本發明涉及植物細胞培養技術,進一步涉及植物細胞的營養條件設計,具體涉及一種用于藏紅花細胞的培養基。
背景技術:
植物細胞培養技術是以離體植物細胞或原生質體為對象,以細胞量擴增和目標代謝產物累積為目的的培養工藝。對于以獲得特定代謝產物為目的的細胞培養而言,其主要工藝環節不僅在于細胞量的擴增,同時,目標代謝產物的誘導合成對培養效益更為重要。在植物細胞的培養過程中,培養條件和營養條件是影響產量的最重要因素,其中培養條件是指溫度、溶氧、光照、pH等環境條件的控制,而營養條件主要指植物細胞的培養基。由于在封閉培養環境中培養基是植物細胞的唯一營養來源,因此培養基的成分對植物細胞的生長水平、代謝產物類別具有極其重要的影響,尤其對于以獲得特定代謝產物為目的的細胞培養而言,培養基往往是影響培養效率的關鍵因素。
藏紅花是一種名貴的婦科良藥,又可用于功能食品和化妝品的開發,被譽為“植物黃金”,其柱頭還含有良好抗癌作用的藏紅花素等活性成分,有望成為最理想的抗癌藥物之一。但藏紅花主要是柱頭入藥,田間栽培過程易感染植物病毒,產量極低,又因種植條件苛刻、適宜栽培的地區有限,致使其資源短缺,價格昂貴。在這種情況下,通過植物細胞培養體系生產藏紅花素等,是解決藏紅花資源短缺的有效手段。在藏紅花細胞培養的研究中,如何提高培養物中的主要有效藥用成分皂甙的含量和質量,擴大培養規模,最終實現工業化生產,是這一領域的研究重點。現有技術中藏紅花細胞的培養效果及其色素的產量仍有待提升。
技術實現要素:
本發明旨在針對現有技術的技術缺陷,提供一種藏紅花細胞培養基,以解決現有技術中藏紅花細胞培養效果不佳的技術問題。
本發明要解決的另一技術問題是現有技術的藏紅花細胞培養過程中藏紅花色素產量較低。
為實現以上技術目的,本發明采用以下技術方案:
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L。
作為優選,該培養基還含有100μmol/L的茉莉酸甲酯。
作為優選,該培養基還含有10μmol/L的水楊酸。
作為優選,該培養基還含有500μmol/L的硫酸銅。
作為優選,該培養基還含有1g/L的蛇莓草壓榨汁。
作為優選,該培養基還含有1g/L的白花蛇舌草壓榨汁。
作為優選,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,茉莉酸甲酯100μmol/L,水楊酸10μmol/L,硫酸銅500μmol/L,蛇莓草壓榨汁1g/L,白花蛇舌草壓榨汁1g/L。
在以上技術方案中,所述B5培養基可以依據本領域的一般技術常識進行配制,當然也可以采用以下具體配方的B5培養基:KNO3 2500mg/L,MgSO4·7H2O 250mg/L,CaCl2·2H2O 150mg/L,(NH4)2SO4 134mg/L,NaH2PO4·H2O 150mg/L,KI 0.75mg/L,H3BO3 3mg/L,MnSO4·4H2O 10mg/L,ZnSO4·7H2O 2mg/L,Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L,CoCl2·6H2O 0.025mg/L,CuSO4·5H2O 0.04mg/L,Na2-EDTA·2H2O 37.3mg/L,FeSO4·7H2O 27.8mg/L,肌醇100mg/L,煙酸1mg/L,維生素B6 1mg/L,維生素B1 10mg/L,水余量。
以上技術方案中,蛇莓草、白花蛇舌草分別指其新鮮全草。本發明中所述的壓榨汁,是指利用物理方法獲取的各原料的新鮮汁液,包括但不限于壓榨、粉碎離心等常規方法。
本發明提供了一種用于藏紅花細胞的培養基,該技術方案針對藏紅花細胞代謝特性改進了其營養條件,在1/2濃度的B5培養基基礎上添加了6-BA、IAA等植物激素,以其作為合成培養基中誘導子及前體物質,促進了藏紅花細胞的色素分泌量,在此基礎上進一步添加了一定量的天然藥物使得藏紅花細胞的培養效果得到了進一步提升。實驗發現,當利用本發明合成培養基對藏紅花細胞進行培養后藏紅花色素分泌量顯著提升,同時能夠在一定程度增進細胞培養密度。本發明以創新性的技術改進實現了良好的技術效果,同時成本較低、易于實現,因此具有良好的退推廣前景。
具體實施方式
以下將對本發明的具體實施方式進行詳細描述。為了避免過多不必要的細節,在以下實施例中對屬于公知的結構或功能將不進行詳細描述。除有定義外,以下實施例中所用的技術和科學術語具有與本發明所屬領域技術人員普遍理解的相同含義。
實施例1
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L。
實施例2
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,茉莉酸甲酯100μmol/L。
實施例3
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,水楊酸10μmol/L。
實施例4
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,硫酸銅500μmol/L。
實施例5
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,蛇莓草壓榨汁1g/L。
實施例6
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,白花蛇舌草壓榨汁1g/L。
實施例7
一種用于藏紅花細胞的培養基,該培養基含有1/2濃度的B5培養基成分,同時還含有植物激素6-BA 0.5mg/L,生長素IAA 2mg/L,茉莉酸甲酯100μmol/L,水楊酸10μmol/L,硫酸銅500μmol/L,蛇莓草壓榨汁1g/L,白花蛇舌草壓榨汁1g/L。
實施例8
本實施例用于評價以上實施例1~7所提供的培養基作為合成培養基時對藏紅花細胞色素產量的影響,實驗結果如表1所示。
表1不同培養基作為合成培養基時對藏紅花細胞色素產量的影響
由此可見,利用本發明所提供的培養基作為合成培養基培養藏紅花細胞時,對其色素產量具有確切的促進作用。
以上對本發明的實施例進行了詳細說明,但所述內容僅為本發明的較佳實施例,并不用以限制本發明。凡在本發明的申請范圍內所做的任何修改、等同替換和改進等,均應包含在本發明的保護范圍之內。