本申請涉及煙草添加劑領域，具體講，涉及一種水果香味提取物的制備方法及其應用。
背景技術：
卷煙增香保潤是促進中式卷煙持續健康發展的關鍵技術，對于提升中式卷煙品質、增強市場競爭力具有重要意義。改善卷煙產品的香氣特性和舒適性，凸顯品牌風格，一直以來是卷煙制造業孜孜以求的努力方向。在報道的研究中，大多水果類提取物都是較好的煙用香精香料的香原料，將其添加到卷煙煙絲中可以起到增甜、增香的效果，但會帶來刺激、殘留及煙氣粗糙等不利效應。
為此，特提出本申請。
技術實現要素：
本申請的首要發明目的在于提出一種水果香味提取物的制備方法。
本申請的第二發明目的在于提出該制備方法的應用。
為了完成本申請的目的，采用的技術方案為：
本申請涉及一種水果香味提取物的制備方法，所述制備方法制備包括以下步驟：
(1)將水果原料粉碎，然后用乙醇回流提取，過濾取濾渣；
(2)在所述濾渣中加入5～10倍重量的水，然后再加入復合酶進行水解，所述復合酶中含有蛋白酶和糖類水解酶，所述糖類水解酶選自纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶、葡聚糖酶中的至少一種，蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：15～60；
(3)將水解產物經提純和濃縮即得所述植物果實香味提取物。
優選的，所述水果原料為脫水水果或脂類的質量百分含量大于0.25％的新鮮水果；優選的，所述脫水水果選自桑葚干，所述新鮮水果選自沙棘果。
優選的，所述復合酶中含有蛋白酶、果膠酶和葡萄糖苷酶；優選的，蛋白酶和果膠酶的質量比為1：1～8。
優選的，所述復合酶中還含有纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種，優選的，纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種與蛋白酶的質量比為2.5～4：1。
優選的，在步驟(1)中，所述回流提取為采用乙醇回流提取2～8小時，乙醇的體積百分比濃度為10％～95％。
優選的，在步驟(2)中，所述復合酶的添加量為粉碎后水果原料的干物質重量的0.01％～1.5％。
優選的，在步驟(2)中，所述水解時的溫度為30～80℃，所述水解的時間為2～48小時。
優選的，在步驟(3)中，所述提純的方法為醇沉，優選的，醇沉的條件為：將水解后的產物過濾得濾液，加入所述濾液體積1～6倍的乙醇，然后在-10℃～5℃溫度下靜置8～24小時，其中，乙醇的體積百分比濃度為10％～95％。
優選的，在步驟(3)中，所述濃縮的方法為減壓濃縮，優選的，減壓濃縮的壓力為-0.1～-0.08MPa，減壓濃縮時的溫度為38～47℃。
本申請還涉及上述方法制備得到的水果香味提取物在卷煙中的應用，優選的，所述水果香味提取物添加于煙絲、卷煙紙、濾棒中的至少一種；更優選的，所述水果香味提取物添加于煙絲中時的質量百分比含量為0.01％～0.5％，所述水果香味提取物添加于卷煙紙時的質量百分比含量為0.05％～1.0％，所述水果香味提取物添加于濾棒時的質量百分比含量為0.02％～2％。
本申請的技術方案至少具有以下有益的效果：
本申請通過采用特定的生物酶對水果進行酶解，充分發揮酶的專一、高效、溫和及活性可調節等性能，從而可達到破壁、提質及除雜的效果，有效地快速破壁、促進大分子物質轉化并祛除雜質，可提高提取物的純度和產率。
本申請在酶解前采用乙醇回流除去了水果中的脂類物質，如水果表面的果蠟、水果內所含的脂類物質等。由于果蠟和油脂在燃燒過程會釋放出刺激性氣味，因此，本申請通過先乙醇回流再酶解的工藝可進一步提高其應用于香煙后的綜合指標。
本申請的制備方法制備得到的水果香味提取物可豐富煙香，增加甜感，并卷煙感官保潤，采用《卷煙感官舒適性評價方法》(YC/T 496-2014)規定的方法及指標進行評價，采用本申請制備方法制備得到的水果香味提取物添加于香煙后，其綜合評價指標良好。
本申請的制備工藝簡單，應用范圍廣，適于大規模推廣使用。
具體實施方式
下面結合具體實施例，進一步闡述本申請。應理解，這些實施例僅用于說明本申請而不用于限制本申請的范圍。
本申請涉及一種水果香味提取物的制備方法，具體講，本申請中的水果可選自脫水水果或脂類的質量百分含量大于0.25％的新鮮水果。本申請中的脫水水果包括自然干制和人工脫水兩類，人工脫水包括熱風干制、微波干制、紅外線及遠紅外線干制、冷凍真空干制等。
脫水水果為原料具有成本低、不受季節控制等優勢。桑椹的營養豐富，并且中醫還認為桑椹具有補益肝腎，滋陰養血，息風的功效。由于桑葚不易保存，因此常制備成脫水水果進行保存。因此在本申請中，脫水水果優選桑葚。
某些水果中的脂類物質含量較為豐富，這些水果往往具有與一般水果不同的風味和功效。本申請的制備方法優選脂類物質的質量百分含量大于0.25％的新鮮水果，這是由于，如果脂類物質含量過低，則其對提取物在用于卷煙后的影響不大，不需要采用本申請的先乙醇回流再酶解的工藝。而當脂類物質的質量百分含量大于0.25％后，如果不將其去除，會大大影響提取物的用于卷煙后的品質，產生刺激性氣味。例如，沙棘果富含多種維生素、有機酸、黃酮及微量元素，具有很高的營養和藥用價值，其脂類物質含量一般為0.26％～2.9％。因此在本申請中，新鮮水果優選沙棘果。
本申請的制備方法制備包括以下步驟：
首先，將水果粉碎，然后用乙醇回流提取，過濾取濾渣；回流提取為采用10％～95％乙醇回流提取2～8小時，從而可除去水果表面的果蠟、水果內所含的脂類物質等。申請采用乙醇回流的方法不僅能提取目標產物，還可以對酶起到滅活的作用。因此，本申請中不再需要專門設置加熱滅酶的步驟，從而簡化了生產工藝。
其次，在濾渣中加入5～10倍重量的水，然后再加入復合酶進行水解；本申請的復合酶中含有蛋白酶和糖類水解酶；在本申請中的糖類水解酶是指將雙糖或者多糖進行水解的酶；具體選自纖維素酶、果膠酶、葡萄糖苷酶、葡聚糖酶中的至少一種；在本申請的復合酶條件下，不僅將水果中的糖類物質如果膠、纖維素、半纖維素、木質素等物質分解，還可將水果中的蛋白質成分水解成多肽及游離氨基酸成分，當水果香味提取物應用于卷煙時，可增加其水果的甜潤感，減少煙氣的焦灼感和粗糙感，降低刺激和殘留。并且由于脂類物質的去除，可使酶解更加充分。
在本申請中，蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：15～60；優選的，蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：16～55。本申請通過實驗研究發現，在本申請比例范圍內的復合酶在水解新鮮水果后，所獲得的水果香味提取物應用于卷煙后可豐富煙香、增加甜感和潤感，使綜合感官感受最佳。
作為本申請制備方法的一種改進，復合酶中含有蛋白酶、果膠酶和葡萄糖苷酶。其中，葡萄糖苷酶是糖苷水解酶大家族中的一大類酶，主要功能為水解葡萄糖苷鍵，釋放出葡萄糖作為產物；果膠酶是指分解果膠質的酶類。
作為本申請制備方法的一種改進，蛋白酶和果膠酶的質量比為1：1～8。
作為本申請制備方法的一種改進，復合酶中還含有纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種，以進一步增加酶解的效果。
作為本申請制備方法的一種改進，纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種與蛋白酶的質量比為2.5～4：1。在該范圍內，可將水果內的糖類物質進一步充分水解，并最大限度保留其香味物質。
作為本申請制備方法的一種改進，復合酶的添加量為粉碎后水果原料的干物質重量的0.01％～1.5％，優選為0.3～1.5％。如果添加量過小則酶解反應不能充分完成，反應不完全，如果添加量過大不僅造成酶原料的浪費，并且，酶本身也是一種蛋白質，添加的蛋白質過多也會影響吸味品質。因此，本申請中對各種酶的含量和比例均進行了深入研究，最終確定本比例可將水果酶解至吸味品質最佳。
作為本申請制備方法的一種改進，水解時的溫度為30～80℃，優選為40～60℃；水解的時間為2～48小時，優選為4～24小時。
最后，本申請將水解產物經提純和濃縮即得水果香味提取物。
作為本申請制備方法的一種改進，提純的方法為醇沉。
作為本申請制備方法的一種改進，醇沉的條件為：將水解后的產物過濾得濾液，加入濾液體積1～6倍的乙醇，然后在-10℃～5℃溫度下靜置8～24小時，其中，乙醇的體積百分比濃度為10％～95％。采用該范圍內的醇沉條件可進一步提高提取物的產率。
作為本申請制備方法的一種改進，濃縮的方法為減壓濃縮。
作為本申請制備方法的一種改進，減壓濃縮的壓力為-0.1～-0.08MPa，減壓濃縮時的溫度為38～47℃。本申請采用了低溫減壓濃縮，從而可最大限度保留提取物的香味。
本申請還涉及該制備方法所制備得到的水果香味提取物在卷煙中的應用。
優選的，水果香味提取物添加于煙絲、卷煙紙、濾棒中的至少一種；水果香味提取物添加于煙絲中，可實現對卷煙感官保潤、豐富煙香、增加甜感，最大限度降低了刺激、殘留，煙氣粗糙等負面效應。水果香味提取物添加于卷煙紙和/或濾棒中時，由于未經與煙絲混合，因此消費者在未點燃香煙前就可嗅到卷煙紙和/或濾棒中的果香，從而增加了消費者的感官體驗。
進一步優選的，水果香味提取物添加于煙絲中時的質量百分比含量為0.01％～0.5％，添加于卷煙紙時的質量百分比含量為0.05％～1.0％，添加于濾棒時的質量百分比含量為0.02％～2％。如果添加量過低，則保潤效果及香煙中的甜香感不足，如果添加量過大，對保潤效果無進一步增強的趨勢，并且還會對香煙的口味帶來一些影響。
下面以桑葚干和新鮮沙棘果為例，詳細描述本申請的技術方案。
本申請涉及一種桑葚提取物的制備方法，包括以下步驟：
首先，將桑葚干粉碎，并過40～50目，加入乙醇回流提取2～8小時；乙醇的體積百分比濃度為10～95％；所加入乙醇的重量為桑葚干粉末的2～5倍；優選的，乙醇的體積百分比濃度為50～70％；提取時間為4～6小時。
其次，在桑葚濾渣中加入5～10倍重量的水，然后再加入復合酶進行水解；復合酶中含有蛋白酶和糖類水解酶；蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：15～60；優選的，蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：20～40。本申請通過實驗研究發現，在本申請比例范圍內的復合酶在水解桑葚后，所獲得的桑葚提取物應用于卷煙后可豐富煙香、增加甜感和潤感，使綜合感官感受最佳。
優選的，復合酶中含有蛋白酶、果膠酶和葡萄糖苷酶。更優選的，蛋白酶和果膠酶的質量比為1：1～8，并進一步優選1：5～8。其中，所使用蛋白酶的酶活為5萬U/g，所采用果膠酶酶活為50U/g，葡萄糖苷酶酶活為10萬U/ml。
優選的，復合酶中還含有纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種，以進一步增加酶解的效果。所使用纖維素酶的酶活為1.5萬U/g，所采用葡聚糖酶的酶活為200U/g。
優選的，纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種與蛋白酶的質量比為2.5～4：1，優選3～4：1。
優選的，復合酶的添加量為粉碎后桑葚干中干物質重量的0.01％～1.0％，優選為0.1～1.0％。
優選的，水解時的溫度為30～60℃，優選為40～50℃；水解的時間為4～24小時，優選為4～6小時。
最后，本申請將水解產物經提純和濃縮即得桑葚提取物。
其中，提純的方法為醇沉，醇沉的條件為：將水解后的產物過濾得濾液，加入濾液體積3～6倍的乙醇，然后在-10℃～5℃溫度下靜置12～24小時，乙醇的體積百分比濃度為90％～95％。
其中，濃縮的方法為減壓濃縮，減壓濃縮的壓力為-0.1～-0.08MPa，減壓濃縮時的溫度為38～47℃，當濃縮液的比重為1.000±0.005g/cm3時，停止濃縮，即得本申請的桑葚提取物。桑葚提取物的產率為粉碎后桑葚中干物質重量的2～5％。
本申請還涉及一種沙棘果提取物的制備方法，包括以下步驟：
首先，將新鮮沙棘果粉碎，加入乙醇回流提取2～8小時；乙醇的體積百分比濃度為10～95％；所加入乙醇的重量為沙棘果干重的2～5倍；優選的，乙醇的體積百分比濃度為40～60％；提取時間為4～6小時。
其次，在沙棘果濾渣中加入5～10倍重量的水，然后再加入復合酶進行水解；復合酶中含有蛋白酶和糖類水解酶；蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：16～60；優選的，蛋白酶與糖類水解酶的質量比為1：16～45。本申請通過實驗研究發現，在本申請比例范圍內的復合酶在水解沙棘果后，所獲得的沙棘果提取物應用于卷煙后可豐富煙香、增加甜感和潤感，使綜合感官感受最佳。
優選的，復合酶中含有蛋白酶、果膠酶和葡萄糖苷酶。更優選的，蛋白酶和果膠酶的質量比為1：1～8，并進一步優選1：1～7。其中，所使用蛋白酶的酶活為5×104U/g，所采用果膠酶酶活為50U/g，葡萄糖苷酶酶活為105U/ml。
優選的，復合酶中還含有纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種，以進一步增加酶解的效果。所使用纖維素酶的酶活為1.5×104U/g，所采用葡聚糖酶的酶活為200U/g。
優選的，纖維素酶和葡聚糖酶中的至少一種與蛋白酶的質量比為2～4：1，優選2～3：1。
優選的，復合酶的添加量為粉碎后沙棘果中干物質重量的0.01％～1.0％，優選為0.1～1.0％。
優選的，水解時的溫度為30～60℃，優選為40～50℃；水解的時間為4～24小時，優選為4～8小時。
最后，本申請將水解產物經提純和濃縮即得沙棘果提取物。
其中，提純的方法為醇沉，醇沉的條件為：將水解后的產物過濾得濾液，加入濾液體積3～6倍的乙醇，然后在-10℃～5℃溫度下靜置12～24小時，乙醇的體積百分比濃度為90％～95％。
其中，濃縮的方法為減壓濃縮，減壓濃縮的壓力為-0.1～-0.08MPa，減壓濃縮時的溫度為38～47℃。當濃縮液的比重為1.000±0.005g/cm3時，停止濃縮，即得本申請的沙棘果提取物。沙棘果提取物的產率為粉碎后沙棘果中干物質重量的2～5％。
除上述公開的沙棘果和桑葚外，本申請的制備工藝還可用于其它水果的提取，限于篇幅不再贅述。
實施例1
(1)將沙棘果風凈后，用粉碎機粉碎至50目，稱取100克沙棘粉末置于250mL圓底燒瓶中，用2倍量的40％乙醇回流提取6小時，過濾后，保留濾渣備用；
(2)在沙棘果濾渣中加入5倍重量的水，然后再加入蛋白酶0.03g、果膠酶0.04g、葡萄糖苷酶1.2g、纖維素酶0.08g后，將圓底燒瓶置于40±1C°水浴鍋中，攪拌反應8小時；所使用蛋白酶的酶活為5×104U/g，果膠酶酶活為50U/g，葡萄糖苷酶酶活為105U/ml，纖維素酶的酶活為1.5×104U/g；
(3)待冷卻后，過濾，取濾液；
(4)加入60g95％乙醇，于-5℃條件下，自然沉降10小時；
(5)過濾，取濾液，將濾液在壓力為-0.09±0.01MPa，溫度為40±2℃條件下進行減壓濃縮，使濃縮液比重達到1.000±0.005g/cm3，即為酶解反應型煙用沙棘提取物A。沙棘提取物的產率為沙棘漿料中干物質重量的4.3％。
實施例2
(1)將沙棘果風凈后，用粉碎機粉碎至60目，稱取100克沙棘果漿置于250mL圓底燒瓶中；用2倍量的60％乙醇回流提取4小時，過濾后，保留濾渣備用；
(2)在沙棘果濾渣中加入10倍重量的水，然后再按100g沙棘果漿中的干物質重加入蛋白酶0.03g、果膠酶0.2g、葡萄糖苷酶0.2g、葡聚糖酶0.08g后，將圓底燒瓶置于50±1C°水浴鍋中，攪拌反應4小時；所使用蛋白酶的酶活為5×104U/g，果膠酶酶活為50U/g，葡萄糖苷酶酶活為105U/ml，葡聚糖酶的酶活為200U/g；
(3)待冷卻后，過濾，取濾液；
(4)加入80g90％乙醇，于-5℃條件下，自然沉降24小時；
(5)過濾，取濾液，將濾液在壓力為-0.10±0.01MPa，溫度為45±2℃條件下進行減壓濃縮，使濃縮液比重達到1.000±0.005g/cm3，即為酶解反應型煙用沙棘提取物B。沙棘提取物的產率為沙棘漿料中干物質重量的4.4％。
實施例3
(1)將桑椹干風凈后，粉碎至40目，稱取100克桑椹粉末置于250mL圓底燒瓶中，用2倍量的50％乙醇回流提取4小時，過濾后，保留濾渣備用；
(2)在桑椹濾渣中加入6倍重量的水，然后再加入蛋白酶0.02g、果膠酶0.15g、葡萄糖苷酶0.24g、葡聚糖酶0.06g后，將圓底燒瓶置于50±1C°水浴鍋中，攪拌反應4小時；所使用蛋白酶的酶活為5×104U/g，果膠酶酶活為50U/g，葡萄糖苷酶酶活為105U/ml，葡聚糖酶的酶活為200U/g；
(3)待冷卻后，過濾，取濾液；
(4)加入80g95％乙醇，于-5℃條件下，自然沉降12小時；
(5)過濾，取濾液，將濾液在壓力為-0.10±0.01MPa，溫度為40±2℃條件下進行減壓濃縮，使濃縮液比重達到1.000±0.005g/cm3，即為酶解反應型煙用桑椹提取物C。桑葚提取物的產率為桑葚漿料中干物質重量的4.5％。
實施例4
(1)將桑椹干風凈后，粉碎至60目，稱取100克桑椹粉末置于250mL圓底燒瓶中，用2倍量的60％乙醇回流提取6小時，過濾后，保留濾渣備用；
(2)在桑椹濾渣中加入8倍重量的水，然后再加入蛋白酶0.02g、果膠酶0.15g、葡萄糖苷酶0.20g、葡聚糖酶0.08g后，將圓底燒瓶置于50±經濟1C°水浴鍋中，攪拌反應6小時；所使用蛋白酶的酶活為5×104U/g，果膠酶酶活為50U/g，葡萄糖苷酶酶活為105U/ml，葡聚糖酶的酶活為200U/g；
(3)待冷卻后，過濾，取濾液；
(4)加入80g90％乙醇，于-5℃條件下，自然沉降24小時；
(5)過濾，取濾液，將濾液在壓力為-0.10±0.01MPa，溫度為45±2℃條件下進行減壓濃縮，使濃縮液比重達到1.000±0.005g/cm3，即為酶解反應型煙用桑椹提取物D。桑葚提取物的產率為桑葚漿料中干物質重量的4.3％。
實驗例1
將實施例1和2制備得到的沙棘提取物A和B，分別加入煙絲中、涂布到卷煙紙上和添加到濾棒中，添加比例詳見表1，空白對照分別加入相同份量的蒸餾水(編號分別為CK11、CK22、CK33)。由具有感官評價資質的卷煙感官評價專家(9人)盲評，依據卷煙感官保潤的行業標準(卷煙感官舒適性評價方法YC/T 496-2014)進行評吸。評吸結果請見表2。
表1提取物使用比例及編號
表2感官評價效果
實驗例2
將實施例3、4制備得到的桑葚提取物A和B，分別加入煙絲中、涂布到卷煙紙上和添加到濾棒中，添加比例詳見表3，空白對照分別加入相同份量的蒸餾水(編號分別為CK11、CK22、CK33)。由具有感官評價資質的卷煙感官評價專家(9人)盲評，依據卷煙感官保潤的行業標準(卷煙感官舒適性評價方法YC/T 496-2014)進行評吸。評吸結果請見表4。
表3提取物使用比例及編號
表4感官評價效果
綜合以上分析可知，采用本申請方法制備的酶解反應型煙用提取物在卷煙感官保潤、提高卷煙舒適性方面效果明顯。
對比例1：
采用與實施例1中同一批次的水果原料進行如下對比實驗：
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于不添加蛋白酶，制備得到的沙棘果提取物AD1；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于僅添加蛋白酶，制備得到的沙棘果提取物AD2；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.03g、果膠酶0.3g；制備得到的沙棘果提取物AD3；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.03g、果膠酶0.015g、葡萄糖苷酶0.4g；制備得到的沙棘果提取物AD4；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.03g、果膠酶0.3g、纖維素酶0.03g；制備得到的沙棘果提取物AD5；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.03g、果膠酶0.15g、葡萄糖苷酶0.15g，制備得到的沙棘果提取物AD6。
將上述對比例制備得到的沙棘果提取物AD1～AD6，分別加入煙絲中，添加比例同實驗例1，空白對照分別加入相同份量的蒸餾水，編號為CK11。由具有感官評價資質的卷煙感官評價專家(9人)盲評，依據卷煙感官保潤的行業標準(卷煙感官舒適性評價方法YC/T 496-2014)進行評吸。評吸結果請見表5。
表5：
對比例2：
采用與實施例3中同一批次的水果原料進行如下對比實驗：
按照實施例3的方法制備桑葚提取物，區別僅在于不添加蛋白酶，制備得到的桑葚提取物CD1；
按照實施例1的方法制備桑葚提取物，區別僅在于僅添加蛋白酶，制備得到的桑葚提取物CD2；
按照實施例1的方法制備桑葚提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.02g、果膠酶0.2g；制備得到的桑葚提取物CD3；
按照實施例1的方法制備桑葚提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.02g、果膠酶0.08g、葡聚糖酶0.12g；制備得到的桑葚提取物CD4；
按照實施例1的方法制備桑葚提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.02g、果膠酶0.18g、葡聚糖酶0.1g；制備得到的桑葚提取物CD5；
按照實施例1的方法制備桑葚提取物，區別僅在于復合酶的組成為：蛋白酶0.02g、果膠酶0.18g、葡萄糖苷酶0.1g；制備得到的桑葚提取物CD6。
將上述對比例制備得到的桑葚提取物CD1～CD6，分別加入煙絲中，添加比例同實驗例1，空白對照分別加入相同份量的蒸餾水，編號為CK11。由具有感官評價資質的卷煙感官評價專家(9人)盲評，依據卷煙感官保潤的行業標準(卷煙感官舒適性評價方法YC/T 496-2014)進行評吸。評吸結果請見表6。
表6：
根據上述吸評結果可知，本申請制備工藝下得到的桑葚提取物，其吸評效果最佳，而對比例中改變本申請的工藝參數，均對吸評效果帶來不良影響，影響卷煙感官保潤、舒適性方面的效果。
對比例3
采用與實施例1中同一批次的水果原料進行如下對比實驗：
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于：在步驟1中，不進行回流提取，制備得到的沙棘果提取物AD7；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于：在步驟2中，酶解時間為24小時，制備得到的沙棘果提取物AD8；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于：在步驟2中，酶解溫度為60℃，制備得到的沙棘果提取物AD9；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于：在步驟4中，乙醇的濃度為50％，制備得到的沙棘果提取物AD10；
按照實施例1的方法制備沙棘果提取物，區別僅在于：在步驟5中，減壓濃縮的溫度為50℃，制備得到的沙棘果提取物AD11。
將上述對比例制備得到的沙棘果提取物AD7～AD11，并計算沙棘果提取物收率。分別加入煙絲中，添加比例同實驗例1，空白對照分別加入相同份量的蒸餾水，編號為CK11。由具有感官評價資質的卷煙感官評價專家(9人)盲評，依據卷煙感官保潤的行業標準(卷煙感官舒適性評價方法YC/T 496-2014)進行評吸。評吸結果請見表7。
表7：
根據上述吸評結果和收率可知，本申請制備工藝下得到的桑葚提取物，不僅吸評效果最佳，還可保證產率，從而提高企業利潤，具有重要的商業價值。而對比例中改變本申請的工藝參數，不僅對吸評效果帶來不良影響，還造成產率的降低。
本申請雖然以較佳實施例公開如上，但并不是用來限定權利要求，任何本領域技術人員在不脫離本申請構思的前提下，都可以做出若干可能的變動和修改，因此本申請的保護范圍應當以本申請權利要求所界定的范圍為準。