本發明涉及毛發生長技術領域，具體是一種毛囊干細胞的移植方法。
背景技術：
生產毛發的毛囊組織借助稱作毛乳頭的特殊的間充質與表皮的相互作用形成。認為毛乳頭與作為毛發生長、停止周期的毛發周期的進行關系也很密切。由于男性激素濃度或血液循環的惡化等種種的原因，該毛發周期發生變化，故產生男性型的脫毛癥。在男性型脫毛癥后期，由于生發治療藥等的效果低，并且毛乳頭密度也變得疏松，故要求采用細胞移植增加毛囊組織數的治療技術。
迄今的治療技術中，報道了切除脫毛癥發病部位皮膚后，將頭部或側頭部有健康頭發的頭皮組織其本身植皮到脫毛癥部位上。使脫毛癥部位的面積減少的方法，還報道了從健康的頭皮外科分離毛囊后移植到脫毛癥發病部位的方法，提高了治療效果。然而，任何一種方法雖然可以實現脫毛癥部位的面積縮小，但毛囊數或毛發的總數不得不減少或與現狀相同。這是由于只是使健康的毛囊移到脫發部位。因此治療涉及寬范圍的脫毛癥的場合必須移皮形成更寬范圍的正常頭皮，或切除后成為毛囊供給的供體組織。所以按照所利用的正常皮膚的面積，預先在皮下組織中插入擴張器，慢慢地使皮膚伸長，或必須分幾次手術等待皮膚的伸長，雖然是自體組織移植，但與肝臟或心臟移植之類的臟器移植同樣地存在頭皮組織供體不足的現狀。此外，要求非常高的外科技術和采用手工作業進行組織的分離。這樣的外科方法傷害性非常高，對患者來講是強迫非常大的痛苦和負擔的方法。而另一方面，作為有效的唯一的根本的治療法是利用健康性質的毛囊覆蓋脫毛癥發病部位，可以得到即使處于種種脫毛癥發病的主要因素中也難于脫發的頭發。
鑒于這些的現狀，考慮通過由極小的組織中分離患者自體細胞進行培養增殖，然后作為材料構筑毛囊，增加移植用毛囊的方法。由于毛囊由患者自己的細胞形成，故原理上不發生免疫排斥，并且由于呈現極高的生物體親和性故也不引起異物應答，迅速地完成移植組織的修復。因此，不需要如人造毛發移植一樣地經數天到數周實現人造毛發周圍上皮化而使患者蒙受高感染癥危害。然而，實際情況是即使將培養增殖的毛乳頭細胞移植到皮膚上生發效率也極低，并且即使長出頭發，頭發的狀態也脆弱，難以說是天然頭發的再生。
為了人工誘導毛囊，必須以胚胎學的知識為基礎，應用組織工程學的方法。胚胎學上如前述那樣，毛囊通過表皮細胞與作為真皮細胞的毛乳頭細胞的相互作用形成。另外，報道了實現該毛囊形成的相互作用可通過將培養毛乳頭細胞與來自新生兒的表皮細胞混合，移植到除去全層皮膚后的筋膜上的實驗來再現。此外，由于業已報道了通過人毛乳頭與動物毛囊的組合形成毛囊的方法，故已知也可應用于人的脫毛癥治療。
由于現有的毛囊干細胞移植技術并不成熟，對于脫發的治療效果也較差，存活率較低，為了改善脫發對于人們的生活產生的不良影響，有效治療脫發，本發明提供一種治療效果好、存活率高的毛囊干細胞的移植方法。
技術實現要素：
本發明的目的在于提供一種毛囊干細胞的移植方法，以解決上述背景技術中提出的問題。
為實現上述目的，本發明提供如下技術方案：
一種毛囊干細胞的移植方法，包括以下步驟：
（1）干細胞的提取：在無菌室中，從人體后腦部表皮中提取毛囊干細胞；
（2）制備干細胞無血清培養基；
（3）培養無血清毛囊干細胞：將步驟（1）的毛囊干細胞放入步驟（2）的干細胞無血清培養基中進行增殖培養，得到培養無血清毛囊干細胞；
（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于180個，每間隔15-45天注射一次。
作為本發明進一步的方案：所述干細胞無血清培養基包括以下組分：堿性成纖維細胞生長因子10-15ng/ml、凝血酶0.01-0.1ng/ml、重組人胰島素1-3mg/ml、人轉鐵蛋白0.05-0.12mg/ml、人血白蛋白0.1-0.2mg/ml、亞硒酸鈉0.1-0.5μg/ml、左旋卡尼丁0.5-1.2mM和丹參素5-10μm。
作為本發明進一步的方案：所述干細胞無血清培養基包括以下組分：堿性成纖維細胞生長因子12ng/ml、凝血酶0.02ng/ml、重組人胰島素2mg/ml、人轉鐵蛋白0.1mg/ml、人血白蛋白0.14mg/ml、亞硒酸鈉0.2μg/ml、左旋卡尼丁1mM和丹參素8μm。
作為本發明進一步的方案：所述步驟（2）的具體步驟為：將堿性成纖維細胞生長因子、凝血酶、重組人胰島素、人轉鐵蛋白、人血白蛋白、亞硒酸鈉、左旋卡尼丁和丹參素混合均勻，加入生理鹽水，即得干細胞無血清培養基。
作為本發明進一步的方案：所述步驟（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于150個，每間隔20-40天注射一次。
作為本發明進一步的方案：所述步驟（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于130個，每間隔30天注射一次。
與現有技術相比，本發明的有益效果是：
該毛囊干細胞的移植方法通過將人毛囊干細胞培養為無血清毛囊干細胞，然后將無血清毛囊干細胞注射到待生發部位，完成毛囊干細胞的移植，毛囊干細胞存活率可達為98%以上；整體技術和方法既合理高效，又簡便實用。
具體實施方式
下面結合具體實施方式對本專利的技術方案作進一步詳細地說明。
實施例1
一種毛囊干細胞的移植方法，包括以下步驟：
（1）干細胞的提取：在無菌室中，從人體后腦部表皮中提取毛囊干細胞；
（2）制備干細胞無血清培養基；
（3）培養無血清毛囊干細胞：將步驟（1）的毛囊干細胞放入步驟（2）的干細胞無血清培養基中進行增殖培養，得到培養無血清毛囊干細胞；
（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次無菌微創注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于180個，每間隔15天注射一次。每個毛囊干細胞可長出3根頭發，每個人平均有3000個毛囊，平均有9000根頭發，每次注射時不要過于密集，不是一片一片注射，而是分散注射。
所述干細胞無血清培養基包括以下組分：堿性成纖維細胞生長因子10ng/ml、凝血酶0.01ng/ml、重組人胰島素1mg/ml、人轉鐵蛋白0.05mg/ml、人血白蛋白0.1mg/ml、亞硒酸鈉0.1μg/ml、左旋卡尼丁0.5mM和丹參素5μm。
所述步驟（2）的具體步驟為：將堿性成纖維細胞生長因子、凝血酶、重組人胰島素、人轉鐵蛋白、人血白蛋白、亞硒酸鈉、左旋卡尼丁和丹參素混合均勻，加入生理鹽水，即得干細胞無血清培養基。
實施例1的毛囊干細胞存活率為98.1%。
實施例2
一種毛囊干細胞的移植方法，包括以下步驟：
（1）干細胞的提取：在無菌室中，從人體后腦部表皮中提取毛囊干細胞；
（2）制備干細胞無血清培養基；
（3）培養無血清毛囊干細胞：將步驟（1）的毛囊干細胞放入步驟（2）的干細胞無血清培養基中進行增殖培養，得到培養無血清毛囊干細胞；
（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次無菌微創注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于180個，每間隔45天注射一次。每個毛囊干細胞可長出3根頭發，每個人平均有3000個毛囊，平均有9000根頭發，每次注射時不要過于密集，不是一片一片注射，而是分散注射。
所述干細胞無血清培養基包括以下組分：堿性成纖維細胞生長因子15ng/ml、凝血酶0.1ng/ml、重組人胰島素3mg/ml、人轉鐵蛋白0.12mg/ml、人血白蛋白0.2mg/ml、亞硒酸鈉0.5μg/ml、左旋卡尼丁1.2mM和丹參素10μm。
所述步驟（2）的具體步驟為：將堿性成纖維細胞生長因子、凝血酶、重組人胰島素、人轉鐵蛋白、人血白蛋白、亞硒酸鈉、左旋卡尼丁和丹參素混合均勻，加入生理鹽水，即得干細胞無血清培養基。
實施例2的毛囊干細胞存活率為98.3%。
實施例3
一種毛囊干細胞的移植方法，包括以下步驟：
（1）干細胞的提取：在無菌室中，從人體后腦部表皮中提取毛囊干細胞；
（2）制備干細胞無血清培養基；
（3）培養無血清毛囊干細胞：將步驟（1）的毛囊干細胞放入步驟（2）的干細胞無血清培養基中進行增殖培養，得到培養無血清毛囊干細胞；
（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次無菌微創注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于150個，每間隔25天注射一次。每個毛囊干細胞可長出3根頭發，每個人平均有3000個毛囊，平均有9000根頭發，每次注射時不要過于密集，不是一片一片注射，而是分散注射。
所述干細胞無血清培養基包括以下組分：堿性成纖維細胞生長因子12ng/ml、凝血酶0.02ng/ml、重組人胰島素2mg/ml、人轉鐵蛋白0.1mg/ml、人血白蛋白0.14mg/ml、亞硒酸鈉0.2μg/ml、左旋卡尼丁1mM和丹參素8μm。
所述步驟（2）的具體步驟為：將堿性成纖維細胞生長因子、凝血酶、重組人胰島素、人轉鐵蛋白、人血白蛋白、亞硒酸鈉、左旋卡尼丁和丹參素混合均勻，加入生理鹽水，即得干細胞無血清培養基。
實施例3的毛囊干細胞存活率為98.9%。
實施例4
一種毛囊干細胞的移植方法，包括以下步驟：
（1）干細胞的提取：在無菌室中，從人體后腦部表皮中提取毛囊干細胞；
（2）制備干細胞無血清培養基；
（3）培養無血清毛囊干細胞：將步驟（1）的毛囊干細胞放入步驟（2）的干細胞無血清培養基中進行增殖培養，得到培養無血清毛囊干細胞；
（4）根據待生發面積，利用步驟（3）所得無血清毛囊干細胞多次無菌微創注射到待生發部位；采用分散注射，每次注射點少于130個，每間隔30天注射一次。每個毛囊干細胞可長出3根頭發，每個人平均有3000個毛囊，平均有9000根頭發，每次注射時不要過于密集，不是一片一片注射，而是分散注射。
所述干細胞無血清培養基包括以下組分：堿性成纖維細胞生長因子11ng/ml、凝血酶0.06ng/ml、重組人胰島素1.8mg/ml、人轉鐵蛋白0.08mg/ml、人血白蛋白0.16mg/ml、亞硒酸鈉0.4μg/ml、左旋卡尼丁0.9mM和丹參素7μm。
所述步驟（2）的具體步驟為：將堿性成纖維細胞生長因子、凝血酶、重組人胰島素、人轉鐵蛋白、人血白蛋白、亞硒酸鈉、左旋卡尼丁和丹參素混合均勻，加入生理鹽水，即得干細胞無血清培養基。
實施例4的毛囊干細胞存活率為98.4%。
該毛囊干細胞的移植方法通過將人毛囊干細胞培養為無血清毛囊干細胞，然后將無血清毛囊干細胞注射到待生發部位，完成毛囊干細胞的移植，且毛囊干細胞存活率可達為98%以上；整體技術和方法既合理高效，又簡便實用。
上面對本專利的較佳實施方式作了詳細說明，但是本專利并不限于上述實施方式，在本領域的普通技術人員所具備的知識范圍內，還可以在不脫離本專利宗旨的前提下做出各種變化。