曲克蘆丁酰胺類衍生物及其合成方法和用途與流程

本發明涉及黃酮類化合物，尤其涉及曲克蘆丁酰胺類化合物及其制備方法和用途，屬藥物化學領域。

背景技術：

黃酮是一種多酚類化合物，廣泛存在于高等植物的根、莖、葉、花、果實中，這類化合物不僅對心腦血管以及消化系統異常有著良好的抑制作用和鎮痛作用，而且還具有清除自由基、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗突變、抗菌和調節免疫等方面的功能(harborne,jb；williams,ca.advancesinflavonoidresearchsince1992[j].phytochemistry,2000,55,481-504；劉星雨,孫體健,周敏.天然黃酮類化合物的藥理活性及分離提取[j].中國藥物與臨床,2014,14(5),621-624)。但由于其剛性平面結構，分子間排列緊密，使大多數黃酮類天然產物水溶性或脂溶性較低，導致其生理活性利用率不高，限制了黃酮類天然產物的開發和應用(延璽,劉會青,鄒永青,等.黃酮類化合物生理活性及合成研究進展[j].有機化學,2008,28(9),1534-1544)。改性的方法主要有取代反應、mannich反應、酯化反應、羥基化反應和糖基化反應等。例如用不同碳鏈長的二溴烷烴與白楊素7-oh位發生親電取代反應，引入活性基團后與嗎啡啉、n-甲基哌嗪、哌嗪、n,n-二甲基胺氨解反應合成新型白楊素的含氮衍生物(sureshbabuk,haribabut,srinivaspv,etal.synthesisandbiologicalevaluationofnovelc(7)modifiedchrysinanaloguesasantibacterialagents[j].bioorg.med.chem.lett.,2006,16,221-224)。zeng等同樣利用親電取代反應合成了具有哌嗪取代基的黃酮類衍生物，體內體外顯示了抗腫瘤性(zengs,liuw,nieff,etal.lyg-202,anewflavonoidwithapiperazinesubstitution,showsantitumoreffectsinvivoandinvitro[j].biochem.bioph.res.co.,2009,385,551-556)；babu等通過mannich反應用甲醛和一級、二級胺與木蝴蝶素合成了一系列的8-胺甲基衍生物(babuth,ramasubbaraov,ashokk,etal.synthesisandbiologicalevaluationofnovel8-aminomethylatedoroxylinaanaloguesasa-glucosidaseinhibitors[j].bioorg.med.chem.let,2008,18,1659-1662)；bhullar等在丙酮和叔戊醇中，以novozym435催化異槲皮苷與脂肪酸的酯化反應，選擇性合成了異槲皮苷-6”-o-酯基衍生物。其酯化產物脂溶性、抗氧化性、抗增殖活性都有了很大的提高(ziaullah；bhullar,khushwants.；warnakulasuriya,sumudun.etal.bhullarks,warnakulasuriyasn,rupasinghehv.biocatalyticsynthesis,structuralelucidation,antioxidantcapacityandtyrosinaseinhibitionactivityoflongchainfattyacidacylatedderivativesofphloridzinandisoquercitrin[j].bioorg.med.chem.let,2013,21(3):684-692)。韓天佼以6種黃酮(白楊素，芹菜素，大豆苷元等)為原料，與氨基磷酸酯在黃酮c-7羥基發生酯化反應，合成的黃酮氨基磷酸酯衍生物經hiv活性評價，可能具有抗腫瘤活性(韓天佼，六種黃酮7位氨基磷酸醋衍生物的設計與合成[d].大連,大連理工大學,2012)；modolo等通過糖基轉移酶催化了黃酮和異黃酮進行糖基化反應。(modololv,lil,panh,etal.crystalstructuresofglycosyltransferaseugt78g1revealthemolecularbasisforglycosylationanddeglycosylationof(iso)flavonoids[j].j.mol.biology,2009,392(5):1292-1302)。

離子液體作為一種綠色溶劑，因具有低蒸氣壓、廣泛的液態范圍、高離子電導性、高熱穩定性和可溶解大多數化合物等良好的性質，被廣泛應用于有機合成中。近年來，離子液體作為溶劑，用于天然產物的改性也有報道，例如katsoura等研究了酶在離子液體[bmim][bf4]做溶劑時催化蘆丁和柚皮苷酰化反應，離子液體的使用大大提高了反應轉化率和酶的區域選擇性(katsouramh,polyderaac,tsironisl,etal.useofionicliquidsasmediaforthebiocatalyticpreparationofflavonoidderivativeswithantioxidantpotency[j].j.biotechnol.,2006,123(4):491-503)。wang報道了離子液體與緩沖溶劑作為共溶劑，有利于酶通過選擇性地水解蘆丁，轉化得到異槲皮苷(wang,j,sun,gx,yu,letal.enhancementoftheselectiveenzymaticbiotransformationofrutintoisoquercitrinusinganionicliquidasaco-solvent[j].biores.technol.2012,128:156-163)。用離子液體催化合成曲克蘆丁酰胺類衍生物未見報道。相對于文獻報道的化學催化和酶催化改性黃酮類化合物而言，以離子液體既做溶劑、又作為催化劑的反應體系，不僅能大大節省催化劑的用量，而且因離子液體制備簡單，價格較低，容易回收等特點，可降低合成成本，簡化后處理操作。用價廉的離子液體作為催化劑的反應體系也為黃酮類化合物的結構修飾提供一條新的途徑。

技術實現要素：

本發明的目的在于提供系列曲克蘆酰胺類衍生物；另一目的在于提供用離子液體做催化劑和溶劑、反應條件溫和、簡單易行、副產物少的曲克蘆丁酰胺類衍生物制備方法。

本發明所述的曲克蘆丁酰胺類衍生物具有如下結構：

n-(4-氟)苯乙基/芐基曲克蘆丁酰胺衍生物(ⅰ)

含四氫異喹啉曲克蘆丁酰胺類衍生物(ⅱ)

通式i、ii中n代表了亞甲基的個數，分別為2,3,4,5，6,7,8,10,11。通式i中r’分別是苯乙基、4-氟苯乙基、芐基；r1和r2分別為-h，-och3，相同或不同。

通式i中優選如下化合物：

(1)n為3，4，5，7。

(2)n為3，4，5。

(3)n為3，4，5。

通式ii中優選如下化合物：

(1)r1＝h，r2＝h，n為3，5，10，

(2)r1＝och3，r2＝och3，n為4，8，

(3)r1＝h，r2＝och3，n為3，5，7。

上述化合物合成路線如下：

n-(4-氟)苯乙基/芐基曲克蘆丁酰胺衍生物(ⅰ)其合成方法通過如下方式實現：

曲克蘆丁與脂肪酸二乙烯酯在枯草桿菌蛋白酶催化下，以吡啶為反應介質，40℃～60℃反應，反應結束后，過柱分離得到曲克蘆丁乙烯酯。

將不同鏈長的曲克蘆丁乙烯酯在離子液體存在下，分別與苯乙基胺、4-氟-苯乙基胺或芐胺化合物40～70℃反應。反應結束后有機溶劑萃取，萃取液減壓濃縮，柱色譜分離，得到n-苯乙基/芐基曲克蘆丁酰胺衍生物(ⅰ)。

曲克蘆丁乙烯酯:胺類化合物摩爾比為1:2～10。

含四氫異喹啉曲克蘆丁酰胺類衍生物(ⅱ)其合成方法通過如下方式實現：

離子液體做反應介質，曲克蘆丁乙烯酯與1,2,3,4-四氫異喹啉類化合物為反應底物，在40～70℃反應。反應結束后，有機溶劑萃取產物，濃縮后，柱色譜分離，得到含四氫異喹啉曲克蘆丁酰胺類衍生物(ⅱ)。

曲克蘆丁乙烯酯與1，2，3，4-四氫異喹啉類化合物摩爾比為1:1～12。

本專利所述離子液體由陽離子和陰離子組成，陽離子包括吡啶類陽離子

3-甲基咪唑類陽離子三辛基甲基銨陽離子(縮寫toma]⁺)，其中的r分別代表乙基、正丁基、正己基、正辛基；陰離子包括bf4^-、no3^-、pf6^-、tf2n^-(雙三氟甲磺酰亞胺負離子)、br^-或cl^-。

本發明優點：以離子液體既做溶劑、又作為催化劑的反應體系，無需額外添加催化劑、合成產率高，達70％以上，反應工藝簡單、操作簡便，反應條件溫和，后處理容易，離子液體容易回收、成本較低；同時，生成的產物具有抗腫瘤活性，對結腸癌和乳腺癌有較好的抑制活性，具有較好的開發應用價值。

具體實施方式

下面通過實施例對本發明進行進一步的闡述，但并不意味著本發明的內容局限于實施例。

實施例1-1

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，戊二酸二乙烯酯138mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶120mg后，放入50℃恒溫振蕩器中反應，轉速250rev·min^-1。反應72h結束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。柱色譜分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(15:3.6:0.5v/v)，得到黃色固體曲克蘆丁戊二酰乙烯酯103mg(0.12mmol)，產率65％。

¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm)：12.49(s,1h,oh5),7.85(s,1h,h2’),7.74(d,1h,j＝7.2hz,h6’),7.22(dd,1h,j＝6.4hz,j＝14.1hz,-och＝),7.17(d,1h,j＝6.6hz,h5’),6.75(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.35(d,1h,j＝7.6hz,h1”),4.89(m,1h,och＝ch2),4.65(m,1h,och＝ch2),4.47(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.32(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.05(m,4h,hofa),3.75(m,4h,hofb),3.71-3.04(10h,hofrhamnoglucosyl),2.47(m,2h,-ch2-cooch＝ch2),2.26(m,2h,-ch2-co-troxerutin),1.80(m,2h,otherch2ofglutaridioylpart),0.97(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3385(oh),1732(c＝o),1645(c＝c)；esi-ms(m/z):905.1(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、苯乙胺73mg(0.66mmol)，[omim]bf4(1-正辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應24h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含苯乙胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體79.1mg，產率為75％。

yellowpowder,rf＝0.21,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.82-7.83(m,1h,h2’),7.67-7.73(m,1h,h6’),7.10-7.24(m,6h,1hofh5’,5hofphenethylamine),6.68(s,1h,h8),6.36(s,1h,h6),5.31-5.36(m,1h,h1”),4.35-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.06-4.08(m,4h,hofa),3.66-3.74(m,4h,hofb),3.01-3.74(m,12h,10hofrhamnoglucosyl,2hofphenethylamine),2.63-2.67(t,j＝7.2hz,2h,hofphenethylamine),2.04-2.26(m,4h,2hofch2coo-troxerutin,2hofch2co-phenethylamine),1.67-1.71(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.89-0.91(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3380cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1454cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):982.3(m+na)⁺.

實施例1-2

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、4-氟苯乙胺153mg(1.10mmol)，[omim]br(1-正辛基-3-甲基咪唑溴鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應24h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含4-氟苯乙胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體91.4mg，產率為85％。

yellowpowder,rf＝0.3,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.82-7.83(m,1h,h2’),7.66-7.73(m,1h,h6’),7.00-7.19(m,5h,1hofh5’,5hofphenethylamine),6.66-6.68(m,1h,h8),6.35-6.36(m,1h,h6),5.32-5.37(m,1h,h1”),4.35-4.38(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.02-4.08(m,4h,hofa),3.67-3.76(m,4h,hofb),3.01-3.76(m,12h,10hofrhamnoglucosyl,2hofphenethylamine),2.62-2.66(t,j＝7.0hz,2h,hofphenethylamine),2.04-2.56(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-phenethylamine),1.65-1.73(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.90-0.91(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3334cm^-1(oh),1734cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1000.3(m+na)⁺.

實施例1-3

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，壬二酸二乙烯酯180mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶175mg后，放入60℃恒溫振蕩器中反應，轉速250rev·min^-1。反應148h結束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。后處理同上。得到黃色固體曲克蘆丁壬二酰乙烯酯101mg(0.10mmol)，產率57％。

¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.50(s,1h,oh5),7.85(s,1h,h2’),7.75(d,1h,j＝8.4hz,h6’),7.21(dd,1h,j＝6.0hz,j＝13.8hz,-och＝),7.15(d,1h,j＝8.4hz,h5’),6.75(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.41(d,1h,j＝10.0hz,h1”),4.91(m,1h,och＝ch2),4.61(m,1h,och＝ch2),4.41(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.32(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.06(m,4h,hofa),3.75(m,4h,hofb),3.71-3.00(10h,hofrhamnoglucosyl),2.39(t,2h,j＝7.2hz,-ch2-cooch＝ch2),2.34(t,2h,j＝7.2hz,-ch2-co-troxerutin),1.52,1.25(m,10h,otherch2ofnonoanedioylpart),0.99(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3377(oh),1735(c＝o),1647(c＝c)；esi-ms(m/z):961.3(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁壬二酰乙烯酯101.4mg(0.11mmol)、4-氟苯乙胺123mg(0.88mmol)，[bmim]br(1-正丁基-3-甲基咪唑溴鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應36h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體79.5mg，產率為70％。

yellowpowder,rf＝0.32,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.81(s,1h,h2’),7.63-7.70(m,1h,h6’),6.97-7.17(m,6h,1hofh5’,5hofphenethylamine),6.61(s,1h,h8),6.32(s,1h,h6),5.28-5.34(m,1h,h1”),4.35-4.36(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.23-4.26(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.00-4.06(m,4h,hofa),3.67-3.75(m,4h,hofb),3.01-3.75(m,12h,10hofrhamnoglucosyl,2hofphenethylamine),2.61-2.65(t,j＝6.6hz,2h,hofphenethylamine),1.90-2.28(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-phenethylamine),1.01-1.45(m,10h,otherch2ofazelaoylpart),0.89-0.91(d,j＝5.6hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3334cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1056.4(m+na)⁺.

實施例1-4

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、卞胺117mg(1.10mmol)，[opy]br(n-正辛基吡啶溴鹽)10ml，60℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應24h。乙酸乙酯萃取，減壓濃縮后，柱層析分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含卞胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體81.1mg，產率為78％。

yellowpowder,rf＝0.29,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):¹hnmr(400mhz,dmso-d6,δppm):7.81(s,1h,h2’),7.63-7.70(m,1h,h6’),7.23-7.27(m,2h,hofbenzylamine)7.16-7.18(m,3h,1hofh5’,2hofbenzylamine),7.07-7.09(m,1h,hofbenzylamine),6.63(s,1h,hofh8),6.32-6.33(d,j＝2.0hz,1h,h6),5.29-5.34(m,1h,h1”),4.32-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.20-4.26(m,4h,1hofh1”’,1hofbacylated,2hofbenzylamine),4.02-4.05(m,4h,hofa),3.67-3.75(m,4h,hofb),3.01-3.75(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.09-2.34(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-benzylamine),1.73-1.80(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.88-0.90(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr):3334cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):968.3(m+na)⁺.

實施例1-5

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯95mg(0.11mmol)、卞胺117mg(1.10mmol)，[hmim]bf4(1-己基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽)10ml，50℃空氣浴150rpm恒溫振蕩，反應24h。后處理同上。得到含卞胺的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體85.2mg，產率為82％。

數據同實施例1-4。

實施例2-1

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯190mg(0.22mmol)、1,2,3,4-四氫異喹啉292.8mg(2.20mmol)，[omim]br20ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應24h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機溶劑，柱層析分離得到產品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。得到含四氫異喹啉的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體產物160mg，產率為75％。

yellowsolid,rf＝0.1,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.81-7.83(m,1h,h2’),7.67-7.72(m,1h,h6’),7.08-7.12(m,5h,1hofh5’,4hoftetrahydroisoquinoline),6.69(s,1h,h8),6.36(s,1h,h6),5.33-5.37(m,1h,h1”),4.52-4.53(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.34-4.43(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.02-4.08(m,4h,hofa),3.70-3.78(m,4h,hofb),3.54-3.60(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.01-3.67(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.71-2.75(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.36-2.40(m,4h,2hofch2coo-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.73-1.78(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.90-0.91(d,j＝4.8hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.3(c＝o),171.0(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),156.9(c-5),151.4(c-2),150.7(c-4’),147.4(c-3’),135.2(tetrahydroisoquinoline),134.2(tetrahydroisoquinoline),133.7(c-3),128.9(tetrahydroisoquinoline),128.8(tetrahydroisoquinoline),126.8(tetrahydroisoquinoline),126.6(tetrahydroisoquinoline),123.3(c-1’),122.7(c-6’),115.3(c-5’),113.4(c-2’),105.5(c-10),101.7(c-1”),101.4(c-1”’),98.8(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),71.0(c-2”’),70.9(c-4”),70.8(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.7(c-b),46.7(tetrahydroisoquinoline),43.9(tetrahydroisoquinoline),42.9(tetrahydroisoquinoline),33.3((ch2)n),32.3((ch2)n),29.2((ch2)n),18.2(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):995(m+na)⁺.

實施例2-2

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，十二二酸二乙烯酯172mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶120mg后，放入50℃恒溫振蕩器中反應，轉速250rev·min^-1。反應96h結束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。柱色譜分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(15:3.6:0.5v/v)，得到黃色固體曲克蘆丁十二二酰乙烯酯89mg(0.092mmol)，產率51％。

yellowpowder，,rf0.34；¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.50(s,1h,oh5),7.85(s,1h,h2’),7.74(d,1h,j＝8.7hz,h6’),7.22(dd,1h,j＝6.2hz,j＝14.0hz,-och＝),7.15(d,1h,j＝8.8hz,h5’),6.75(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.38(d,1h,j＝6.0hz,h1”),4.92(m,1h,och＝ch2),4.60(m,1h,och＝ch2),4.42(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.32(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.13-4.06(m,4h,hofa),3.75(m,4h,hofb),3.70-3.04(10h,hofrhamnoglucosyl),2.41(m,2h,-ch2-cooch＝ch2),2.33(m,2h,-ch2-co-troxerutin),1.52,1.21(m,16h,otherch2oftridecanoylpart),0.96(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3392(oh),1735(c＝o),1647(c＝c)；esi-ms(m/z):1003.3(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁十二二酰乙烯酯212.3mg(0.22mmol)、1,2,3,4-四氫異喹啉176mg(1.32mmol)，[omim]no320ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應48h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機溶劑，柱層析分離得到產品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體產物176mg，產率為75％。

yellowsolid,rf＝0.23,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.87(s,1h,h2’),7.72-7.79(m,1h,h6’),7.13-7.18(m,5h,1hofh5’,4hoftetrahydroisoquinoline),6.72(s,1h,h8),6.39(s,1h,h6),5.36-5.41(m,1h,h1”),4.58-4.62(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.35-4.44(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.28-4.32(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.07-4.12(m,4h,hofa),3.74-3.82(m,4h,hofb),3.63-3.66(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.05-3.73(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.75-2.84(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.29-2.36(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.16-1.49(m,16h,otherch2ofdodecanoylpart),0.95-0.96(d,j＝6hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.8(c-4),173.8(c＝o),172.2(c＝o),165.0(c-7),160.8(c-9),156.8(c-5),151.4(c-2),150.7(c-4’),147.8(c-3’),135.1(tetrahydroisoquinoline),134.2(tetrahydroisoquinoline),133.6(c-3),128.8(tetrahydroisoquinoline),127.0(tetrahydroisoquinoline),126.8(tetrahydroisoquinoline),126.6(tetrahydroisoquinoline),123.7(c-1’),122.6(c-6’),115.4(c-5’),114.9(c-2’),105.3(c-10),101.9(c-1”),101.2(c-1”’),98.7(c-6),93.3(c-8),76.5(c-3”),76.1(c-5”),74.3(c-2”),72.0(c-4”’),70.8(c-3”’),70.7(c-2”’),70.6(c-4”),70.5(c-a),70.4(c-a),68.6(c-5”’),67.5(c-6”),67.4(c-a),62.9(c-b),59.8(c-b),59.6(c-b),47.1(tetrahydroisoquinoline),44.0(tetrahydroisoquinoline),43.2(tetrahydroisoquinoline),33.9((ch2)n),33.2((ch2)n),32.9((ch2)n),31.1((ch2)n),29.2((ch2)n),29.0((ch2)n),28.8((ch2)n),28.2((ch2)n),25.1((ch2)n),24.7((ch2)n),17.9(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1456cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1092.8(m+na)⁺.

實施例2-3

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁140mg(0.18mmol)，已二酸二乙烯酯172mg(0.75mmol)，10ml吡啶為溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶120mg后，放入55℃恒溫振蕩器中反應，轉速250rev·min^-1。反應96h結束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。柱色譜分離純化，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(15:3.6:0.5v/v)，得到黃色固體曲克蘆丁己二酰乙烯酯96.8mg(0.108mmol)，產率60％。

yellowpowder,rf0.32；¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.49(s,1h,oh5),7.84(s,1h,h2’),7.73(d,1h,j＝7.2hz,h6’),7.20(dd,1h,j＝6.24hz,j＝14.0hz,-och＝),7.14(d,1h,j＝7.6hz,h5’),6.73(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.34(d,1h,j＝7.3hz,h1”),4.89(m,1h,och＝ch2),4.64(m,1h,och＝ch2),4.40(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.31(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.06(m,4h,hofa),3.74(m,4h,hofb),3.7-3.1(10h,hofrhamnoglucosyl),2.44(m,2h,-ch2-cooch＝ch2),2.38(m,2h,-ch2-co-troxerutin),1.58(m,4h,otherch2ofhexanedioylpart),0.99(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3412(oh),1726(c＝o),1648(c＝c)；esi-ms(m/z):919.1(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁已二酰乙烯酯193mg(0.22mmol)、6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉424.8mg(2.20mmol)，[opy]bf420ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應24h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機溶劑，柱層析分離得到產品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。得到含雙二甲氧基四氫異喹啉的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體產物165.5mg，產率為72％。

yellowsolid,rf＝0.15,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.82-7.84(m,1h,h2’),7.66-7.72(m,1h,h6’),7.09-7.12(m,1h,h5’),6.67-6.71(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.35(s,1h,h6),5.32-5.37(m,1h,h1”),4.43-4.47(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.32-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.23-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.02-4.08(m,4h,hofa),3.72-3.73(m,4h,hofb),3.65-3.66(m,6h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.53-3.57(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.00-3.66(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.60-2.68(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.29-2.38(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.43-1.58(m,4h,otherch2ofhexanadioylpart),0.90-0.91(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.4(c＝o),171.2(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),148.1(tetrahydroisoquinoline),147.7(tetrahydroisoquinoline),147.5(c-3’),134.2(c-3),126.9(tetrahydroisoquinoline),125.8(tetrahydroisoquinoline),123.4(c-1’),122.8(c-6’),115.5(c-5’),113.8(c-2’),112.2(tetrahydroisoquinoline),110.4(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.4(c-1”’),98.9(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),70.9(c-2”’),70.8(c-4”),70.8(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.8(c-b),55.9(-och3),46.6(tetrahydroisoquinoline),43.7(tetrahydroisoquinoline),43.1(tetrahydroisoquinoline),33.7((ch2)n),32.5((ch2)n),28.8((ch2)n),27.9((ch2)n),18.1(c-6”’)；ir(kbr):3367cm^-1(oh),1732cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1069(m+na)⁺.

實施例2-4

在50ml錐形瓶中稱取曲克蘆丁282mg(0.38mmol)，癸二酸二乙烯酯378mg(1.5mmol)，10ml吡啶作溶劑，加入枯草桿菌蛋白酶300mg后，放入60℃恒溫振蕩器中反應，轉速250rev·min^-1。反應120h結束后，過濾除去酶，減壓蒸出吡啶。純化同上。得到黃色固體曲克蘆丁癸二酰乙烯酯200mg(0.21mmol)，產率55％。

¹h-nmr(dmso-d6),δ(ppm):12.49(s,1h,oh5),7.84(s,1h,h2’),7.72(d,1h,j＝7.0hz,h6’),7.20(dd,1h,j＝6.21hz,j＝14.0hz,-och＝),7.14(d,1h,j＝7.4hz,h5’),6.73(s,1h,h8),6.38(s,1h,h6),5.34(d,1h,j＝7.3hz,h1”),4.89(m,1h,och＝ch2),4.63(m,1h,och＝ch2),4.39(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.31(m,1h,h1”’),4.26(m,1h,hofbacylated),4.12-4.06(m,4h,hofa),3.74(m,4h,hofb),3.7-3.1(10h,hofrhamnoglucosyl),2.40(t,2h,j＝7.2hz,-ch2-cooch＝ch2),2.33(t,2h,j＝6.9hz,-ch2-co-troxerutin),1.58,1.22(m,12h,otherch2ofdecanedioylpart),0.99(d,3h,j＝6.2hz,ch3ofrhamnosyl)；ir(kbr,cm^-1):3410(oh),1728(c＝o),1649(c＝c)；esi-ms(m/z):975.2(m+na)⁺.

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁癸二酰乙烯酯209mg(0.22mmol)、6,7-二甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉424.8mg(2.20mmol)，[bpy]cl(n-正丁基吡啶氯鹽)20ml，70℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應36h。乙酸乙酯萃取，減壓旋蒸，除去大部分有機溶劑，柱層析分離得到產品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體產物181.3mg，產率為75％。

yellowsolid,rf＝0.2,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):7.83(s,1h,h2’),7.67-7.74(m,1h,h6’),7.09-7.13(s,1h,h5’),6.68-6.73(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.35(s,1h,h6),5.32-5.38(m,1h,h1”),4.43-4.48(m,2h,hoftetrahydroisoquinolined),4.35-4.37(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.24-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.03-4.08(m,4h,hofa),3.71-3.73(m,4h,hofb),3.67-3.68(m,6h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.53-3.58(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),3.01-3.68(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.61-2.70(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.26-2.33(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.12-1.46(m,12h,otherch2ofdecanedioylpart),0.91-0.92(d,j＝6.0hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.4(c＝o),171.5(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),147.8(tetrahydroisoquinoline),147.7(tetrahydroisoquinoline),147.5(c-3’),134.3(c-3),126.9(tetrahydroisoquinoline),125.8(tetrahydroisoquinoline),123.7(c-1’),123.0(c-6’),115.5(c-5’),113.5(c-2’),112.2(tetrahydroisoquinoline),110.4(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.3(c-1”’),98.9(c-6),93.3(c-8),76.9(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),70.9(c-2”’),70.8(c-4”),70.6(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.5(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.8(c-b),56.0(-och3),46.7(tetrahydroisoquinoline),43.7(tetrahydroisoquinoline),43.2(tetrahydroisoquinoline),33.9((ch2)n),32.9((ch2)n),29.2((ch2)n),29.1((ch2)n),28.9((ch2)n),27.9((ch2)n),25.2((ch2)n),24.9((ch2)n),18.1(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1730cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1125(m+na)⁺.

實施例2-5

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁戊二酰乙烯酯190mg(0.22mmol)、6-甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉359mg(2.20mmol)，[toma][tf2n](n-己基吡啶雙三氟甲磺酰亞胺鹽)20ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應30h。乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后，柱層析分離得到產品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)，得到含甲氧基四氫異喹啉的曲克蘆丁酰胺衍生物。淡黃色固體產物155mg，產率為71％。

yellowsolid,rf＝0.13,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):¹hnmr(400mhz,dmso-d6,δppm):7.81-7.83(m,1h,h2’),7.65-7.71(m,1h,h6’),7.00-7.10(m,2h,1hofh5’,1hoftetrahydroisoquinoline),6.61-6.74(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.34(s,1h,h6),5.32-5.38(m,1h,h1”),4.41-4.54(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.31-4.41(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.23-4.28(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),3.99-4.13(m,4h,hofa),3.68-3.82(m,4h,hofb),3.59-3.68(m,3h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.48-3.59(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.96-3.73(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.66-2.76(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.25-2.45(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.66-1.86(m,2h,otherch2ofglutarylpart),0.90(s,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.3(c＝o),170.9(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),158.1(tetrahydroisoquinoline),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),147.5(c-3’),136.3(tetrahydroisoquinoline),134.2(c-3),127.9(tetrahydroisoquinoline),126.1(tetrahydroisoquinoline),123.4(c-1’),122.8(c-6’),115.4(c-5’),113.7(c-2’),113.4(tetrahydroisoquinoline),112.9(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.3(c-1”’),98.8(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),71.0(c-2”’),70.8(c-4”),70.6(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.7(c-b),55.4(-och3),46.2(tetrahydroisoquinoline),43.4(tetrahydroisoquinoline),42.8(tetrahydroisoquinoline),33.3((ch2)n),32.0((ch2)n),29.5((ch2)n),18.2(c-6”’)；ir(kbr):3367cm^-1(oh),1728cm^-1(o＝c-o),1653cm^-1(o＝c-n),1455cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1024.8(m+na)⁺.

實施例2-6

在50ml錐形瓶中加入曲克蘆丁壬二酰乙烯酯202.8mg(0.22mmol)、6-甲氧基-1,2,3,4-四氫異喹啉359mg(2.20mmol)，[hpy]bf4(n-正己基吡啶四氟硼酸鹽)20ml，60℃空氣浴振蕩器中、150rpm恒溫振蕩，反應36h。乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后，柱層析分離得到產品，洗脫劑為乙酸乙酯/甲醇/水(20/3/1,v/v)。淡黃色固體產物170mg，產率為73％。

yellowsolid,rf＝0.18,¹hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o,δppm):¹hnmr(400mhz,dmso-d6,δppm):7.82(s,1h,h2’),7.64-7.71(m,1h,h6’),6.99-7.09(m,2h,1hofh5’,1hoftetrahydroisoquinoline),6.64-6.71(m,3h,1hofh8,2hoftetrahydroisoquinoline),6.33(s,1h,h6),5.30-5.35(m,1h,h1”),4.41-4.45(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),4.32-4.40(m,3h,2hofaacylated,1hofbacylated),4.20-4.29(m,2h,1hofh1”’,1hofbacylated),4.04-4.10(m,4h,hofa),3.68-3.80(m,4h,hofb),3.62-3.68(m,3h,hoftetrahydroisoquinoline-och3),3.48-3.59(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.99-3.66(m,10h,hofrhamnoglucosyl),2.62-2.77(m,2h,hoftetrahydroisoquinoline),2.22-2.26(m,4h,2hofch2co-troxerutin,2hofch2co-tetrahydroisoquinoline),1.02-1.52(m,10h,otherch2ofazelaoylpart),0.89-0.91(d,j＝5.9hz,3h,ch3ofrhamnosyl)；¹³cnmr(dmso-d6):177.9(c-4),173.4(c＝o),171.5(c＝o),165.1(c-7),161.3(c-9),158.1(tetrahydroisoquinoline),156.9(c-5),151.5(c-2),150.8(c-4’),147.5(c-3’),136.3(tetrahydroisoquinoline),134.2(c-3),127.8(tetrahydroisoquinoline),126.2(tetrahydroisoquinoline),123.7(c-1’),122.8(c-6’),115.4(c-5’),113.5(c-2’),113.5(tetrahydroisoquinoline),112.9(tetrahydroisoquinoline),105.5(c-10),101.9(c-1”),101.3(c-1”’),98.8(c-6),93.3(c-8),76.8(c-3”),76.4(c-5”),74.6(c-2”),72.2(c-4”’),71.1(c-3”’),70.9(c-2”’),70.8(c-4”),70.6(c-a),70.6(c-a),68.7(c-5”’),67.4(c-6”),67.2(c-a),62.8(c-b),60.0(c-b),59.8(c-b),55.4(-och3),46.4(tetrahydroisoquinoline),43.4(tetrahydroisoquinoline),42.9(tetrahydroisoquinoline),33.8((ch2)n),32.9((ch2)n),29.6((ch2)n),29.0((ch2)n),28.8((ch2)n),25.2((ch2)n),24.8((ch2)n),18.2(c-6”’)；ir(kbr):3369cm^-1(oh),1730cm^-1(o＝c-o),1655cm^-1(o＝c-n),1452cm^-1(c-n)；esi-ms(m/z):1080.8(m+na)⁺.

生物活性測試：采用mtt法測定了曲克蘆丁及化合物(ⅰ)和(ⅱ)對ht-29(人結腸癌細胞),mcf-7(人乳腺癌細胞)的細胞毒活性。

部分測試結果如下表：

以上數據顯示了化合物(ⅰ)和(ⅱ)對ht-29、mcf-7有明顯的抑制作用，優于曲克蘆丁，可將其作為抗結腸癌和乳腺癌潛在藥物開發。