本發明涉及生物化工及生物提取領域。更具體地，涉及一種丁香羅勒中精油的分離提取方法。
背景技術：
丁香羅勒為一年生直立草本植物，通常被作為醫療用品和香料而大量種植。它可用于治療細菌感染、腹瀉或作為調味劑，并具有抗真菌、抗誘變、抗菌、免疫調節及控制平滑肌收縮等功效。由于羅勒在傳統醫學中的廣泛應用及其醫療效果，近年對其成分、作用和作用機理的研究越來越多。
羅勒精油具有止痛、鎮定功效，能快速治療牙痛、消化問題、肌肉疼痛、氣喘、鼻竇炎等疾病。另外，羅勒精油還具防腐和抑菌的能力，具有較高食用安全性，它是開發天然防腐保鮮劑的重要原料。目前果蔬采后病害導致的巨大損失已成為全球性的問題，在發達國家約有10％-20％的新鮮果品由于采后病害導致腐爛損失。而在缺乏貯運冷藏設備的發展中國家，腐爛損失率則更高達40％～50％。而控制果蔬采后病害的主要手段是冷藏結合化學殺菌劑，但化學殺菌劑對人類健康和環境的危害己成為全世界關心的問題。羅勒精油作為天然防腐保鮮劑的重要原料具有重要的價值。利用傳統溶劑提取法提取羅勒精油，不但提取時間長，而且提取效率低，因此，需要提供一種能提高提取效率，縮短提取時間，有效降低成本的羅勒精油提取分離方法。
技術實現要素：
本發明的目的在于提供一種丁香羅勒中精油的分離提取方法，該方法提高了提取效率，縮短了提取時間，有效降低了成本。
為達到上述目的，本發明采用下述技術方案：
一種丁香羅勒中精油的分離提取方法，包括以下步驟：
(1)取丁香羅勒的地上部分，洗凈，晾干，粉碎后的丁香羅勒粉末，將丁香羅勒粉末與硅藻土按質量比1：(1-3)混勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入2-4倍量的氯仿，提取，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)得到的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；
(4)將步驟(2)和(3)得到的濾液加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2-3小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水的部分分離出來，減壓濃縮，即得。
優選的，步驟(1)中所述丁香羅勒粉末與硅藻土按質量比1：(1-2)混勻。
優選的，步驟(2)中所述提取的條件為提取溫度為40-50℃，提取時間為30-50min。
優選的，步驟(3)中所述加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：體積比為(2-1):1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度60-150℃，提取壓力1000-3000psi，提取次數3-5次，提取時間5-30min，吹洗體積10-100％萃取池體積、吹洗時間80-300s；
更優選的，提取溶劑：體積比為2:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度60-80℃，提取壓力1000-3000psi，提取次數3-5次，提取時間5-20min，吹洗體積50-100％萃取池體積，吹洗時間150-300s。
本發明的有益效果如下：
本發明丁香羅勒中精油的分離提取方法，丁香羅勒精油的提取率較高，能達到22％以上，高于傳統的提取方法，且提取充分，原料及試劑利用率較高；另外，本發明方法有效提高了生產效率，操作簡單易行，適用于工業化生產。
具體實施方式
為了更清楚地說明本發明，下面結合優選實施例對本發明做進一步的說明。本領域技術人員應當理解，下面所具體描述的內容是說明性的而非限制性的，不應以此限制本發明的保護范圍。
實施例1
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質量比1:1混合，研磨均勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入2倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為40℃，提取時間為30分鐘，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：體積比為2:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度60℃、提取壓力1000psi，提取次數3次，提取時間5min、吹洗體積10％萃取池體積，吹洗時間80s；
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。
實施例2
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質量比1：3混合，研磨均勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入4倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為50℃，提取時間為50min，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：體積比為1:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度150℃，提取壓力3000psi，提取次數5次，提取時間30min，吹洗體積100％萃取池體積，吹洗時間300s；
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取3小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。
實施例3
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質量比1：2混合，研磨均勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為45℃，提取時間為40min，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：體積比為2:1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度100℃，提取壓力2000psi，提取次數4次，提取時間20min，吹洗體積50％萃取池體積，吹洗時間150s；
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。
實施例4
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎并與硅藻土按質量比1：1混合，研磨均勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為45℃，提取時間為40min，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：體積比為1：1的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數4次，提取時間15min，吹洗體積60％萃取池體積，吹洗時間200s；
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。
試驗例1丁香羅勒粉與硅藻土的質量比對丁香羅勒中精油提取率的影響
按照以下步驟進行精油的分離提取
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎得到丁香羅勒粉，將并與硅藻土進行混合，研磨均勻，得混合樣品；其中，設置丁香羅勒粉與硅藻土質量比分別為3:1，2:1，1:1，1:2，1:3，1:4，1:5；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為45℃，提取時間為40min，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：體積比為1:2的丙酮和甲醇的混合物，提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數4次，提取時間15min，吹洗體積60％萃取池體積、吹洗時間200s；
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油；
比較不同丁香羅勒粉與硅藻土質量比對精油的提取率的影響，結果見表1，從表中可以看出，不同丁香羅勒粉與硅藻土質量比對精油提取率有較大的影響：當丁香羅勒粉與硅藻土質量比為1:(1-3)時，精油的提取率較高，都達到了14.4％以上，明顯高于其他組合；當丁香羅勒粉與硅藻土質量比為1:(1-2)時，精油的提取率更高，達到了16％以上。
表1精油提取率的結果
試驗例2提取溶劑對精油提取率的影響
按照以下步驟進行精油的分離提取
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎得到丁香羅勒粉，將并與硅藻土以質量比為1:2進行混合，研磨均勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為45℃，提取時間為40min，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數4次，提取時間15min，吹洗體積60％萃取池體積、吹洗時間200s；其中提取溶劑設置為丙酮和甲醇、丙酮和乙醇、甲醇和乙醇以體積比為1:2的比例混合后的混合物；
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。
比較不同提取溶劑對精油的提取率的影響，結果見表2，從表中可以看出，不同提取溶劑對于精油的提取率有顯著性的影響，當提取溶劑為丙酮和甲醇時，精油的提取率最高，達到了16.8％，明顯高于其他組合。
表2精油提取率的結果
試驗例3提取溶劑中丙酮和甲醇的體積比對精油提取率的影響
按照以下步驟進行精油的分離提取
(1)采取丁香羅勒植物地上部分，清水洗凈，室溫下晾干，將其粉碎得到丁香羅勒粉，將并與硅藻土以質量比為1:2進行混合，研磨均勻，得混合樣品；
(2)將步驟(1)的混合樣品中加入3倍量的氯仿，放置在超聲儀中進行提取，提取溫度為45℃，提取時間為40min，過濾，得到濾液和殘留物；
(3)將步驟(2)的殘留物轉移至底部放有濾紙的萃取池中，且殘留物填滿萃取池，進行加速溶劑萃取，得到提取液，并進行過濾得到濾液；其中，設定加速溶劑萃取的參數為：提取溶劑：丙酮和甲醇，提取溫度80℃，提取壓力2000psi，提取次數4次，提取時間15min，吹洗體積60％萃取池體積、吹洗時間200s；其中丙酮和甲醇的體積比分別為3:1，2:1，1:1，1:2，1:3。
(4)步驟(2)(3)所得到的濾液，放置于分液漏斗中，向分液漏斗中加入等體積的蒸餾水，充分混合，靜置萃取2.5小時；
(5)將步驟(4)中不溶于水部分分離出來，放置于旋轉蒸發儀中進行減壓濃縮，得到黃色油狀物濃縮物，即為精油。
比較提取溶劑中丙酮和甲醇的體積比對精油的提取率的影響，結果見表3，從表中可以看出，不同丙酮和甲醇的體積比對于精油的提取率有顯著性的影響，當丙酮和甲醇的體積比為(1-2):1時，精油的提取率較高，而當其體積比為2:1時，精油提取率最高，可達到22.4％，明顯高于其他組合。
表3精油提取率的結果
顯然，本發明的上述實施例僅僅是為清楚地說明本發明所作的舉例，而并非是對本發明的實施方式的限定，對于所屬領域的普通技術人員來說，在上述說明的基礎上還可以做出其它不同形式的變化或變動，這里無法對所有的實施方式予以窮舉，凡是屬于本發明的技術方案所引伸出的顯而易見的變化或變動仍處于本發明的保護范圍之列。