本發明屬于食品加工領域，涉及一種香菇多糖的提取方法，具體涉及一種超微粉粹處理協同微波高壓提取香菇多糖的提取方法。
背景技術：
香菇(Lentinus edodes)屬于擔子菌綱，傘菌目，側耳科，又稱香蕈、冬菰、花茹等，是世界上第二大食用菌種，其營養豐富，味道鮮美，具有很高的藥用價值，是一種藥食兩用真菌，被譽為“山珍之王”，“植物性食品的頂峰”，“天然的保健食品”，是人類理想的食品。香菇主要成份有香菇多糖(Leniinan)、香菇嘿吟(Eriadenine)、核苷酸、蛋白質、多種礦物質及膳食纖維素等。
香菇多糖(Leniinan,簡稱LNT)是從香菇的子實體中分離純化得到的高分子葡聚糖，是一種重要的生物反應調節劑，有很高的藥用價值，具有抗腫瘤、抗病毒、調節免疫功能和刺激干擾素形成等功能。80年代開始將其作為生物反應調節劑應用于臨床，其可增加天然殺傷細胞(NK細胞)活性和淋巴因子激活的殺傷細胞(LAK細胞)的產生，并能恢復和提高宿主細胞對淋巴因子、激素及其它生理活性因子的反應性，從而增強機體免疫力，提高抗腫瘤效果。目前，香菇多糖已經作為提高免疫力、抗腫瘤、抗病毒、抗輻射等的輔助治療方法廣泛應用于人的臨床治療。
香菇多糖的提取方法主要有熱水提取、稀酸提取、稀堿提取、酶解提取等，隨著對香菇研究的不斷深入和現代高新技術不斷涌現，又出現超聲波提取、微波輔助提取、超濾提取、發酵提取、加壓溶劑提取等。傳統的提取方法是熱水提取，此法時間長、提取率低，從而導致成本高，但是此法很容易把香菇里面的溶于水的蛋白質等大分子也提取出來，這樣提取液溶于腐敗變質，對保存要求條件高，為后續的分離純化增加困難。
技術實現要素：
有鑒于此，本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種簡單、高效的提取香菇多糖的方法，該方法簡單、快速、高效，不會對多糖結構造成影響，并且超微粉碎后，提取的香菇多糖有效成分含量更高，活性更高、提取率更高。
為達到上述目的，本發明采用以下技術方案：
一種香菇多糖的提取方法，包括以下步驟：
(1)粗粉碎，將干香菇經中藥粉碎機粗粉碎得40-60目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：將步驟(1)所得香菇粗粉進行超微粉碎，得到800-1000目的香菇超細粉；
(3)高壓協同微波法提取：將步驟(2)所得香菇超細粉加入去離子水，在壓力0.12-0.15mpa，溫度110-121℃，協同微波法提取1-2h，得提取液；
(4)抽濾、濃縮：將步驟(3)所得提取液經抽濾，減壓濃縮至原體積的1/3-1/4；
(5)將步驟(4)所得濃縮液經醇沉、干燥得香菇多糖。
進一步地，步驟(1)中所述粗粉碎是將干香菇置于中藥粉碎機中進行粗粉碎，轉速為2000-3000r/min，粉碎10-15min。
進一步地，步驟(2)中，所述超微粉碎是將粗粉碎的香菇粗粉置于超微粉碎機中，進行超微粉碎，轉速5000-6000r/min，粉碎時間20-30min。
進一步地，步驟(3)中，所述香菇超細粉/去離子水料液比1:20-1:30(g/ml)，微波提取的功率250w-300w。
進一步地，步驟(5)中，所述醇沉、干燥，具體為加入4倍于濃縮液體積的95％乙醇，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后離心，去除上清液，沉淀經真空冷凍干燥得到香菇多糖。
本發明的有益效果是：
1、本發明的提取工藝將超微粉碎技術和協同微波高壓提取法相結合，物料經超微粉碎使其細胞破壁，且對物料中原有的功效成分破壞小，使其最大限度的保留物料中功效成分的活性，同時超微粉碎后的物料比表面積增大，使其溶解性增大，提高了功效成分的提取率。協同微波高壓提取法，微波提取通過電磁波感應轉化成分子的動能，可以破壞細胞結構，加速功效物質的溶出，具有快速、高效、安全的特點；高壓提取是將物料的組織細胞結構破壞解體，使細胞內的功效成分與溶解介質充分接觸而溶出。微波協同高壓提取法綜合了2種提取法的優點，其特點是縮短提取時間、提高提取率、降低成本。
2、本發明采用超微粉碎處理協同微波高壓提取香菇多糖的工藝，比傳統的熱水浸提法提取香菇多糖提取時間短、提取率高、功效成分活性高，且生產成本低、節能降耗、操作簡便。獲得的粗香菇多糖中，香菇多糖的純度高。
具體實施方式
實施例1
一種香菇多糖的提取方法，包括以下步驟：
(1)粗粉碎，將干香菇置于中藥粉碎機中進行粗粉碎，粉碎機轉速為2000r/min，粉碎10min，得40目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：將步驟1)所得香菇粗粉置于超微粉碎機中，進行超微粉碎，轉速5000r/min，粉碎時間20min得到800目的香菇超細粉；
(3)高壓協同微波法提取：取香菇超細粉加入去離子水，在壓力0.12mpa，溫度110℃，協同微波法提取1h，微波提取的功率250w，得提取液；所述香菇超細粉/去離子水料液比1:20(g/ml)；
(4)抽濾、濃縮：將步驟3)所得提取液經抽濾，減壓濃縮至原體積的1/3；
(5)將步驟4)所得濃縮液，加入4倍于濃縮液體積的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后離心，去除上清液，沉淀，經真空冷凍、干燥、得到香菇多糖。
實施例2
一種香菇多糖的提取方法，包括以下步驟：
(1)粗粉碎，將干香菇置于中藥粉碎機中進行粗粉碎，粉碎機轉速為3000r/min，粉碎15min，得60目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：將步驟1)所得香菇粗粉置于超微粉碎機中，進行超微粉碎，轉速6000r/min，粉碎時間30min得到1000目的香菇超細粉；
(3)高壓協同微波法提取：取香菇超細粉加入去離子水，在壓力0.15mpa，溫度121℃，協同微波法提取2h，微波提取的功率300w，得提取液；所述香菇超細粉/去離子水料液比1:30(g/ml)；
(4)抽濾、濃縮：將步驟3)所得提取液經抽濾，減壓濃縮至原體積的1/4；
(5)將步驟4)所得濃縮液，加入4倍于濃縮液體積的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后離心，去除上清液，沉淀、經真空冷凍干燥得到香菇多糖。
實施例3
一種香菇多糖的提取方法，包括以下步驟：
(1)粗粉碎，將干香菇置于中藥粉碎機中進行粗粉碎，粉碎機轉速為2500r/min，粉碎12min，得50目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：將步驟1)所得香菇粗粉置于超微粉碎機中，進行超微粉碎，轉速5500r/min，粉碎時間25min得到900目的香菇超細粉；
(3)高壓協同微波法提取：取香菇超細粉加入去離子水，在壓力0.13mpa，溫度115℃，協同微波法提取1.5h，微波提取的功率280w，得提取液；香菇超細粉/去離子水料液比1:25(g/ml)；
(4)抽濾、濃縮：將步驟3)所得提取液經抽濾，減壓濃縮至原體積的1/3；
(5)將步驟4)所得濃縮液，加入4倍于濃縮液體積的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后離心，去除上清液，沉淀經真空冷凍干燥得到香菇多糖。
實施例4
一種香菇多糖的提取方法，包括以下步驟：
(1)粗粉碎，將干香菇置于中藥粉碎機中進行粗粉碎，粉碎機轉速為2200r/min，粉碎12min，得45目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：將步驟1)所得香菇粗粉置于超微粉碎機中，進行超微粉碎，轉速5400r/min，粉碎時間24min得到850目的香菇超細粉；
(3)高壓協同微波法提取：取香菇超細粉加入去離子水，在壓力0.14mpa，溫度114℃，協同微波法提取1.2h，微波提取的功率260w，得提取液；所述香菇超細粉/去離子水料液比1:24(g/ml)；
(4)抽濾、濃縮：將步驟3)所得提取液經抽濾，減壓濃縮至原體積的1/3-1/4；
(5)將步驟4)所得濃縮液，加入4倍于濃縮液體積的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后離心，去除上清液，沉淀經真空冷凍干燥得到香菇多糖。
實施例5
一種香菇多糖的提取方法，包括以下步驟：
(1)粗粉碎，將干香菇置于中藥粉碎機中進行粗粉碎，粉碎機轉速為2400r/min，粉碎13min，得48目的香菇粗粉；
(2)超微粉碎：將步驟1)所得香菇粗粉置于超微粉碎機中，進行超微粉碎，轉速5400r/min，粉碎時間24min得到840目的香菇超細粉；
(3)高壓協同微波法提取：取香菇超細粉加入去離子水，在壓力0.14mpa，溫度120℃，協同微波法提取1.6h，微波提取的功率270w，得提取液；所述香菇超細粉/去離子水料液比1:26(g/ml)；
(4)抽濾、濃縮：將步驟3)所得提取液經抽濾，減壓濃縮至原體積的1/3；
(5)將步驟4)所得濃縮液，加入4倍于濃縮液體積的95％乙醇中，置于4℃冰箱中，醇析12h，然后離心，去除上清液，沉淀經真空冷凍干燥得到香菇多糖。
對照組：
采用傳統的熱水提取法提取香菇多糖，主要操作為：準確稱取干香菇500g，放于中藥粉碎機中粉碎10min，按料液比1:20加入去離子水，在溫度80℃水浴鍋中恒溫提取2h，提取液經抽濾、濃縮、醇沉、干燥等處理后得粗多糖，再經烘干、稱重。
表1.香菇多糖的提取率及其純度
其他方法提取香菇多糖的同時會對多糖產生降解作用，研究發現，長時間的高溫提取等會對對香菇多糖的結構造成破壞，導致香菇多糖的結構的變化，從而使得香菇多糖的活性降低，研究數據表明本發明中香菇多糖中的純香菇多糖的含量在80-95％之間，遠遠高于現有提取方法所獲得的粗多糖中純香菇多糖的含量。
通過上表可以明顯看出，本發明的方法提取多糖的提取率明顯高于對照組，這說明，此方法提取香菇多糖具有時間短、提取率高、節約成本等特點。
最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非限制，本領域普通技術人員對本發明的技術方案所做的其他修改或者等同替換，只要不脫離本發明技術方案的精神和范圍，均應涵蓋在本發明的權利要求范圍當中。