一種化合物的鹽及晶型或無定型物、其制備方法、含有它們的藥物組合物和用途與流程

技術領域

本發明屬于藥物化學技術領域，具體而言，涉及丙肝治療藥物((1S)-1-(((2S)-2-(5-(4’-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-4-聯苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯的鹽及其晶型或無定型物，本發明還涉及所述化合物鹽及其晶型的制備方法、其藥物組合物和用途。

背景技術：

Daclatasvir，又稱BMS-790052，是由百時美施貴寶公司(Bristol-Myers Squibb)開發的一種治療丙肝病毒(HCV)感染的復制抑制劑。該化合物的化學名稱為((1S)-1-(((2S)-2-(5-(4’-(2-((2S)-1-((2S)-2-((甲氧羰基)氨基)-3-甲基丁酰基)-2-吡咯烷基)-1H-咪唑-5-基)-4-聯苯基)-1H-咪唑-2-基)-1-吡咯烷基)羰基)-2-甲基丙基)氨基甲酸甲酯，其化學結構式如下所示：

BMS-790052用化學遺傳學方法確定為一種強效特異性HCV抑制因子，是沒有已知酶活性的第三種病毒分子(即非結構性蛋白5A，簡稱為“NS5A”)的一個小分子抑制因子。百時美施貴寶公司的研究人員報告了該藥的發現及其病毒特征，并公布了用這一化合物在正常的健康志愿者和HCV感染者中所進行的臨床試驗觀察結果。體外試驗數據表明該藥與已知的HCV抑制藥物之間有協同作用效果。在I期臨床試驗中，HCV感染者服用單一劑量100毫克該化合物后，24小時平均病毒載量下降3.3log10，在2例HCV基因1b型感染者中，這種作用維持了120小時。所以該藥有望成為強效抑制HCV復制的新的聯合用藥。

專利文獻WO2009020828A1公開了BMS-790052化合物和其二鹽酸鹽、以及它們的合成方法，并公開了BMS-790052二鹽酸鹽的晶型數據、DSC圖、固態核磁共振光圖譜和其藥物組合物的相關信息。

本發明人重復該文獻提供的方法，制備得到了該文獻的BMS-790052二鹽酸鹽。該鹽的水中溶解度大于200毫克/毫升，但其水溶液在室溫下放置24小時，出現固體析出，溶液變渾濁的現象，經HPLC含量檢測，析出固體為BMS-790052游離堿，鑒于該現象，BMS-790052二鹽酸鹽不適合制備緩釋制劑。

因此，本領域仍需要開發能延長藥效且適于緩釋制劑應用的新的BMS-790052鹽及其形態，例如晶型或無定型物，以保證該藥在患者體內能夠長時間對病毒發揮抑制作用，減少用藥次數和提高患者的臨床療效。

技術實現要素：

針對現有技術的不足，本發明的目的是提供具有有利的緩釋效果和更好的水溶液穩定性、適合緩釋制劑應用的固態BMS-790052鹽及其晶型或無定型物，其中包括BMS-790052的二對甲苯磺酸鹽、二苯磺酸鹽、一檸檬酸鹽、一乙醇酸鹽、二扁桃酸鹽、二對氯苯磺酸鹽、二乙二磺酸鹽、二α-酮-戊二酸鹽、二1,5-萘二磺酸鹽和二2-萘磺酸鹽。

本發明的內容之一是提供固態的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽及其晶型，以及它們的制備方法。

所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，是BMS-790052和對甲苯磺酸以摩爾比約為1:2形成的化合物，其結構式如下所示：

所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在可溶溶劑中的溶液，加入對甲苯磺酸固體，BMS-790052與對甲苯磺酸的摩爾用量比為1:2～1:3，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽。

優選地，所述可溶溶劑選自酮、醇或其混合物，優選為C₃～C₄酮、C₁～C₄醇或其混合物，更優選為丙酮、異丙醇或其混合物。

優選地，所述制備方法在室溫下進行。

優選地，所述攪拌的時間為8～16小時。

優選地，所述BMS-790052在可溶溶劑中的濃度為25～50毫克/毫升。

優選地，所述BMS-790052與對甲苯磺酸的摩爾用量比為1:2～1:2.2。

經HPLC測定，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿的實際含量為67.6％，理論含量為68.3％。表明所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿與對甲苯磺酸以摩爾比約為1:2成鹽。

優選地，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽為BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，其X-射線粉末衍射圖譜在衍射角2θ為5.1±0.2°、6.3±0.2°、13.4±0.2°、14.6±0.2°、15.4±0.2°和21.1±0.2°處具有特征峰。

進一步地，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，其X射線粉末衍射圖譜在衍射角2θ為5.1±0.2°、6.3±0.2°、10.2±0.2°、10.7±0.2°、13.4±0.2°、13.7±0.2°、14.6±0.2°、15.4±0.2°、18.3±0.2°、19.2±0.2°、19.9±0.2°和21.1±0.2°處具有特征峰。

更進一步地，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，其X射線粉末衍射圖譜在以下衍射角2θ處具有特征峰及其相對強度：

非限制性地，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的一個典型實例具有如圖5所示的X-射線粉末衍射(XRPD)圖譜。

所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的TGA圖譜顯示：120℃之前有約2.0％臺階失重，與含一個水分子失重比例(1.6％)相當，分解溫度約為236℃。

所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型DSC圖譜顯示：80℃之前有一寬吸熱峰，80～150℃之間的吸熱峰為脫去結合的水分子。

所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的制備方法，包括以下步驟：將根據前述制備方法得到的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽在溶劑中形成懸浮液，攪拌析晶，進而分離晶體，室溫至40℃真空干燥，得到所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，其中所述溶劑選自水、含1％水的酮(V/V)、水飽和的酯、水飽和的醚或其混合物。

優選地，所述酮為C₃～C₄酮，優選為丙酮；所述酯為C₃～C₅酯，優選為乙酸乙酯；所述醚為C₄～C₆醚，優選為甲基叔丁基醚。

優選地，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的制備方法在室溫下進行。

優選地，所述析晶的時間為24～72小時，優選為24～48小時。

優選地，所述干燥時間為8～24小時，優選為8～16小時。

優選地，所述BMS-790052二對甲苯磺酸鹽與溶劑的質量體積比為10～16mg：1mL。

所述水飽和的酯(或醚)溶劑制備方法為：取等體積的水和酯(或醚)溶劑混合后，劇烈攪拌10分鐘，靜置分層，取有機層即為水飽和的酯(或醚)溶劑。

與已知的BMS-790052二鹽酸鹽及其晶型比較，本發明的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽及其一水合物晶型具有好的緩釋效果和好的水溶液穩定性、適合緩釋制劑應用，其制備方法工藝簡便，在室溫條件下進行常規操作，有利于產品的工業化。特別是緩釋效果和水溶液穩定性，可以避免活性物質以固態形式存在而造成吸收不穩定以及生物利用度低的風險。

本發明的內容之二是提供固態的BMS-790052二苯磺酸鹽及其晶型，以及它們的制備方法。

所述BMS-790052二苯磺酸鹽，是BMS-790052和苯磺酸以摩爾比約為1:2形成的化合物，其結構式如下所示：

所述BMS-790052二苯磺酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在可溶溶劑中的溶液，加入苯磺酸固體，BMS-790052與苯磺酸的摩爾用量比為1:2～1:3，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052二苯磺酸鹽。

優選地，所述可溶溶劑選自酮、醇或其混合物，優選為C₃～C₄酮、C₁～C₄醇或其混合物，更優選為丙酮、異丙醇或其混合物。

優選地，所述制備方法在室溫下進行。

優選地，所述攪拌的時間為8～16小時。

優選地，所述BMS-790052在可溶溶劑中的濃度為25～50毫克/毫升。

優選地，所述BMS-790052與苯磺酸的摩爾用量比為1:2～1:2.2。

經HPLC測定，BMS-790052二苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿的實際含量為70.3％，理論含量為70.1％。表明所述BMS-790052二苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿與苯磺酸以摩爾比約為1:2成鹽。

優選地，所述BMS-790052二苯磺酸鹽為BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型，其X射線粉末衍射圖譜在衍射角2θ為6.7±0.2°、9.7±0.2°、15.0±0.2°、17.8±0.2°、18.3±0.2°和22.1±0.2°處具有特征峰。

進一步地，所述BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型，其X射線粉末衍射圖譜在衍射角2θ為6.7±0.2°、7.2±0.2°、9.0±0.2°、9.7±0.2°、10.0±0.2°、13.7±0.2°、15.0±0.2°、16.6±0.2°、17.8±0.2°、18.3±0.2°、21.3±0.2°和22.1±0.2°處具有特征峰。

更進一步地，所述BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型，其X射線粉末衍射圖譜在以下衍射角2θ處具有特征峰及其相對強度：

非限制性地，所述BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的一個典型實例具有如圖9所示的X-射線粉末衍射(XRPD)圖譜。

所述BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的制備方法，包括以下步驟：將根據前述制備方法得到的BMS-790052二苯磺酸鹽在水中形成懸浮液，攪拌析晶，得到所述BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型。

優選地，所述BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的制備方法在室溫下進行。

優選地，所述析晶的時間為10～24小時。

優選地，所述BMS-790052二苯磺酸鹽與水的質量體積比為15～30mg：1mL。

與已知的BMS-790052二鹽酸鹽及其晶型比較，本發明的BMS-790052二苯磺酸鹽及其B晶型具有好的緩釋效果和好的水溶液穩定性、適合緩釋制劑應用，其制備方法工藝簡便，在室溫條件下進行常規操作，有利于產品的工業化。特別是緩釋效果和水溶液穩定性，可以避免活性物質以固態形式存在而造成吸收不穩定以及生物利用度低的風險。

本發明的內容之三是提供固態的BMS-790052三鹽酸鹽及其無定型物，以及它們的制備方法。

所述BMS-790052三鹽酸鹽，是BMS-790052和鹽酸以摩爾比約為1:3形成的化合物，其結構如下所示：

所述BMS-790052三鹽酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在可溶溶劑中的溶液體系，加入鹽酸，BMS-790052與鹽酸的摩爾用量比為1:3～1:10，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052三鹽酸鹽。

優選地，所述可溶溶劑為酯，更優選為C₃～C₅酯。

優選地，所述制備方法在室溫下進行。

優選地，所述攪拌的時間為3～10小時，更優選為3～5小時。

優選地，所述BMS-790052在可溶溶劑中的濃度為10～50mg/mL。

優選地，所述BMS-790052與鹽酸的摩爾用量比為1:6～1:10。

優選地，所用鹽酸的濃度范圍為0.1～12mol/L，更優選為6～12mol/L。

經HPLC測定，所述BMS-790052三鹽酸鹽中BMS-790052游離堿的實際含量為87.6％，理論含量為87.1％。表明所述BMS-790052三鹽酸鹽中BMS-790052游離堿與鹽酸以摩爾比約為1:3成鹽。

優選地，所述BMS-790052三鹽酸鹽為BMS-790052鹽酸鹽無定型物。

進一步地，所述BMS-790052三鹽酸鹽無定型物，其特征在于，其X射線粉末衍射圖譜基本上如圖13所示。

所述BMS-790052三鹽酸鹽無定型物，其制備方法包括以下步驟：根據前述制備方法得到的BMS-790052三鹽酸鹽在溶劑中形成懸浮液，攪拌，析出固體，得到所述BMS-790052三鹽酸鹽無定型物，其中所述溶劑選自醇、酯或醚。

優選地，所述醇為C₂～C₃醇，更優選為異丙醇；

優選地，所述酯為C₃～C₅酯，更優選為乙酸乙酯；

優選地，所述醚為C₄～C₆醚，更優選為甲基叔丁基醚。

優選地，所述BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的制備方法在室溫下進行。

優選地，所述攪拌的時間為8～48小時，更優選為8～16小時。

優選地，所述BMS-790052三鹽酸鹽與溶劑的質量體積比為10～50mg：1mL。

本發明的BMS-790052三鹽酸鹽及其無定型物具有較好的水中溶解度和穩定性，適合濕法制粒及制成口服懸浮液，其制備方法工藝簡便，在室溫條件下進行常規操作，有利于產品的工業化。

在本發明的過程中，還發現以下BMS-790052鹽及其晶型，包括BMS-790052的一對甲苯磺酸鹽、一苯磺酸鹽、二檸檬酸鹽、二乙醇酸鹽、蘋果酸鹽、丙二酸鹽、一扁桃酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、一對氯苯磺酸鹽、一乙二磺酸鹽、一α-酮-戊二酸鹽、一1,5-萘二磺酸鹽和一2-萘磺酸鹽。

所述BMS-790052蘋果酸鹽，是BMS-790052和蘋果酸形成的化合物。

所述BMS-790052蘋果酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在丙酮中的溶液，加入蘋果酸固體，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052蘋果酸鹽。

所述BMS-790052丙二酸鹽，是BMS-790052和丙二酸形成的化合物。

所述BMS-790052丙二酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在可溶溶劑中的溶液，加入丙二酸，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052丙二酸鹽。

所述BMS-790052磷酸鹽，是BMS-790052和磷酸形成的化合物。

所述BMS-790052磷酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在乙酸乙酯中的溶液，加入磷酸，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052磷酸鹽。

所述BMS-790052硫酸鹽，是BMS-790052和硫酸形成的化合物。

所述BMS-790052硫酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在乙酸乙酯中的溶液，加入硫酸，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052硫酸鹽。

所述BMS-790052酒石酸鹽，是BMS-790052和酒石酸形成的化合物。

所述BMS-790052酒石酸鹽的制備方法，包括以下步驟：形成BMS-790052在異丙醇中的溶液，加入酒石酸，混合形成漿液并攪拌，進而分離固體，得到所述BMS-790052酒石酸鹽。

上述各種BMS-790052鹽及其晶型的制備方法中，所得BMS-790052鹽或其晶型的固體，采用本領域的常規方法進行分離和干燥。所述“分離”，采用本領域的常規方法例如過濾、離心等。過濾的具體操作為：將欲分離的樣品置于濾紙上，減壓抽濾。離心的具體操作為：將欲分離的樣品置于離心管中，之后高速旋轉直至固體全部沉至離心管底部，離心速率例如為6000轉/分鐘。所述“干燥”采用本領域的常規方法，例如鼓風干燥、減壓干燥等，優選壓力小于0.09MPa下的減壓干燥。干燥溫度為室溫～50℃，干燥時間約10～72小時，優選約10～24小時。

對本發明中使用的術語解釋如下：

本發明采用“晶漿”結晶方式，是將樣品的過飽和溶液(有不溶固體存在的懸浮液)在溶劑體系中攪拌以析晶。

所述“室溫”指10-30℃。

所述“攪拌”，可以采用本領域的常規方法，例如攪拌方式包括磁力攪拌、機械攪拌，攪拌速度為50～1800轉/分鐘，優選300～900轉/分鐘。

所述“超聲”操作，有利于樣品的溶解，具體操作為：將裝有溶液或懸濁液的容器置于超聲波清洗器中，以20～40Khz的功率進行處理。一般采用40Khz功率超聲處理5分鐘。

本發明BMS-790052鹽或其晶型的制備方法中，起始原料BMS-790052可以商購獲得，也可以參照專利文獻WO2009020828A1公開的制備方法得到，該文獻通過引用的方式并入本申請中。

進一步地，本發明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含治療和/或預防有效量的藥物活性成分選自本發明的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物或者由本發明方法制備得到的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物，以及至少一種藥學上可接受的載體；其中所述本發明的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物選自BMS-790052二對甲苯磺酸鹽、BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型、BMS-790052二苯磺酸鹽、BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型、BMS-790052一檸檬酸鹽、BMS-790052一檸檬酸鹽無定型物、BMS-790052一乙醇酸鹽、BMS-790052一乙醇酸鹽無定型物、BMS-790052二扁桃酸鹽、BMS-790052二扁桃酸鹽無定型物、BMS-790052二對氯苯磺酸鹽、BMS-790052二對氯苯磺酸鹽C晶型、BMS-790052二乙二磺酸鹽、BMS-790052二乙二磺酸鹽E晶型、BMS-790052二α-酮-戊二酸鹽、BMS-790052二α-酮-戊二酸鹽G晶型、BMS-790052二1,5-萘二磺酸鹽、BMS-790052二1,5-萘二磺酸鹽Nd晶型、BMS-790052二2-萘磺酸鹽、BMS-790052二2-萘磺酸鹽Ns晶型、BMS-790052三鹽酸鹽、BMS-790052三鹽酸鹽無定型物、BMS-790052蘋果酸鹽、BMS-790052丙二酸鹽、BMS-790052磷酸鹽、BMS-790052硫酸鹽或BMS-790052酒石酸鹽。此外，所述藥物組合物還可以包含BMS-790052的其它可藥用的鹽、晶型或無定型物，例如已知的BMS-790052二鹽酸鹽及其晶型。任選地，所述藥物組合物還可以包含其它的藥物活性成分，包括但不限于其他的抗HCV活性化合物；免疫調節劑，例如干擾素類；其他的抗病毒藥例如利巴韋林、金剛烷胺；NS5A的其他抑制劑；HCV生命周期中的其他靶標的抑制劑。

本發明所述的藥物組合物可為固態或液態；劑型例如固體口服劑型，包括片劑、顆粒劑、散劑、丸劑和膠囊劑；液體口服劑型，包括溶液劑、糖漿劑、混懸劑、分散劑和乳劑；無菌可注射制劑，包括溶液劑、分散劑和凍干劑；配方可適于活性成分的快速釋放、延遲釋放或調節釋放。可以是常規的、可分散的、可咀嚼的、口腔溶解的或快速熔化的制劑。給藥途徑可以通過口服、腸胃外或通過植入貯庫進行給藥，所述腸胃外給藥包括皮下、皮內、靜脈內、肌內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內和損傷區注射或輸液技術。若該藥物組合物為液態，則本發明的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物在該液體組合物中保持為固體，例如作為懸浮液。

所述藥物組合物中藥學上可接受的載體包括但不限于：稀釋劑，例如淀粉、改性淀粉、乳糖、粉狀纖維素、微晶纖維素、無水磷酸氫鈣、磷酸三鈣、甘露醇、山梨醇、糖等；粘合劑，例如阿拉伯膠、瓜爾膠、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙二醇、共聚維酮等；崩解劑，例如淀粉、羧甲基淀粉鈉、羥基乙酸淀粉鈉、預膠化淀粉、交聯聚維酮、交聯羧甲基纖維素鈉、膠體二氧化硅等；潤滑劑，例如硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鋅、苯甲酸鈉、乙酸鈉等；助流劑，例如膠體二氧化硅等；復合物形成劑，例如各種級別的環糊精和樹脂；釋放速度控制劑，例如羥丙基纖維素、羥甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、甲基纖維素、甲基丙烯酸甲酯、蠟等。可用的其他藥學上可接受的載體包括但不限于成膜劑、增塑劑、著色劑、調味劑、粘度調節劑、防腐劑、抗氧化劑等。在口服片劑的情況中，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉，還可以加入潤滑劑如硬脂酸鎂；在口服膠囊劑的情況中，有用的載體/稀釋劑包括乳糖、高和低分子量聚乙二醇和干玉米淀粉；當以混懸液口服給藥時，所述活性成分與乳化劑和懸浮劑混合；如果需要，可以加入某些甜味劑和/或調味劑和/或著色劑。

所述藥物組合物可以采用本領域技術人員公知的方法來制備。在制備藥物組合物時，本發明的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物與一種或多種藥學上可接受的載體相混合，任選地，與一種或多種的其他藥物活性成分相混合。固體制劑可以通過直接混合、制粒等工藝來制備。

進一步地，本發明提供本發明所述的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽、BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型、BMS-790052二苯磺酸鹽、BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型、BMS-790052一檸檬酸鹽、BMS-790052一檸檬酸鹽無定型物、BMS-790052一乙醇酸鹽、BMS-790052一乙醇酸鹽無定型物、BMS-790052二扁桃酸鹽、BMS-790052二扁桃酸鹽無定型物、BMS-790052二對氯苯磺酸鹽、BMS-790052二對氯苯磺酸鹽C晶型、BMS-790052二乙二磺酸鹽、BMS-790052二乙二磺酸鹽E晶型、BMS-790052二α-酮-戊二酸鹽、BMS-790052二α-酮-戊二酸鹽G晶型、BMS-790052二1,5-萘二磺酸鹽、BMS-790052二1,5-萘二磺酸鹽Nd晶型、BMS-790052二2-萘磺酸鹽、BMS-790052二2-萘磺酸鹽Ns晶型、BMS-790052三鹽酸鹽、BMS-790052三鹽酸鹽無定型物、BMS-790052蘋果酸鹽、BMS-790052丙二酸鹽、BMS-790052磷酸鹽、BMS-790052硫酸鹽或BMS-790052酒石酸鹽在制備用于治療和/或預防丙型肝炎病毒(HCV)感染的藥物中的用途。

進一步地，本發明提供一種治療丙型肝炎病毒(HCV)感染的方法，所述方法包括給予需要的患者治療和/或預防有效量的選自選自本發明的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物或者本發明的含BMS-790052鹽或其晶型或無定型物的藥物組合物；其中，所述本發明的BMS-790052鹽或其晶型或無定型物選自BMS-790052二對甲苯磺酸鹽、BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型、BMS-790052二苯磺酸鹽、BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型、BMS-790052一檸檬酸鹽、BMS-790052一檸檬酸鹽無定型物、BMS-790052一乙醇酸鹽、BMS-790052一乙醇酸鹽無定型物、BMS-790052二扁桃酸鹽、BMS-790052二扁桃酸鹽無定型物、BMS-790052二對氯苯磺酸鹽、BMS-790052二對氯苯磺酸鹽C晶型、BMS-790052二乙二磺酸鹽、BMS-790052二乙二磺酸鹽E晶型、BMS-790052二α-酮-戊二酸鹽、BMS-790052二α-酮-戊二酸鹽G晶型、BMS-790052二1,5-萘二磺酸鹽、BMS-790052二1,5-萘二磺酸鹽Nd晶型、BMS-790052二2-萘磺酸鹽、BMS-790052二2-萘磺酸鹽Ns晶型、BMS-790052三鹽酸鹽、BMS-790052三鹽酸鹽無定型物、BMS-790052蘋果酸鹽、BMS-790052丙二酸鹽、BMS-790052磷酸鹽、BMS-790052硫酸鹽或BMS-790052酒石酸鹽。

附圖說明

圖1根據WO2009020828A1制備的BMS-790052二鹽酸鹽晶型的XRPD圖

圖2根據WO2009020828A1制備的BMS-790052二鹽酸鹽晶型的PLM圖

圖3根據WO2009020828A1制備的BMS-790052二鹽酸鹽晶型的TGA圖

圖4根據WO2009020828A1制備的BMS-790052二鹽酸鹽晶型的DSC圖

圖5 BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的XRPD圖

圖6 BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的PLM圖

圖7 BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的TGA圖

圖8 BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的DSC圖

圖9 BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的XRPD圖

圖10 BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的PLM圖

圖11 BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的TGA圖

圖12 BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的DSC圖

圖13 BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的XRPD圖

圖14 BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的PLM圖

圖15 BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的TGA圖

圖16 BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的DSC圖

圖17實施例21片劑1～3的累積釋放度曲線圖

具體實施方式

本發明進一步參考以下實施例，所述實施例詳細描述本發明的鹽、晶型和無定型物、其制備方法和應用。對本領域技術人員顯而易見的是，對于材料和方法兩者的許多改變可在不脫離本發明范圍的情況下實施。

采集數據所用的儀器及方法：

X-射線粉末衍射(XPRD)所使用的儀器為Bruker D8Advance diffractometer，采用銅靶波長為1.54nm的Ka X-射線，在40kV和40mA的操作條件下、θ-2θ測角儀、Mo單色儀、Lynxeye探測器。儀器在使用前用金剛砂校準。采集軟件是Diffrac Plus XRD Commander。樣品在室溫條件下測試，把需要檢測的樣品放在無反射板上。詳細檢測條件如下，角度范圍：3–40°2θ，步長：0.02°2θ，速度：0.2秒/步。

偏正光顯微鏡(PLM)圖譜采自于XP-500E偏振光顯微鏡(上海長方光學儀器有限公司)。取少量粉末樣品置于載玻片上，滴加少量礦物油以更好地分散粉末樣品，蓋上蓋玻片，然后將樣品放置在XP-500E偏振光顯微鏡(上海長方光學儀器有限公司)的載物臺上，選擇合適的放大倍數觀測樣品的形貌并拍照。

差熱分析(DSC)數據采自于TA Instruments Q200MDSC，儀器控制軟件是Thermal Advantage,分析軟件是Universal Analysis。通常取1～10毫克的樣品放置于鋁盤內，以10℃/min的升溫速度在40mL/min干燥N₂的保護下將樣品從室溫升至200℃或300℃。

熱重分析(TGA)數據采自于TA Instruments Q500TGA，儀器控制軟件是Thermal Advantage，分析軟件是Universal Analysis。取5～15mg樣品放置于白金坩堝內，采用分段高分辨檢測方式，以10℃/min升溫速度在40mL/min干燥N₂保護下將樣品從室溫升至400℃。

核磁分析(NMR)數據采自于Bruker Ascend Tm 500。通常使用全頻激發，譜寬30ppm，單脈沖，30°角激發，掃描16次，數字化正交檢測，控溫298K。

釋放度數據采自于RC806溶出試驗儀，溶出方法參考《中國藥典2010版》第二部附錄X，溶出測定法第一法。參數設置為：轉速100轉/分鐘，實驗溫度37.0℃，溶出介質的用量500mL，取樣時間分別為1小時、6小時和12小時。數據的檢測和采集為高效液相分析儀器(HPLC)。釋放度篩選指標見表1。

表1釋放度篩選指標

高效液相分析(HPLC)數據采自于Waters 2695/2487，儀器控制軟件和分析軟件是Empower。采用C18色譜柱，150mm×4.6mm，柱溫25℃，波長210nm，流速1.0ml/min，進樣量5ul，運行時間15min。流動相A為含0.05％三氟乙酸的水，流動相B為乙腈，梯度如表2。

表2HPLC梯度條件

單沖壓片機，壓片壓力為5MPa，片劑直徑為10mm。

實施例中所用的各種試劑如無特別說明均為市售購買。

除非特殊注明，在以下實施例中：超聲操作采用40Khz功率超聲5分鐘；攪拌操作以300～900轉/分鐘進行磁力攪拌；離心操作的速率為6000轉/分鐘。

制備例1

根據專利文獻WO2009020828A1公開的化合物(I)晶種制備方法制備BMS-790052游離堿，作為起始原料，具體操作如下：

將60.0g(105mmol，1當量)4,4’-二(2-((S)-吡咯烷基-2-基)-1H-咪唑-5-基)聯苯、38.7g(221mmol，1當量)N-(甲氧羰基)-L-纈氨酸、44.5g(232mmol,2.2當量)1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽、2.89g(21.4mmol，0.2當量)1-羥基苯并三唑加入到300mL乙腈中，攪拌分散后加入73.3mL(420.3mmol，4當量)二異丙基乙胺，在24～30℃下攪拌約18小時。加入60mL水，加熱到50℃達約5小時。冷卻至室溫后，加入320mL乙酸乙酯和300mL水，分離得到有機層用300mL10wt％碳酸氫鈉水溶液、300mL水和200mL10wt％氯化鈉水溶液洗滌。有機層用無水硫酸鎂干燥，過濾，濃縮，得到粗產品。利用快速色譜柱法進行提純(硅膠，0～10％甲醇在二氯甲烷中)，得到BMS-790052游離堿。

核磁氫譜數據：¹H NMR(d6-DMSO,500MHz):0.86(d,6H,J＝6.5Hz),0.92(d,6H,J＝6.5Hz),1.80-2.08(m,6H),2.08-2.22(s,4H),3.55(s,6H),3.81(m,4H),4.08(t,2H,J＝8.5Hz),5.10(t,2H),7.30(d,2H,J＝8.5Hz),7.52(m,2H),7.66(d,4H,J＝8.0Hz),7.79(d,4H,J＝8.0Hz),11.78(s,2H)。

對比例1

根據專利文獻WO2009020828A1公開的化合物(I)晶種制備方法制備BMS-790052二鹽酸鹽，具體操作如下：

20℃下，將BMS-790052游離堿(3.0g)溶于100.0mL異丙醇中。加入無水鹽酸乙醇溶液(7.0mL，1.25M濃度)，攪拌反應混合物。向所述溶液中加入甲基叔丁基醚(100.0mL)，所得漿液在40℃～50℃劇烈攪拌12小時。將有結晶析出的漿液冷卻至20℃，過濾，固體在20℃風干，得到2.77g BMS-790052二鹽酸鹽白色結晶固體，產率84.0％。

XRPD圖譜如圖1所示，顯示：該鹽為結晶態固體。

PLM圖譜如圖2所示，顯示：該鹽為較小塊狀顆粒，無規則。

TGA圖譜如圖3所示，顯示：分解溫度約為236℃。

DSC圖譜如圖4所示，顯示：熔點為251℃。

室溫下，該鹽在水中的溶解度大于200毫克/毫升，5分鐘粉末溶出大于95％。

與WO2009020828A1公開的BMS-790052二鹽酸鹽晶型相比，對比例1制備的BMS-790052二鹽酸鹽樣品具有相同或相似的XRPD的2θ特征峰、XRPD圖譜和DSC圖譜。說明對比例1樣品與WO2009020828A1的BMS-790052二鹽酸鹽具有相同的晶型。

實施例1BMS-790052二對甲苯磺酸鹽的制備

室溫下，取500mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入10mL丙酮后超聲溶解，加入256mg無水對甲苯磺酸固體至BMS-790052游離堿的丙酮溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌16小時后，過濾，濾餅40℃真空干燥16小時，得521mg BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，產率71.1％。

經HPLC測定，BMS-790052二對甲苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿的實際含量為67.6％，理論含量為68.3％。檢測結果表明：BMS-790052二對甲苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿與對甲苯磺酸以摩爾比約為1:2成鹽。

實施例2BMS-790052二對甲苯磺酸鹽的制備

室溫下，取50.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入2.0mL異丙醇后超聲溶解，加入23.2mg無水對甲苯磺酸固體至BMS-790052游離堿的異丙醇溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌8小時后，過濾，濾餅40℃真空干燥16小時，得51.5mg BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，產率70.3％。

實施例2制備的樣品具有與實施例1樣品相同或相似的HPLC檢測結果(未示出)，說明實施例2樣品與實施例1樣品是相同的物質。

實施例3BMS-790052一對甲苯磺酸鹽的制備

室溫下，取200mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入4mL丙酮后超聲溶解，取51.2mg無水對甲苯磺酸，加入0.8mL丙酮后超聲溶解，將對甲苯磺酸的丙酮溶液緩慢滴加至BMS-790052游離堿的丙酮溶液中，并攪拌，反應16小時后，有固體析出，過濾，40℃真空干燥16小時，得160mg BMS-790052一對甲苯磺酸鹽，產率65.1％。

實施例4BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的制備

室溫下，取320mg本發明制備的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，加入20ml水，形成懸浮液。攪拌24小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥16小時，得285mgBMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，產率87.6％。

XRPD圖譜如圖5所示：該鹽為結晶態固體。

PLM圖譜如圖6所示：該鹽為較小顆粒，無規則。

TGA圖譜如圖7所示：120℃之前有約2.0％臺階失重，與含一個水分子失重比例相當，分解溫度約為236℃。

DSC圖譜如圖8所示：80℃之前有一寬吸熱峰，80～150℃之間的吸熱峰為脫去結合的水分子。

實施例5BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的制備

室溫下，取80mg本發明制備的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，加入8ml含水1％的丙酮(V/V)，形成懸浮液。攪拌24小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥8小時，得65.6mgBMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，產率80.7％。

實施例6BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的制備

室溫下，取50mg本發明制備的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，加入5ml水飽和的乙酸乙酯，形成懸浮液。攪拌48小時，過濾，濾餅在室溫真空干燥16小時，得42.3mgBMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，產率83.2％。

實施例7BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型的制備

室溫下，取250mg本發明制備的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽，加入25ml水飽和的甲基叔丁基醚，形成懸浮液。攪拌72小時，過濾，濾餅在室溫真空干燥24小時，得195mgBMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型，產率76.7％。

實施例5～7制備的樣品具有與實施例4樣品相同或相似的XRPD圖譜、PLM圖譜、DSC圖譜和TGA圖譜(未示出)。說明實施例5～7樣品與實施例4樣品是相同的物質。

實施例8BMS-790052二苯磺酸鹽的制備

室溫下，取250.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入5mL丙酮溶解，加入117.5mg苯磺酸至BMS-790052游離堿的丙酮溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌16小時后，過濾，濾餅40℃真空干燥16小時，得275mg BMS-790052二苯磺酸鹽，產率77.0％。

經HPLC測定，BMS-790052二苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿的實際含量為70.3％，理論含量為70.1％。檢測結果表明：BMS-790052二苯磺酸鹽中BMS-790052游離堿與苯磺酸以摩爾比約為1:2成鹽。

實施例9BMS-790052二苯磺酸鹽的制備

室溫下，取50.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入2mL異丙醇溶解，取21.4mg苯磺酸，加入0.2mL異丙醇后超聲溶解，將苯磺酸的異丙醇溶液緩慢滴加至BMS-790052游離堿的異丙醇溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌8小時，過濾，濾餅40℃真空干燥16小時，得52.3mg BMS-790052二苯磺酸鹽，產率73.3％。

實施例9制備的樣品具有與實施例8樣品相同或相似的HPLC檢測結果(未示出)。說明實施例9樣品與實施例8樣品是相同的物質。

實施例10BMS-790052一苯磺酸鹽的制備

室溫下，取50.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入2mL異丙醇溶解，取12.7mg苯磺酸，加入0.2mL異丙醇后超聲溶解，將苯磺酸的異丙醇溶液緩慢滴加至BMS-790052游離堿的異丙醇溶液中，攪拌8小時后析出固體，過濾，濾餅40℃真空干燥16小時，得45.1mg BMS-790052一苯磺酸鹽，產率74.3％。

實施例11BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的制備

室溫下，取180mg本發明制備的BMS-790052二苯磺酸鹽，加入12ml水，形成懸浮液。攪拌10小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥16小時，得153mg BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型，產率85.0％。

XRPD圖譜如圖9所示：該鹽為結晶態固體。

PLM圖譜如圖10所示：該鹽為較大塊狀顆粒，不規則。

TGA圖譜如圖11所示：200℃之前有約8.0％臺階失重，分解溫度約為251℃。

DSC圖譜如圖12所示：120℃之前有一寬吸熱峰，120～180℃之間有一吸熱峰。

實施例12BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型的制備

室溫下，取300mg本發明制備的BMS-790052二苯磺酸鹽，加入1ml水，形成懸浮液。攪拌24小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥16小時，得272mg BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型，產率90.7％。

實施例12制備的樣品具有與實施例11樣品相同或相似的XRPD圖譜、PLM圖譜、DSC圖譜和TGA圖譜(未示出)。說明實施例12樣品與實施例11樣品是相同的物質。

實施例13BMS-790052三鹽酸鹽的制備

室溫下，取500.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入10mL乙酸乙酯溶解，加入0.56mL 12mol/L的濃鹽酸至BMS-790052游離堿的乙酸乙酯溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌3小時后，過濾，40℃真空干燥16小時，得485.8mg BMS-790052三鹽酸鹽，產率84.6％。

經HPLC測定，BMS-790052三鹽酸鹽中BMS-790052游離堿的實際含量為87.6％，理論含量為87.1％。檢測結果表明：BMS-790052三鹽酸鹽中BMS-790052游離堿與鹽酸以摩爾比約為1:3成鹽。

實施例14BMS-790052三鹽酸鹽的制備

室溫下，取250.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入25mL乙酸異丙酯溶解，加入10mL0.1mol/L的鹽酸至BMS-790052游離堿的乙酸異丙酯溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌10小時后，過濾，40℃真空干燥16小時，得233.5mg BMS-790052三鹽酸鹽，產率81.4％。

實施例15BMS-790052三鹽酸鹽的制備

室溫下，取450.0mg制備例1制備的BMS-790052游離堿，加入9mL乙酸乙酯溶解，加入0.61mL6mol/L鹽酸至BMS-790052游離堿的乙酸乙酯溶液中，形成漿液并攪拌，攪拌5小時后，過濾，40℃真空干燥16小時，得427.6mg BMS-790052三鹽酸鹽，產率82.8％。

實施例14、15制備的樣品具有與實施例13樣品相同或相似的HPLC檢測結果(未示出)。說明實施例14、15樣品與實施例13樣品是相同的物質。

實施例16BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的制備

室溫下，取400mg本發明制備的BMS-790052三鹽酸鹽，加入8ml異丙醇，形成懸浮液。攪拌8小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥16小時，得379.3mg BMS-790052三鹽酸鹽無定型物，產率94.8％。

XRPD圖譜如圖13所示，該鹽為無定型物。

PLM圖譜如圖14所示，顯示：該鹽細小顆粒，無規則。

TGA圖譜如圖15所示，顯示：100℃之前有約5.1％緩慢失重，分解溫度約為171℃。

DSC圖譜如圖16所示，顯示：140℃之前有一寬吸熱峰。

實施例17BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的制備

室溫下，取200mg本發明制備的BMS-790052三鹽酸鹽，加入5ml乙酸乙酯，形成懸浮液。攪拌16小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥16小時，得185.4mg BMS-790052三鹽酸鹽無定型物，產率92.7％。

實施例18BMS-790052三鹽酸鹽無定型物的制備

室溫下，取300mg本發明制備的BMS-790052三鹽酸鹽，加入30ml甲基叔丁基醚，形成懸浮液。攪拌48小時，過濾，濾餅在40℃真空干燥16小時，得256.4mg BMS-790052三鹽酸鹽無定型物，產率85.5％。

實施例17、18制備的樣品具有與實施例16樣品相同或相似的XRPD圖譜、PLM圖譜、DSC圖譜和TGA圖譜(未示出)。說明實施例17、18樣品與實施例16樣品是相同的物質。

實施例19片劑配方及其制備

本發明的片劑配方見表3和表4。

表3片劑配方一

片劑配方一的制備方法：取處方量的API、羥丙甲纖維素(K4M)、預膠化淀粉、一水乳糖、微晶纖維素和硬脂酸鎂混合均勻后置于壓片機中壓片。

表4片劑配方二

片劑配方二的制備方法：取處方量的API、羥丙甲纖維素(E5)、一水乳糖、微晶纖維素和硬脂酸鎂混合均勻后置于壓片機中壓片。

實施例20溶出液的穩定性試驗

以水為溶出介質，溶出試驗儀的參數設置為溫度37.0℃、轉速100轉/分鐘，將實施例19制備的片劑分別置于500mL水中，于1小時、6小時和12小時進行溶出液的取樣。溶出液樣品經0.45μm濾膜過濾后，在室溫下放置24小時，每組配方的片劑平行做3個，觀察溶出液的穩定性情況。

試驗結果為：片劑3(含已知的BMS-790052二鹽酸鹽晶型)和片劑2(含BMS-790052硫酸鹽)的溶出液樣品溶液均變渾濁，渾濁液離心后固體HPLC含量測定確認為BMS-790052游離堿；而片劑1和4(分別含本發明的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型、BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型)的溶出液澄清，未觀察到渾濁現象。

試驗結果表明：與已知BMS-790052二鹽酸鹽晶型制備的片劑相比，由本發明BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型、BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型制備的片劑，其水溶液的穩定性高，適合藥物制劑應用。

實施例21片劑的累積釋放度試驗

以模擬胃液為溶出介質，溶出試驗儀的參數設置為溫度37.0℃、轉速100轉/分鐘，將實施例19制備的片劑1～4分別置于500mL模擬胃液中，于1小時、6小時和12小時進行溶出液的取樣。HPLC檢測溶出液樣品的溶出藥物濃度(μg/ml)，再以該片劑中BMS-790052游離堿理論100％釋放濃度30μg/ml為標準，計算該片劑在取樣點的累積釋放度(％)，每組配方的片劑做6個平行樣。

片劑1～3的累積釋放度數據見表5。

片劑1～3的累積釋放度曲線見圖17。通過表5和圖17的累積釋放度結果與表1釋放度篩選指標對照，可以看出，在模擬胃液中，片劑3(含已知的BMS-790052二鹽酸鹽晶型)與片劑2(含BMS-790052硫酸鹽)溶出過快，在6小時的累積釋放度已達85％以上，未能達到緩釋效果，而片劑1(含本發明的BMS-790052二對甲苯磺酸鹽一水合物晶型)則能達到緩釋效果，適合緩釋制劑應用。

同樣地，通過片劑4的累積釋放度試驗，片劑4的累積釋放度數據見表5。表明，片劑4(含本發明的BMS-790052二苯磺酸鹽B晶型)能達到緩釋效果，適合緩釋制劑應用。

表5片劑1～4的累積釋放度

以上所述，僅為本發明的具體實施方式，但本發明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本領域的技術人員在本發明所揭露的技術范圍內，可不經過創造性勞動想到的變化或替換，都應涵蓋在本發明的保護范圍之內。