細胞間接共培養裝置的制作方法

本實用新型屬于醫學實驗領域，尤其是涉及一種細胞間接共培養裝置。

背景技術：

實體腫瘤不僅包含腫瘤細胞還包含多種類型腫瘤間質細胞。腫瘤細胞與腫瘤間質細胞之間的相互作用關系是腫瘤發生、進展和抗腫瘤藥物研究的重點。腫瘤細胞和間質細胞各自分泌細胞因子、外泌體和其他可溶性物質相互促進，共同推動腫瘤進展。然而，如何獨立實時的研究腫瘤細胞和間質細胞相互作用關系是個難題。

目前基于共培養裝置的應用為腫瘤-間質細胞相互作用關系研究提供理想平臺。基于共培養的裝置各種各樣，最為典型的就是transwell小室模型，一種細胞種植在小室上層，一種細胞種植在小室下層，中間通過一層不同孔徑的膜隔開，膜的表面還可以鋪一層基質膠模擬生物基質的結構。但是，這個模型并不是最佳模型，因為它是一個靜態培養模式，靜態模式不利于上下兩個小室的培養上清的交換，并不能真正的模擬體內循環的內環境。

技術實現要素：

本實用新型的目的在于提供細胞間接共培養裝置，能夠解決上述問題中的至少一個。

根據本實用新型的一個方面，提供了細胞間接共培養裝置，其包括第一儲液瓶、蠕動泵、第一培養室、第二培養室和第二儲液瓶。蠕動泵的一端與第一儲液瓶通過入口管路連接，蠕動泵的另一端連接到并列設置的第一連接管和第二連接管的入口端上，第一培養室設置于第一連接管上，第二培養室設置于第二連接管上；并列設置的第一連接管和第二連接管的出口端匯集到一起后通過出口管路連接到第二儲液瓶上；第一培養室和第二培養室內均設有微孔濾膜，微孔濾膜將第一培養室和第二培養室均分隔成兩部分，第一培養室和第二培養室內均設有培養細胞的培養基，微孔濾膜的孔徑能夠阻隔細胞直接通過，又能允許細胞分泌的囊泡外泌體通過。

其有益效果是，第一培養室、第二培養室被微孔濾膜隔開后，相當于具有四個相對獨立的區域，在這四個相對獨立的區域內，同一培養室內的兩個獨立區域分別放置不同的細胞，一個放置腫瘤細胞，一個放置腫瘤間質細胞，兩個培養室內的細胞可以同向放置，也可以反向放置，方便進行橫向比較或者縱向比較。當培養液從第一培養室流向第二培養室后，第一培養室的細胞分泌外泌體、因子等到第二培養室直接作用于第二培養室的細胞，形成一個間接共培養的自動裝置，方便進行細胞與細胞相互作用關系的研究。同時，通過蠕動泵的工作，從而在第一培養室、第二培養室內形成一個動態的培養模式，定時定量地更換兩室的培養基，從而可以模擬體內體液循環的內環境。

同時，設置微孔濾膜后，既可以阻隔腫瘤細胞或者腫瘤間質細胞直接通過，相互混合；同時又可以允許細胞分泌的囊泡外泌體通過，從而達到間接共培養的效果。

在一些實施方式當中，微孔濾膜的孔徑為0.22μm。其有益效果是，孔徑為0.22μm時，剛好可以阻隔細胞通過，但是可以允許細胞分泌的囊泡外泌體通過，從而可以模擬真實的環境。

在一些實施方式當中，蠕動泵的出口端上設有壓力表。其有益效果是，通過設置壓力表后，可以實時的測量到整個培養裝置的內部壓力情況，防止出現壓力過大的情況，當壓力過大時，可以相應的調節蠕動泵的工作速度，從而調節內部壓力的大小。

在一些實施方式當中，入口管路上設有過濾器和單向閥。其有益效果是，設置過濾器可以防止培養基當中帶入的雜質進入到第一培養室和第二培養室當中。

在一些實施方式當中，入口管路上設有氧合器。其有益效果是，設置氧合器，可以有效的除去循環過程當中產生的二氧化碳，同時將二氧化碳轉換成氧氣，供給兩個培養室當中的細胞，保證細胞的正常生長。

在一些實施方式當中，第一培養室和第二培養室的液體流向后方均設有取樣孔。其有益效果是，設置取樣孔后，方便提取相應的液體進行實驗或者檢測。

在一些實施方式當中，出口管路上設有調壓閥。其有益效果是，通過調壓閥的調節，可以相應的調節整個培養裝置內部的壓力大小，保證培養過程的順利進行。

在一些實施方式當中，第一培養室和第二培養室為底座上內陷出的兩個橢圓形凹槽，凹槽的底部設有培養基進出口，凹槽的頂部設有頂蓋。其有益效果是，做成橢圓形而不是方形，是為了防止培養基更新的死角，方形有些地方會產生渦流，因為渦流的原因無法達到是前一個獨立區域內的培養基上清(即細胞分泌的囊泡外泌體)都能更新并流到下一個獨立區域的目的。培養基進出口可以方便的進行加入或排出培養基的操作。頂蓋可以設置成可開啟的，通過開啟頂蓋，可以方便的進行細胞的鋪板、消化傳代等操作。

在一些實施方式當中，第一儲液瓶上還設有加料孔。其有益效果是，可以方便向第一儲液瓶內添加液體培養基。

附圖說明

圖1是本實用新型實施方式的細胞間接共培養裝置的結構原理圖；

圖2是本實用新型實施方式的細胞間接共培養裝置的第一培養室的結構原理圖。

具體實施方式

下面結合附圖1至2對本實用新型作進一步詳細的說明。

如圖1所示，本實用新型的實施方式的細胞間接共培養裝置，其包括第一儲液瓶1、蠕動泵2、第一培養室3、第二培養室4和第二儲液瓶5。蠕動泵2的一端與第一儲液瓶1通過入口管路6連接，蠕動泵2的另一端連接到并列設置的第一連接管7和第二連接管8的入口端上，第一培養室3設置于第一連接管7上，第二培養室4設置于第二連接管8上；并列設置的第一連接管7和第二連接管8的出口端匯集到一起后通過出口管路9連接到第二儲液瓶5上；第一培養室3和第二培養室4內均設有微孔濾膜10，微孔濾膜10將第一培養室3和第二培養室4均分隔成兩部分，第一培養室3和第二培養室4內均設有培養細胞的培養基，微孔濾膜10的孔徑能夠阻隔細胞直接通過，又能允許細胞分泌的囊泡外泌體通過。

第一培養室3、第二培養室4被微孔濾膜10隔開后，相當于具有四個相對獨立的區域，在這四個相對獨立的區域內，同一培養室內的兩個獨立區域分別放置不同的細胞，一個放置腫瘤細胞，一個放置腫瘤間質細胞，兩個培養室內的細胞可以同向放置，也可以反向放置，方便進行橫向比較或者縱向比較。同時，通過蠕動泵2的工作，使得第一儲液瓶1當中的培養基不斷向第二儲液瓶5流動，在運動的過程當中，會通過第一培養室3、第二培養室4，從而在第一培養室3、第二培養室4內形成一個動態的培養模式，從而可以真正的模擬體內循環的內環境。

同時，設置微孔濾膜10后，既可以阻隔腫瘤細胞或者腫瘤間質細胞直接通過，相互混合；同時又可以允許細胞分泌的囊泡外泌體通過，從而達到模擬的效果。

本實用新型當中的微孔濾膜10的孔徑為0.22μm。孔徑為0.22μm時，剛好可以阻隔細胞通過，但是可以允許細胞分泌的囊泡外泌體通過，從而可以模擬真實的環境。在蠕動泵2的出口端上設有壓力表11。通過設置壓力表11后，可以實時的測量到整個培養裝置的內部壓力情況，防止出現壓力過大的情況，當壓力過大時，可以相應的調節蠕動泵2的工作速度，從而調節內部壓力的大小。

同時，在入口管路6上設有過濾器12和單向閥13。設置過濾器12可以防止培養基當中帶入的雜質進入到第一培養室3和第二培養室4當中。在入口管路6上設有氧合器14。設置氧合器14，可以有效的除去循環過程當中產生的二氧化碳，同時將二氧化碳轉換成氧氣，供給兩個培養室當中的細胞，保證細胞的正常生長。

在第一培養室3和第二培養室4的液體流向后方均設有取樣孔15。設置取樣孔15后，方便提取相應的液體進行實驗或者檢測。在出口管路9上設有調壓閥16。其有益效果是，通過調壓閥16的調節，可以相應的調節整個培養裝置內部的壓力大小，保證培養過程的順利進行。同時，第一儲液瓶1上還設有加料孔20。可以方便向第一儲液瓶1內添加液體培養基。

在本實用新型當中，第一培養室3和第二培養室4為底座上內陷出的兩個橢圓形凹槽17，如圖2所示，凹槽的底部設有培養基進出口18，凹槽的頂部設有頂蓋19。做成橢圓形而不是方形，是為了防止培養基更新的死角，方形有些地方會產生渦流，因為渦流的原因無法達到是前一個獨立區域內的培養基上清即細胞分泌的囊泡外泌體都能更新并流到下一個獨立區域的目的。培養基進出口18可以方便的進行加入或排出培養基的操作。頂蓋19可以設置成可開啟的，通過開啟頂蓋19，可以方便的進行細胞的鋪板、消化傳代等操作。

以上的僅是本實用新型的優選實施方式，應當指出，對于本領域的普通技術人員來說，在不脫離本實用新型創造構思的前提下，還可以做出若干變形和改進，這些都屬于本實用新型的保護范圍。