本發明涉及一種微生物制劑，尤其涉及一種大棚蔬菜種植后退化土壤的生態修復制劑及其制備方法。
背景技術：
大棚蔬菜栽培是寒冷地區蔬菜生產中極為重要的一種栽培方法，具有很好的經濟效益和社會效益。但是當前由于蔬菜大棚高度集約化的封閉管理和化肥的盲目過量投入，土壤退化問題十分突出。
長期過量施肥，不管是化肥還是有機肥都會造成鹽分在土壤表層累積，發生次生鹽漬化。當土壤鹽分含量高于0.3％時就會抑制作物，特別是幼苗根系對養分的吸收利用。土壤酸化主要是大量偏施氮肥造成的，它對作物根系和土壤微生物都有不利影響。
為追求高效益而長期連作，使土壤微生物區系失衡，土壤生物多樣性被破壞，引發根結線蟲、枯萎病、疫病等土傳病害。這在“黃瓜村”、“大蒜鄉”等單一種植的地區更為常見、更為嚴重。
土壤中自毒物質累積是指在長期連作條件下，作物根系分泌、分解和淋溶的化學物質對自身、同種或近緣植物產生的抑制作用。它是一種化感作用，大豆、番茄、茄子、西瓜、甜瓜和黃瓜等連作時都容易產生自毒作用。
在專利CN200710175706一種菜田土壤改良劑及其制備方法中介紹了一種菜田土壤改良劑，它包括按重量份將牛糞、麥麩、褐煤、硝酸鈣、硫酸鎂、硼砂、硫酸鋅、硫酸亞鐵和水混合，堆制充分發酵，發酵產物添加一定量的枯草芽孢桿菌菌劑而制得。但是由于是自然堆制發酵，發酵的時間和效果都比較難以控制，同時改善土壤的效果也并不優異。
技術實現要素：
本發明為解決現有技術中的上述問題提出的一種能夠有效修復土壤生態系統的同時促進植物根株生長，松土壯苗，并具有降解農藥、化肥殘留污染的作用的土壤生態修復制劑。
為了實現上述技術目的，本發明提出的技術方案為：
一種大棚蔬菜種植后退化土壤的生態修復制劑，包括有枯草芽孢桿菌、產朊假絲酵母菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、綠色木霉菌、沼澤紅假單胞菌。
優選地，所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC10616；所述產朊假絲酵母(Candida utilis)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC20059；所述枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC10616；所述植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC11118；所述干酪乳桿菌(Lactobacillus casei)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC10640；所述綠色木霉菌(Trichoderma viride)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC 30169；所述沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris)保藏于中國農業微生物菌種保藏管理中心，保藏號為ACCC10649。
另一方面，本發明還提供了上述大棚蔬菜種植后退化土壤的生態修復制劑的制備方法，包括以下驟：
步驟一，生產制種
將從中國農業微生物菌種保藏管理中心購買的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis，ACCC10616)轉接入營養肉湯液體培養基的錐形瓶中，在30-38℃，180-220rpm振蕩培養24-48小時，待培養基渾濁后取出；產朊假絲酵母(Candida utilis，ACCC20059)轉接入馬鈴薯液體培養基的錐形瓶中，在25-32℃，180-220rpm振蕩培養48-72小時，待培養基渾濁后取出；植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum，ACCC11118)轉接入MRS液體培養基的錐形瓶中，在30-42℃培養48-72小時，待待培養基渾濁后取出；干酪乳桿菌(Lactobacillus casei，ACCC10640)轉接入MRS液體培養基的錐形瓶中，在30-42℃培養48-72小時，待待培養基渾濁后取出；綠色木霉菌(Trichoderma viride，ACCC 30169)轉接入馬鈴薯液體培養基的錐形瓶中，在25-32℃，180-220rpm振蕩培養48-72小時，待培養基渾濁后取出；沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas palustris，ACCC10649)轉接入營養肉湯液體培養基的錐形瓶中，在30-38℃，180-220rpm振蕩培養24-48小時，待培養基渾濁后取出；然后放入2-4℃冰箱保存待用；培養基渾濁一般為菌液中活菌數目大于1.5×108cfu/ml。
步驟二，復合菌液配制和培養
(1)將步驟一培養的菌種按以下重量百分比稱取：枯草芽孢桿菌20-40％、產朊假絲酵母菌10-20％、植物乳桿菌10-30％、干酪乳桿菌10-20％、綠色木霉菌10-20％、沼澤紅假單胞菌5-10％，然后混合得到預混合菌液；；
(2)復合菌液配制：將以上預混合菌液按1按1：80-120比例放入以下配比的原料中：糖蜜5-10％、純凈水90-98％，放入發酵罐攪拌均勻后28-32℃培養，待pH小于4.00后密閉培養12-15天，即得復合菌液；
第三步，發酵制備生態修復制劑
(1)農作物秸稈收集和粉碎：農作物收割后，秸稈田間攤平、晾干、收集，運回生產廠區大棚內暫存，大棚內保持干燥。秸稈粉碎長度3-8毫米，秸稈要保持干燥。
(2)動物糞便的收集、處理：收集動物糞便，貯存于貯糞池內備用，糞便的水份85-95％；
(3)將粉碎后的農作物秸稈、動物糞便、糖蜜和步驟二所得到的復合菌液按重量比1：2-5：0.1-0.5：0.1-0.5，攪拌機內混合均勻。裝入帶有排氣閥的鋁箔袋中密封，置于25-32℃發酵間完全厭氧發酵兩周，即得固體形態的土壤生態修復劑。
優選地，上述農作物秸稈為水稻秸稈、玉米秸稈、小麥秸稈等；
優選地，上述動物糞便為牛糞、豬糞、雞糞、羊糞等。
本發明是通過微生物技術，從修復土壤生態系統入手，增加土壤中的有益菌，同時采用多菌種聯合的技術方法，在修復土壤生態系統的同時促進植物根株生長，松土壯苗，還具有降解農藥、化肥殘留污染的作用。
具體實施方式
本發明提供了一種大棚蔬菜種植后退化土壤的生態修復制劑，包括有枯草芽孢桿菌、產朊假絲酵母菌、植物乳桿菌、干酪乳桿菌、綠色木霉菌、沼澤紅假單胞菌。
下面通過具體實施例對本發明進行詳細和具體的介紹，以使更好的理解本發明，但是下述實施例并不限制本發明范圍。
實施例一
步驟一，生產制種
將從中國農業微生物菌種保藏管理中心購買的地衣芽孢桿菌轉接入營養肉湯液體培養基的錐形瓶中，在38℃，220rpm振蕩培養24小時，待培養基渾濁后取出；產朊假絲酵母轉接入馬鈴薯液體培養基的錐形瓶中，在30℃，220rpm振蕩培養48小時，待培養基渾濁后取出；植物乳桿菌轉接入MRS液體培養基的錐形瓶中，在37℃培養48小時，待待培養基渾濁后取出；干酪乳桿菌轉接入MRS液體培養基的錐形瓶中，在37℃培養48小時，待待培養基渾濁后取出；綠色木霉菌轉接入馬鈴薯液體培養基的錐形瓶中，在28℃，220rpm振蕩培養72小時，待培養基渾濁后取出；沼澤紅假單胞菌轉接入營養肉湯液體培養基的錐形瓶中，在35℃，220rpm振蕩培養48小時，待培養基渾濁后取出；然后放入4℃冰箱保存待用；
步驟二，菌種復合培養
(1)將步驟一培養的菌種按以下重量百分比稱取：地衣芽孢桿菌30％、產朊假絲酵母菌20％、植物乳桿菌20％、干酪乳桿菌15％、綠色木霉菌10％、沼澤紅假單胞菌5％，相互混合得到預混合菌液；
(2)復合菌液配制：將預混合菌液按1：80比例放入以下配比的原料中：糖蜜5％、純凈水95％，放入發酵罐攪拌均勻后28℃培養，待pH小于3.60后密閉培養12天，即得復合菌液；
步驟三，發酵制備生態修復劑
(1)玉米秸稈收集和粉碎
玉米秸稈收割后，在田間攤平、晾干、收集，運回生產廠區大棚內暫存，大棚內保持干燥。秸稈粉碎長度3毫米，秸稈要保持干燥。
(2)牛糞的收集、處理
收集新鮮牛糞，貯存于貯糞池內備用，糞便的水份85-95％；
(3)固體形態的土壤生態修復劑制備
將粉碎后的玉米秸稈、牛糞、糖蜜和上述復合菌液按重量比1：4：0.15：0.15，攪拌機內混合均勻。裝入帶有排氣閥的鋁箔袋中密封，置于28℃發酵間完全厭氧發酵兩周，即得大棚蔬菜種植后退化土壤的生態修復制劑。
實施例二
在氣溫10℃以上時，每畝大棚蔬菜田施用實施例一得到的土壤生態修復劑1-2噸，將土壤生態修復劑翻入土壤內；灑水保持土壤濕度60-80％，再均勻噴灑液體形態的土壤生態修復劑，用量視土壤情況確定；60天后再均勻噴灑一次液體形態的土壤生態修復劑(用量與第一次相同)，3個月后，土壤修復基本完成。
表1處理前后土壤微生物變化表
由上可見：本發明的土壤生態修復劑可以使土壤中的細菌和放線菌數量有顯著的增加，真菌的數量有顯著的減少，土壤生態修復劑的施用量和土壤中的微生物數量呈正相關。
以上對本發明的具體實施例進行了詳細描述，但其只是作為范例，本發明并不限制于以上描述的具體實施例。對于本領域技術人員而言，任何對本發明進行的等同修改和替代也都在本發明的范疇之中。因此，在不脫離本發明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應涵蓋在本發明的范圍內。