊聚糖的能力上表現優異。
[0058] 本發明酶有效地降解玉米和玉米基底物中的AXinsol的事實是顯著有利的，因為 玉米與其他谷類，例如小麥和黑麥相比具有多得多的不溶性形式的AX。因而，只有可以分解 AXinsol的木聚糖酶可以對以玉米基飼糧（diet)，例如玉米-大豆飼料喂養的動物顯示明 顯益處。
[0059] GH10木聚糖酶如此善于在谷類，特別是玉米或基于玉米的底物中降解AXinsol是 完全出乎預料的。
[0060] 本發明的酶能夠有效（并快速地）降解聚合物和寡聚物，所述聚合物和寡聚物從 降解AXinsol產生或其存在于基于谷物的物質中。這導致本文教導的GH10木聚糖酶出乎 預料的優勢，即它們特別善于在許多應用中保持低粘度或減小粘度，例如在飼料中；在釀造 或麥芽制造中；在基于谷物的葡萄糖生產中，例如用于進一步加工成生物燃料和/或生物 化學品（例如，生物基異戊二烯）中；或在小麥面筋-淀粉分離工業中用于生產淀粉等等。
[0061] 特別已經發現與GH11酶相比，本文測試的GH10酶的降解產物平均更短。這意味 著所述降解產物不促成或引起粘度的增加。
[0062] 基于這些發現，根據本發明的木聚糖酶可用于降解含有木聚糖的原料，尤其是阿 拉伯木聚糖，特別是AXinsol。此外或備選地，根據本發明的木聚糖酶可被用于降解產生于 AXinsol降解的、或（天然地）存在于基于谷物的物質中的可溶性聚合物（如寡聚物）。令 人吃驚的是，已經發現根據本發明的木聚糖酶可被用于降解含有木聚糖的原料，尤其是阿 拉伯木聚糖，特別是AXinsol，并且可用于降解產生于AXinsol的降解的可溶性聚合物（如 寡聚物）。
[0063] 此類酶可以用于許多工業中，包括飼料、釀造或麥芽制造、處理含有阿拉伯木聚糖 的原材料如基于谷物的物質、小麥面筋-淀粉分離工業、生產淀粉來源的糖漿、生產生物燃 料等。
[0064] 僅通過分離和測試FveXyn 4 (SEQ ID No. 3)，已經發現了這些令人吃驚且出乎預 料的技術效果。之后，可以鑒定其他類似作用酶（例如SEQ ID No. 11和/或SEQ ID No. 15)。
【發明內容】
[0065] 第一個方面，本發明提供包含（或為）本文SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2或SEQ ID No. 3所示多肽序列的木聚糖酶、或與SEQ ID No. 1或SEQ ID No. 2或SEQ ID No. 3具有至 少98. 5% (例如至少98. 8或99或99. 1或99. 5% )同一性的其變體、同源物、片段或衍生 物；或由本文SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5或SEQ ID No. 6的核苷酸序列、或與SEQ ID No. 4、 SEQ ID No. 5 或 SEQ ID No. 6 具有至少 97. 7% (例如，至少 98%、98. 5%或 99%)同一性 的核苷酸序列編碼的木聚糖。
[0066] 在其他方面，本發明提供分離或重組核酸分子，其包含（或為）選自以下的多核苷 酸序列：
[0067] a.多核苷酸序列，其編碼選自SEQIDNo. 1、SEQIDNo. 2或SEQIDNo. 3的多肽 序列、或與SEQIDNo. 1或SEQIDNo. 2或SEQIDNo. 3具有至少98. 5% (例如至少98. 8 或99或99. 1或99. 5% )同一性的變體、同源物、片段或衍生物；或
[0068] b?本文 SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5 或 SEQ ID No. 6 的多核苷酸序列；或與 SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5 或 SEQ ID No. 6 具有至少 97. 7% (例如，至少 98%、98. 5%或 99%)同 一性的核苷酸序列。
[0069] 在本發明的一個方面提供了包含選自以下的多核苷酸序列的載體（例如，質粒）：
[0070] &.多核苷酸序列，其編碼選自5￡〇10吣.1、5￡〇10吣.2或5￡〇10吣.3的多肽序 列、或與SEQ ID No. 1或SEQ ID No. 2或SEQ ID No. 3具有至少98. 4% (例如至少98. 5% 或98. 8或99或99. 1或99. 5% )同一性的變體、同源物、片段或衍生物；或
[0071] b?本文 SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5 或 SEQ ID No. 6 的多核苷酸序列；或與 SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5 或 SEQ ID No. 6 具有至少 97. 7% (例如，至少 98%、98. 5%或 99%)同 一性的核苷酸序列。
[0072] 本發明的其他方面提供了包含本發明載體或核酸的宿主細胞，所述核酸包含（或 為）本文3￡〇10吣.4、5￡〇10吣.5或5￡〇10吣.6的核苷酸序列；或與5￡〇10吣.4、5￡〇 ID No. 5或SEQ ID No. 6具有至少97. 7% (例如，至少98%、98. 5%或99%)同一性的核 苷酸序列。
[0073] 本發明還涉及用于降解含阿拉伯木聚糖的物質的方法，其包括混合含阿拉伯木聚 糖的物質與木聚糖酶，所述木聚糖酶是GH10真菌木聚糖酶，和降解不溶性阿拉伯木聚糖 (AXinsol)以及降解從AXinsol降解產生的聚合物、寡聚物或其組合，其中所述木聚糖酶降 解從AXinsol降解直接或基本上直接產生的聚合物、寡聚物或其組合。
[0074] 本發明還涉及降解含不溶性阿拉伯木聚糖的物質的方法，其包括混合所述物質與 木聚糖酶，其中所述木聚糖包含（或為）本文SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 9、SEQ ID No. 10、SEQ ID No. 11 或 SEQ ID No. 15 的多肽序列、或與 SEQ ID No. 1 或 SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 9、SEQ ID No. 10、SEQ ID No. 11 或 SEQ ID No. 15 具有至少75%同一性（如至少80%、85%、90%、95%、98%或99%同一性）的變體、同源 物、片段或衍生物，或包含具有至少一個氨基酸保守取代的SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 9、SEQ ID No. 10、SEQ ID No. 11 或 SEQ ID No. 15 的多肽序列；或所 述木聚糖酶由這樣的核苷酸序列編碼，所述核苷酸序列為本文SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5、 SEQ ID No. 6、SEQ ID No. 12、SEQ ID No. 13、SEQ ID No. 14、SEQ ID No. 16、SEQ ID No. 17 或SEQ ID No. 18的核苷酸序列，或可以在高度嚴格條件下與SEQ ID No. 4、SEQ ID No. 5、 SEQ ID No. 6、SEQ ID No. 12、SEQ ID No. 13、SEQ ID No. 14、SEQ ID No. 16、SEQ ID No. 17 或5￡〇10吣.18雜交的核苷酸序列，或與5￡〇10吣.4、5￡〇10%.5、5￡〇10吣.6、5￡〇10 No. 12、SEQ ID No. 13、SEQ ID No. 14、SEQ ID No. 16、SEQ ID No. 17 或 SEQ ID No. 18 具有 至少75%同一性（如至少80%、85%、90%、95%或98%同一性）的核苷酸序列，或由于遺 傳密碼的簡并性不同于SEQ ID No. 4或SEQ ID No. 5或SEQ ID No. 6或SEQ ID No. 12或 SEQ ID No. 13 或 SEQ ID No. 14 或 SEQ ID No. 16 或 SEQ ID No. 17 或 SEQ ID No. 18 的核苷 酸序列。
[0075] 本發明還涉及用于生產葡萄糖或淀粉（例如來自小麥的淀粉或來自淀粉的葡萄 糖）的方法，其包括混合含木聚糖的物質（優選含阿拉伯木聚糖的物質，如含不溶性阿拉 伯木聚糖的物質）與木聚糖酶，其中所述木聚糖酶包含（或為）本文SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 9、SEQ ID No. 10、SEQ ID No. 11 或 SEQ ID No. 15 的多肽 序列，或與 SEQ ID No. 1 或 SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 9、SEQ ID No. 10、SEQ 10吣.115￡〇10吣.15具有至少75%同一性（如至少80%、85%、90%、95%、98%或99% 同一性）的其變體、同源物、片段或衍生物，或包含具有至少一個氨基酸保守取代的SEQ ID No. 1、SEQ ID No. 2、SEQ ID No. 3、SEQ ID No. 9、SEQ ID No. 10、SEQ ID No. 11 或 SEQ ID No. 15的多肽序列；或所述木聚糖酶由這樣的核苷酸序列編碼，所述核苷酸序列為本文SEQ ID No. 4,SEQ ID No. 5,SEQ ID No. 6,SEQ ID No. 12,SEQ ID No. 13,SEQ ID No. 14,SEQ ID No. 16、SEQ ID No. 17或SEQ ID No. 18的核苷酸序列，或可以在高度嚴格條件下與SEQ ID No