本發明屬于生物工程領域，具體涉及一種生產羊抗人血清淀粉樣蛋白a抗血清的方法。
背景技術：
：人血清淀粉樣蛋白a（saa）是一種急性相蛋白并與血漿高密度脂蛋白(hdl)結合。抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。一種抗原能否引起抗體生成反應，一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇（antigenicdeterminant），另一方面取決于機體的免疫狀態，當具備以上兩個條件后，抗體生成將遵循抗體生成的一般規律——初次反應和再次反應。抗原的種類繁多，包括天然的蛋白質抗原和細胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫動物需加用佐劑，尤其在使用可溶性抗原時，以期得到高效價的抗血清；合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質需先通過人工的方法與蛋白質載體連接后再與佐劑混合免疫動物，方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機體內存留的時間，從而改變了抗原原有的免疫原性。動物免疫系統是動物在種系發生和個體發育過程中逐漸進化和完善起來的，是機體執行免疫功能的組織機構，是產生免疫應答的物質基礎。動物免疫系統是由免疫器官、免疫細胞和免疫分子組成的。目前，將人血清淀粉樣蛋白a（saa）抗原與佐劑乳化后，按一定的程序免疫動物，可在動物血清中產生抗人的saa抗體。雖然目前的生產方法都可以產生一定量的抗體，但是抗體產生速度慢，水平較低，且抗原用量高。技術實現要素：為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種能提高抗體效價、降低抗原用量的生產羊抗人血清淀粉樣蛋白a抗血清的方法。為達到上述目的，本發明是通過以下的技術方案來實現的。一種生產羊抗人血清淀粉樣蛋白a抗血清的方法，該方法包括以下步驟：（1）抗原準備：選用人血清淀粉樣蛋白a（saa）抗原，注射前以弗氏佐劑進行乳化得抗原乳劑；（2）第一次注射：使用上述抗原乳劑對羊進行注射；在動物體上選取22個部位點進行注射；（3）第二次注射：第一次注射后14天進行第二次注射；（4）第三次注射：第二次注射后12天進行第三次注射；（5）第四次注射：第三次注射后10天進行第四次注射；（6）第五次注射：第四次注射后8天進行第五次注射；（7）第六次注射：第五次注射后8天進行第六次注射；（8）第七次注射：第六次注射后8天進行第七次注射；（9）第八次注射：第七次注射后8天進行第八次注射；（9）血清效價檢測：最后一次注射后8-10天采血，分離血清，檢測其雙擴效價；第二次至第八次的免疫注射部位均在動物體上選取8-16個部位點進行注射。作為本發明的進一步改進，第一次注射前乳化用的弗氏佐劑為完全弗氏佐劑，第二次、第三次、第四次、第五次、第六次、第七次注射前乳化用的弗氏佐劑為不完全弗氏佐劑。作為本發明的進一步改進，所述22個部位點分別為：后足窩各1點、頜下淋巴結左右各1點、腋窩周圍左右各2點、股淋巴結周圍各3點、背部脊柱左右兩側各4點。作為本發明的進一步改進，第二次至第八次的免疫注射部位分別為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。作為本發明的進一步改進，第一次注射的劑量為每只羊0.55mg，每一針劑量平均分配。作為本發明的進一步改進，第二次免疫劑量是第一次的2倍。作為本發明的進一步改進，第三次、第四次、第五次、第六次、第七次注射的劑量均為第二次的2倍量，每一針劑量平均分配。有益效果：與現有技術相比，本發明的優點在于：本發明生產羊抗人血清淀粉樣蛋白a抗血清的方法，成本低，過程簡單，不僅能穩定生產抗體，并且產生抗體速度快，抗體水平高，抗原用量小；還能縮短免疫周期，節約生產成本。能克服各羊只之間的個體差異，抗體效價整齊劃一，能為ivd行業提供穩定的的原料：使生物科技在動物抗體制備方面規模化生產成為可能。具體實施方式下面結合實例對本發明作進一步的詳細說明。實施例1：一種生產羊抗人血清淀粉樣蛋白a抗血清的方法，該方法包括以下步驟：（1）抗原準備：選用人血清淀粉樣蛋白a抗原，注射前以弗氏佐劑進行乳化得抗原乳劑；以下第一次注射前乳化用的弗氏佐劑為完全弗氏佐劑，第二次、第三次、第四次、第五次、第六次、第七次注射前乳化用的弗氏佐劑為不完全弗氏佐劑；（2）第一次注射：使用使用步驟（1）方法制備的人血清淀粉樣蛋白a（saa）抗原乳劑對羊進行注射；注射部位為后足窩各1點、頜下淋巴結左右各1點、腋窩周圍左右各2點、股淋巴結周圍各3點、背部脊柱左右兩側各4點，共22個點；第一次注射的劑量為每只羊0.55mg抗原，每一針劑量平均分配。（3）第二次注射：第一次注射后14天進行第二次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點，劑量為每只羊1.1mg抗原，每一針劑量平均分配。（4）第三次注射：第二次注射后12天進行第三次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。劑量為每只羊2.2mg抗原，每一針劑量平均分配。（5）第四次注射：第三次注射后10天進行第四次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。劑量為每只羊2.2mg抗原，每一針劑量平均分配。（6）第五次注射：第四次注射后8天進行第五次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。劑量為每只羊2.2mg抗原，每一針劑量平均分配。（7）第六次注射：第五次注射后8天進行第六次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。劑量為每只羊2.2mg抗原，每一針劑量平均分配。（8）第七次注射：第六次注射后8天進行第七次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。劑量為每只羊2.2mg抗原，每一針劑量平均分配。（9）第八次注射：第七次注射后8天進行第八次注射；使用步驟（1）方法制備的抗原乳劑對羊進行注射，注射部位為：腹股溝、腋部、頸部、背部皮下多點注射，每個部位1-2點，共計8-16點。劑量為每只羊2.2mg抗原，每一針劑量平均分配。（10）血清效價檢測：最后一次注射后8-10天采血，分離血清，檢測其雙擴效價；下面通過表1來進一步闡述的有益效果。表1:采用本發明制備出羊抗人血清淀粉樣蛋白a抗血清產品效價表免疫方法產品統計時間段批次/數量產品效價（雙擴）傳統方法saa2013年11月至2014年12月2/101:8本發明實施例1saa2014年12月至2016年2月3/151:16由表1可知，采用本發明可以使saa免疫效價提高2倍以上。本發明按照上述實施例進行了說明，應當理解，上述實施例不以任何形式限定本發明，凡采用等同替換或等效變換方式所獲得的技術方案，均落在本發明的保護范圍之內。當前第1頁12