本發明涉及一種新的芳香族酰胺類衍生物及其可藥用的鹽或含有其的藥物組合物、及其制備方法。本發明還涉及所述類衍生物及其可藥用的鹽或含有其的藥物組合物在制備治療劑，bruton酪氨酸激酶抑制劑，和在制備治療和/或預防腫瘤與炎癥等疾病的藥物中的用途。
背景技術：
：bruton酪氨酸激酶(btk)是一種重要的介導細胞信號轉導的酶，存在于漿細胞，包括b細胞中。b細胞是通過b細胞受體(bcr)被活化的，而btk在bcr介導的信號通路中起了決定性的作用。b細胞上的bcr被活化后，引起btk的激活，導致下游的磷脂酶c(plc)濃度增加，并激活ip3和dag信號通路。這一信號通路可以促進細胞的增殖、粘附和存活，在b細胞淋巴瘤的發展過程中起重要的作用。btk突變體在人群中的存在證明了btk可以成為藥物靶點。性聯無丙種球蛋白血癥(xla)是一種罕見的遺傳疾病，存在于1/250,000的男性中。在這種疾病中，btk的功能被抑制，從而導致了b細胞的產生或成熟受阻。患有xla疾病的男性，體內基本沒有b細胞，循環抗體也很少，容易出現嚴重甚至致命的感染。由此可見，btk在b細胞的生長和分化中起著極其重要的作用。btk抑制劑通過抑制btk的活性，可以抑制b淋巴瘤細胞的增殖，破壞瘤細胞的粘附，促進瘤細胞的凋亡，使btk在b細胞有關的癌癥中成為令人注目的藥物靶點，尤其對b細胞淋巴瘤和白血病，比如非霍奇金淋巴瘤(non-hodgkin′slymphoma，nhl)、慢性淋巴細胞白血病(chroniclymphocyticleukemia，cll)、和抗復發性或難治性套細胞淋巴瘤(mantlecelllymphoma，mcl)等。目前市場上唯一的具有btk特異性抑制的藥物是pharmacyclics/jnj的ibrutinib。ibrutinib是一種非可逆的小分子btk抑制劑，對治療mcl、cll、wm有非常明顯的療效，而且安全。其它進入臨床針對細胞淋巴瘤的btk抑制劑還有celgene公司的cc-292、acerta公司的acp-196、ono公司的ono-4059、beigene公司的bgb-3111等等。btk抑制劑除了可以抗b細胞淋巴瘤和白血病，還可以抑制b細胞自身抗體和細胞因子的產生。在自身免疫性疾病中，b細胞呈遞自身抗原，促進t細胞活化分泌致炎癥因子造成組織損傷，同時又激活b細胞產生大量抗體，觸發自身免疫反應。t和b細胞相互作用形成正反饋調節鏈，導致自身免疫反應失控，加重組織病理損傷。研究顯示，體內存在著調節性b細胞，可通過分泌白細胞介素10(il-10)或轉化生長因子β1(tgf-β1)及其他機制，負向調控免疫應答，抑制免疫介導的炎癥反應。所以，b細胞可以作為自身免疫性疾病，比如類風濕性關節炎(rheumatoidarthritis，ra)、系統性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus，sle)、過敏性疾病(例如食道炎、eosoniphilicesophagitis)等的藥物靶點。當前市場上還沒有用于免疫性疾病的btk特異抑制劑，但有幾個正處于臨床階段，比如celgene公司的cc-292、acerta公司的acp-196、hanmi的hm-71224、principia的prn-1008、merckserono的m-2951和pharmacyclics的一個化合物。全球非霍奇金淋巴瘤的市場將從2007年的33億美元增長到2017年的47億美元(年均增長3.7％)。作為基于b細胞抗體的生物制劑，在nhl治療領域的銷售額將從2007年的28億美元增長到2017年的32億美元。但是作為一種生物制劑，和lymphostatb，在大范圍b細胞清除方面都有不足，也沒有合適的口服用量。針對自身免疫性疾病，如抗類風濕類口服藥物的潛在市場更大。現在基于抗腫瘤壞死因子(tnf)的藥物，市場是50億美元，不過目前基于抗tnf的藥物，例如和是特異性針對t細胞的，都采用皮下注射的方式。針對類風濕性關節炎治療的市場，從2009年到2017年將增長約兩倍，達到134億美元。用于其他疾病治療，如紅斑狼瘡等的潛在市場也非常大。因此btk抑制劑具有十分廣闊的前景。由于btk在多個信號通路中所起的重要作用，btk抑制劑的開發吸引了眾多生物制藥公司的關注，目前已公開了一系列的btk抑制劑的專利申請，其中包括wo2007087068、wo2010126960、wo2011019780、wo2011090760、wo2012135801、wo2012158764、wo2013060098、wo2013081016、wo2013010869、wo2013113097、cn103113375、wo2014068527、wo2014125410、wo2014173289、wo2013118986、wo2015017502和wo2015048689等，但仍需要開發新的具有更好藥效的化合物。經過不斷努力，本發明設計具有通式(i)所示的結構的化合物，并發現具有此類結構的化合物表現出優異的效果和作用。技術實現要素：本發明的目的在于提供一種通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽：其中：環a和b1各自獨立地選自芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基任選被一個或多個g1所取代；b2獨立地選自h、c3-8環基、3-8元雜環基、芳基或雜芳基，其中所述環基、雜環基、芳基或雜芳基任選被一個或多個g2所取代；l1獨立地選自-c0-2烷基-、-cr2r3-、-c1-2烷基(r1)(oh)-、-c(o)-、-cr1r2o-、-ocr1r2-、-scr1r2-、-cr1r2s-、-nr1-、-nr1c(o)-、-c(o)nr1-、-nr1conr2-、-cf2-、-o-、-s-、-s(o)m-、-nr1s(o)m-或-s(o)mnr1-；l2獨立地選自-c0-4烷基-、-c(o)-、-o-、-nr3-、-nr3c(o)-或-nr3s(o)m-；x獨立地選自c0-4烷基、c3-8環基、3-8元雜環基、芳基或雜芳基，其中所述烷基、環基、雜環基、芳基或雜芳基任選被一個或多個g3所取代；y獨立地選自-c(o)-、-nr4c(o)-、-s(o)m-或-nr4s(o)m-；r獨立地選自h、d、烷基、環基、雜環基、芳基或雜芳基，其中所述烷基、環基、雜環基、芳基或雜芳基任選被一個或多個g4所取代；r1、r2、r3和r4各自獨立地選自h、d、c1-8烷基、c3-8環基、3-8元雜環基、芳基或雜芳基，其中所述烷基、環基、雜環基、芳基或雜芳基任選被一個或多個g5所取代；g1、g2、g3、g4和g5各自獨立地選自h、d、鹵素、氰基、烷基、烯基、炔基、環基、雜環基、芳基、雜芳基、-or5、-oc(o)nr5r6、-c(o)or5、-c(o)nr5r6、-c(o)r5、-nr5r6、-nr5c(o)r6、-nr5c(o)nr6r7、-s(o)mr5或-nr5s(o)mr6，其中所述烷基、烯基、炔基、環基、雜環基、芳基或雜芳基任選被一個或多個選自d、鹵素、氰基、c1-8烷基、c3-8環烷基、3-8元雜環基、-or7、-oc(o)nr7r8、-c(o)or7、-c(o)nr7r8、-c(o)r7、-nr7r8、-nr7c(o)r8、-nr7c(o)nr8r9、-s(o)mr7、-nr7s(o)mr8的取代基所取代；r5、r6、r7、r8和r9各自獨立地選自h、c1-6烷基、c1-6雜烷基、c3-8環基、3-8元單環雜環基、單環雜芳基或單環芳基；且m為1或2。在本發明的一個實施方案中，一種通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，其為通式(ii)所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽：其中：環b為z1和z2各自獨立地選自ch或n；z3為o或s；b1、b2、l1、l2、x、y和r的定義如權利要求1中所述。在本發明的另一個實施方案中，一種通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，其為通式(iii)所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽：其中：b1和b2為苯環或六元雜芳環；環b、l2、x、y、r、g1和g2的定義如權利要求1-2中所述。在本發明的另一個實施方案中，一種通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，其為通式(iv)所述的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽：其中：p1和p2各自獨立地選自c(ra)或n；ra為h或烷基；n和o各自獨立地選自0、1或2；環b、b1、b2、l2、y和r的定義如權利要求1-3中所述。在本發明的另一個實施方案中，一種通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，其中其中r獨立地選自h、d、烷基或雜烷基。本發明的典型化合物包括，但并不限于：或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽。本發明進一步涉及一種藥物組合物，其含有治療有效量的通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽及藥學上可接受的載體，稀釋劑和賦形劑。本發明的另一方面涉及通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，或包含其的藥物組合物在制備bruton酪氨酸激酶抑制劑中的用途。本發明的另一方面涉及通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，或包含其的藥物組合物在制備治療和/或預防腫瘤與炎癥等疾病的藥物中的用途。本發明還涉及一種治療和/或預防腫瘤與炎癥等疾病的方法，該方法包括給予需要治療的患者治療有效量的通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽，或包含其的藥物組合物。本發明的另一方面涉及作為治療和/或預防腫瘤與炎癥等疾病的藥物的通式(i)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、其混合物形式、及其可藥用的鹽。具體實施方式除非有相反陳述，否則下列用在說明書和權利要求書中的術語具有下述含義。在本文中使用的表示方式“cx-y”表示碳原子數的范圍，其中x和y均為整數，例如c3-8環基表示具有3-8個碳原子的環基，-c0-2烷基表示具有0-2個碳原子的烷基，其中-c0烷基是指化學單鍵。“烷基”指飽和的脂族烴基團，包括1至20個碳原子的直鏈和支鏈基團，例如可以是1至18個碳原子、1至12個碳原子、1至8個碳原子、1至6個碳原子或1至4個碳原子的直鏈和支鏈基團。在本文中“烷基”可以是一價的、二價的或三價基團。非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、及其各種支鏈異構體等。非限制性實施例還包括亞甲基、次甲基、亞乙基、次乙基、亞丙基、次丙基、亞丁基、次丁基及其各種支鏈異構體。烷基可以是任選取代的或未取代的。“環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包括3至12個環原子，例如可以是3至12個、3至10個或3至6個環原子，或者可以是3、4、5、6元環。單環環基的非限制性實施例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等。環基可以是任選取代的或未取代的。“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包括3至20個環原子，例如可以是3至16個、3至12個、3至10個、3至6個或5至6個環原子，其中一個或多個環原子選自氮、氧或s(o)m(其中m是整數0至2)的雜原子，但不包括-o-o-、-o-s-或-s-s-的環部分，其余環原子為碳。優選包括3至12個環原子，其中1～4個是雜原子，更優選雜環烷基環包含3至10個環原子，最優選5元環或6元環，其中1～4個是雜原子，更優選1～3個是雜原子，最優選1～2個是雜原子。單環雜環基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌嗪基和氮雜環丁烷基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。“螺雜環基”指5至20元，單環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子選自氮、氧或s(o)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其余環原子為碳。這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共扼的π電子系統。優選為6至14元，更優選為7至10元。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基，優選為單螺環烷基和雙螺環烷基。更優選為4元/4元、4元/5元、4元/6元、5元/5元或5元/6元單螺環烷基。螺環烷基的非限制性實施例包含“稠雜環基”指5至20元，系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共扼的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或s(o)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其余環原子為碳。優選為6至14元，更優選為7至10元。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環烷基，優選為雙環或三環，更優選為5元/5元或5元/6元雙環稠雜環基。稠雜環基的非限制性實施例包含所述雜環基環可以稠合于芳基、雜芳基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，非限制性實施例包含：等。雜環基可以是任選取代的或未取代的。“芳基”指6至14元全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，具有共扼的π電子體系的多環(即其帶有相鄰對碳原子的環)基團，優選為6至10元，例如苯基和萘基，最優選苯基。所述芳基環可以稠合于雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，非限制性實施例包含：芳基可以是取代的或未取代的。“雜芳基”指包含1至4個雜原子，5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子包括氧、硫和氮。優選為5至10元。更優選雜芳基是5元或6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、n-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基等，所述雜芳基環可以稠合于芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，非限制性實施例包含：雜芳基可以是任選取代的或未取代的。“鹵素”指氟、氯、溴或碘。“氰基”指-cn。“任選”或“任選地”意味著隨后所描述地事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“任選被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，優選為最多5個，更優選為1～3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(通過實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的氨基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。“藥物組合物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。藥物組合物的目的是促進對生物體的給藥，利于活性成分的吸收進而發揮生物活性。實施例本發明通式(i)所述的化合物或其可藥用的鹽的制備，可通過以下實施例中所述的示例性方法以及本領域技術人員所用的相關公開文獻操作完成，但這些實施例并非限制著本發明的范圍。化合物的結構是通過核磁共振(nmr)或質譜(ms)來確定的。nmr的測定是用brukeravance-400或varianoxford-300核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdcl3)、氘代甲醇(cd3od)，內標為四甲基硅烷(tms)，化學位移是以10-6(ppm)作為單位給出。ms的測定用agilentsqd(esi)質譜儀(生產商：agilent，型號：6110)或shimadzusqd(esi)質譜儀(生產商：shimadzu，型號：2020)。hplc的測定使用安捷倫1200dad高壓液相色譜儀(sunfircc18，150×4.6mm，5μm，色譜柱)和waters2695-2996高壓液相色譜儀(giminic18150×4.6mm，5μm色譜柱)。薄層層析硅膠板使用青島海洋gf254硅膠板，薄層色譜法(tlc)使用的硅膠板采用的規格是0.15mm～0.2mm，薄層層析分離純化產品采用的規格是0.4mm～0.5mm硅膠板。柱層析一般使用青島海洋200～300目硅膠為載體。本發明的已知的起始原料可以采用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自abcrgmbh&co.kg，acrosorganics，aldrichchemicalcompany，韶遠化學科技(accelachembioinc)、北京耦合化學品等公司。實施例中如無特殊說明，反應均在氬氣氛或氮氣氛下進行。氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1l容積的氬氣或氮氣氣球。氫氣氛是指反應瓶連接一個約1l容積的氫氣氣球。加壓氫化反應使用北京佳維科創科技有限公司gcd-500g高純氫氣發生器和blt-2000中壓氫化儀。氫化反應通常抽真空，充入氫氣，反復操作3次。微波反應使用cemdiscover-sp型微波反應器。實施例中如無特殊說明，反應的溫度為室溫，溫度范圍是20℃-30℃。實施例中的反應進程的監測采用薄層色譜法(tlc)，反應所使用的展開劑的體系有a：二氯甲烷和甲醇體系；b：石油醚和乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節。純化化合物采用的柱層析的洗脫劑的體系和薄層色譜法的展開劑的體系包括a：二氯甲烷和甲醇體系；b：石油醚和乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和酸性或堿性試劑等進行調節。合成方法：化合物可根據下面經典的酰胺耦合反應得到，胺前體可根據專利wo2015048662的合成方法得到。實施例16-(1-(丁-2-炔酰)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺第一步2，6-二氯尼克酰胺將化合物2，6-二氯尼古丁腈1a(1.73g，10mmol)、濃硫酸(10ml)和水(2ml)混合，加熱到90℃，攪拌1小時。冷卻至室溫，將反應混合物傾倒至冰水浴中，用氨水調節ph值至8。過濾，濾餅用水洗滌，干燥后得到目標產物2，6-二氯尼克酰胺1b(1.4g，固體)，產率：73％。msm/z(esi)：191[m+1]第二步6-氯-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺將化合物2，6-二氯尼克酰胺1b(0.678g，3.5mmol)、(4-苯氧基苯基)硼酸(0.835g，3.9mmol)、碳酸銫(0.977g，7.1mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(0.324g，0.35mmol)、水(4ml)和1，4-二氧六環(15ml)混合，除氧，氬氣保護下加熱回流16小時。冷卻至室溫，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)得到目標產物6-氯-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺1c(0.611g，固體)，產率：53％。msm/z(esi)：325[m+1]第三步5-氨基甲酰-6-(4-苯氧基苯基)-5′，6′-二氫-[2，4′-聯吡啶]-1′(2′h)-羧酸叔丁酯將化合物6-氯-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺1c(0.162g，0.50mmol)、(1-(叔丁氧基羰基)-1，2，3，6-四氫吡啶-4-基)硼酸(0.232g，0.75mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.115g，0.1mmol)、碳酸鉀(0.207g，1.5mmol)、乙二醇二甲醚(10ml)和水(2ml)混合后，加熱到90℃，攪拌5小時。冷卻至室溫，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇＝700/1)，得到目標產物5-氨基甲酰-6-(4-苯氧基苯基)-5′，6′-二氫-[2，4′-聯吡啶]-1′(2′h)-羧酸叔丁酯1d(0.21g，固體)，產率：89％。msm/z(esi)：472[m+1]第四步4-(5-氨基甲酰-6-(4-苯氧基苯基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯將化合物5-氨基甲酰-6-(4-苯氧基苯基)-5′，6′-二氫-[2，4′-聯吡啶]-1′(2′h)-羧酸叔丁酯1d(0.21g，0.45mmol)、鈀炭(10mg)和乙酸乙酯(10ml)混合，除氧，氫氣氣氛下室溫攪拌16小時。減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇＝70/1)，得到目標產物4-(5-氨基甲酰-6-(4-苯氧基苯基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯1e(0.20g，固體)，產率：94％。msm/z(esi)：474[m+1]第五步2-(4-苯氧基苯基)-6-(哌啶-4-基)尼克酰胺將化合物4-(5-氨基甲酰-6-(4-苯氧基苯基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯1e(0.215g，0.45mmol)、三氟乙酸(2ml)和二氯甲烷(5ml)混合，室溫下攪拌1小、時。減壓脫溶，殘余物溶解于二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇＝70/1到5/1)，得到目標產物2-(4-苯氧基苯基)-6-(哌啶-4-基)尼克酰胺1f(0.12g，固體)，產率：71％。msm/z(esi)：374[m+1]第六步6-(1-(丁-2-炔酰)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺將化合物2-(4-苯氧基苯基)-6-(哌啶-4-基)尼克酰胺1f(100mg，0.27mmol)、丁-2-炔酸(34mg，0.405mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n，n，n′，n′-四甲基脲六氟磷酸酯(114mg，0.3mmol)、三乙胺(55mg，0.54mmol)和n，n-二甲基甲酰胺(10ml)混合，在常溫下攪拌3小時。減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇＝50/1)，得到目標產物6-(1-(丁-2-炔酰)哌啶-4-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺1(54mg，固體)，產率：46％。msm/z(esi)：440[m+1]1hnmr(400mhz，cd3od)δ7.87(d，j＝7.9hz，1h)，7.79-7.67(m，2h)，7.45-7.29(m，3h)，7.17(t，j＝7.4hz，1h)，7.12-7.00(m，4h)，4.59(dd，j＝18.1，15.6hz，2h)，3.38(d，j＝2.8hz，1h)，3.13(tt，j＝11.8，3.6hz，1h)，2.91(td，j＝12.9，3.0hz，1h)，2.14-1.97(m，5h)，1.82(m，2h)。實施例22-(4-苯氧基苯基)-6-(1-丙炔酰哌啶-4-基)尼克酰胺參照實施例1的操作步驟合成實施例2，但在第六步中用丙炔酸取代丁-2-炔酸。msm/z(esi)：426[m+1]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.08(d，j＝7.9hz，1h)，7.70(d，j＝8.6hz，2h)，7.40(t，j＝7.9hz，2h)，7.28-7.16(m，2h)，7.10(d，j＝8.3hz，4h)，5.54(d，j＝61.1hz，2h)，4.73(d，j＝13.3hz，1h)，4.56(d，j＝13.7hz，1h)，3.31(t，j＝11.7hz，1h)，3.18(d，j＝19.3hz，2h)，2.86(td，j＝13.0，2.7hz，1h)，2.11(dd，j＝23.9，13.5hz，2h)，2.00-1.74(m，2h)。實施例36-(1-(丁-2-炔酰)吡咯烷-3-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺參照實施例1的操作步驟合成實施例3，但在第三步中用叔-丁基3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二噁硼戊環-2-基)-2，5-二氫-1h-吡咯-1-羧酸酯取代(1-(叔丁氧基羰基)-1，2，3，6-四氫吡啶-4-基)硼酸。msm/z(esi)：426[m+1]1hnmr(400mhz，cdcl3)δ8.05(t，j＝7.9hz，1h)，7.71(dd，j＝8.5，5.6hz，2h)，7.44-7.34(m，2h)，7.27-7.15(m，2h)，7.13-6.99(m，5h)，5.77-5.43(m，2h)，4.16(dd，j＝10.8，7.5hz，0.5h)，4.03-3.92(m，2h)，3.76(ddd，j＝26.2，15.4，7.6hz，3h)，3.56(dt，j＝12.4，8.0hz，0.5h)，2.46-2.29(m，2h)，2.01(d，j＝13.1hz，3h)，1.49(dd，j＝16.2，9.7hz，1h)。實施例46-(4-(丁-2-炔酰)哌嗪-1-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺第一步4-(6-氯-5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯將化合物2，6-二氯尼古丁腈1a(0.519g，3.0mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(0.558g，3.0mmol)、碳酸鉀(0.636g，6.0mmol)和乙醇(30ml)混合，加熱至80℃，回流攪拌3小時。冷卻至室溫，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝20/1到1/1)得到目標產物4-(6-氯-5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯4a(0.59g，固體)，產率：60％。msm/z(esi)：323[m+1]第二步2-氯-6-(哌嗪-1-基)尼克酰胺利用4-(6-氯-5-氰基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯4a(0.60g，1.86mmol)為原料，參照實施例1中1b的合成方法合成，得到標題產物2-氯-6-(哌嗪-1-基)尼克酰胺4b(0.42g，固體)，產率：94％。msm/z(esi)：241[m+1]第三步2-(4-苯氧基苯基)-6-(哌嗪-1-基)尼克酰胺利用2-氯-6-(哌嗪-1-基)尼克酰胺4b(0.29g，1.2mmol)為原料，參照實施例1中1c的合成方法合成，得到標題產物2-(4-苯氧基苯基)-6-(哌嗪-1-基)尼克酰胺4c(0.26g，固體)，產率：58％。msm/z(esi)：375[m+1]第四步6-(4-(丁-2-炔酰)哌嗪-1-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺利用2-(4-苯氧基苯基)-6-(哌嗪-1-基)尼克酰胺4c(80mg，0.21mmol)為原料，參照實施例1中1的合成方法合成，得到標題產物6-(4-(丁-2-炔酰)哌嗪-1-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺4(28mg，固體)，產率：30％。msm/z(esi)：441[m+1]1hnmr(400mhz，cd3od)δ7.78(d，j＝8.7hz，1h)，7.73-7.61(m，2h)，7.46-7.33(m，2h)，7.16(t，j＝7.4hz，1h)，7.13-6.97(m，4h)，6.83(d，j＝8.7hz，1h)，3.92(dd，j＝6.4，3.9hz，2h)，3.79(dd，j＝6.3，4.0hz，2h)，3.73(s，1h)，2.08(s，3h)。實施例56-(1-(丁-2-炔酰)吡咯烷-3-基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺參照實施例4的操作步驟合成實施例5，但在第一步中用叔-丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯取代哌嗪-1-羧酸叔丁酯。msm/z(esi)：441[m+1]1hnmr(400mhz，cd3od)δ7.70(ddd，j＝11.7，9.5，5.7hz，3h)，7.45-7.30(m，2h)，7.15(t，j＝7.4hz，1h)，7.03(ddd，j＝9.5，6.7，1.9hz，4h)，6.47(d，j＝8.7hz，1h)，4.57-4.44(m，1h)，3.82(dd，j＝11.1，6.3hz，1h)，3.65(ddd，j＝20.2，12.1，4.4hz，2h)，3.48(dd，j＝11.1，4.4hz，1h)，2.31(dd，j＝13.4，6.2hz，1h)，2.13-2.01(m，1h)，1.97(s，3h)。實施例66-((1-(丁-2-炔酰)吡咯烷-3-基)氨基)-2-(4-苯氧基苯基)尼克酰胺參照實施例4的操作步驟合成實施例6，但在第一步中用叔-丁基3-氨基吡咯烷-1-羧酸酯取代哌嗪-1-羧酸叔丁酯。msm/z(esi)：441[m+1]1hnmr(400mhz，cd3od)δ7.71-7.58(m，3h)，7.39(t，j＝7.7hz，2h)，7.16(dd，j＝7.4，6.5hz，1h)，7.10-6.96(m，4h)，6.52(dd，j＝8.6，5.3hz，1h)，4.61(dd，j＝6.8，3.3hz，1h)，4.07(dd，j＝11.3，5.9hz，1h)，3.93-3.72(m，2h)，3.70-3.37(m，2h)，2.39-2.24(m，1h)，2.11-1.94(m，4h)。實施例71-(1-(丁-2-炔酰)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲酰胺第一步叔-丁基3-((甲磺酰)氧代)吡咯烷-1-羧酸酯將化合物叔-丁基3-羥基吡咯烷-1-羧酸酯7a(561mg，3.0mmol)、甲基磺酰氯(410mg，3.6mmol)、三乙胺(606mg，6.0mmol)和二氯甲烷(50ml)混合，室溫下攪拌4小時。此混合物用50ml二氯甲烷稀釋后，依次用飽和氯化銨溶液(20ml)和飽和食鹽水(20ml×2)洗滌。將有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓脫溶得到目標產物叔-丁基3-((甲磺酰)氧代)吡咯烷-1-羧酸酯7b(790mg)，產率：99％。產物不經純化直接用于下一步反應。msm/z(esi)：266[m+1]第二步3-羰基-3-(4-苯氧基苯基)丙酸乙酯將混合物碳酸二乙酯(8.8g，75mmol)、氫化鈉(60％，3.0g，75mmol)和甲苯(50ml)加熱到90℃，然后加入化合物1-(4-苯氧基苯基)乙酮7c(6.36g，30mmol)的甲苯(50ml)溶液，將上述反應混合物回流攪拌50分鐘。冷卻至室溫，加入50ml水，減壓除去甲苯，殘余物用100ml水稀釋，用二氯甲烷萃取(100ml×3)。將有機相合并后用無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝50/1)，得到目標產物3-羰基-3-(4-苯氧基苯基)丙酸乙酯7d(5.54g)，產率：65％。msm/z(esi)：285[m+1]第三步3-乙氧基-2-(4-苯氧基苯甲酰)丙烯酸乙酯將化合物3-羰基-3-(4-苯氧基苯基)丙酸乙酯7d(5.54g，19.5mmol)、原甲酸三乙酯(11ml，66mmol)和醋酸酐(28ml)混合后，加熱到120℃，攪拌4小時。減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝50/1)，得到目標產物3-乙氧基-2-(4-苯氧基苯甲酰)丙烯酸乙酯7e(2.6g)，產率：25％。msm/z(esi)：341[m+1]第四步3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸乙酯將化合物3-乙氧基-2-(4-苯氧基苯甲酰)丙烯酸乙酯7e(2.6g，7.6mmol)、水合肼(0.39g，7.6mmol)和乙醇(50ml)混合后，加熱到85℃，攪拌21小時。冷卻至室溫，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)，得到目標產物3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸乙酯7f(2.0g)，產率：85％。msm/z(esi)：309[m+1]第五步乙基1-(1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸酯將化合物3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸乙酯7f(308mg，1.0mmol)、3-((甲磺酰)氧代)叔-丁基3-((甲磺酰)氧代)吡咯烷-1-羧酸酯7b(477mg，1.8mmol)、碳酸銫(650mg，2.0mmol)和無水n，n-二甲基甲酰胺(20ml)混合，加熱到100℃，攪拌16小時。冷卻至室溫，減壓脫溶，殘余物加飽和碳酸氫鈉(30ml)，用二氯甲烷(50ml×3)萃取。有機相合并后用無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)，得到目標產物乙基1-(1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸酯7g(334mg)，產率：70％。msm/z(esi)：478[m+1]第六步1-(1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸將混合物乙基1-(1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸酯7g(334mg，0.7mmol)、氫氧化鋰水溶液(1n，7ml，7.0mmol)和乙醇(20ml)加熱到75℃，攪拌1小時。冷卻至室溫，減壓脫溶，殘余物用5ml水稀釋，用2n鹽酸酸化至ph為6。過濾，得到的固體用15ml水洗滌，真空下干燥得到目標產物1-(1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸7h(230mg，固體)，產率：73％。msm/z(esi)：450[m+1]第七步叔-丁基3-(4-氨基甲酰-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-1-基)吡咯烷-1-羧酸酯用氨氣向化合物1-(1-(叔-丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-羧酸7h(230mg，0.51mmol)、2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n，n，n′，n′-四甲基脲六氟磷酸酯(232mg，0.61mmol)和無水n，n-二甲基甲酰胺(10ml)的混合物中鼓泡30分鐘，得到的反應混合物在室溫下繼續攪拌30分鐘。用30ml乙酸乙酯稀釋，依次用水(20ml×2)和飽和食鹽水(20ml×2)洗滌。有機相用無水硫酸鈉干燥，過濾除去干燥劑，減壓脫溶，殘余物用硅膠柱層析純化(二氯甲烷/甲醇＝50/1)，得到目標產物叔-丁基3-(4-氨基甲酰-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-1-基)吡咯烷-1-羧酸酯7i(190mg，油狀物)，產率：83％。msm/z(esi)：449[m+1]第八步3-(4-苯氧基苯基)-1-(吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-甲酰胺將化合物叔-丁基3-(4-氨基甲酰-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-1-基)吡咯烷-1-羧酸酯7i(190mg，0.42mmol)、鹽酸的乙醇溶液(4n，1ml，4.0mmol)和二氯甲烷(2ml)混合后，室溫下攪拌16小時。減壓脫溶，得到目標產物3-(4-苯氧基苯基)-1-(吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-甲酰胺7j(120mg，油狀物)。msm/z(esi)：349[m+1]第九步1-(1-(丁-2-炔酰)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲酰胺利用3-(4-苯氧基苯基)-1-(吡咯烷-3-基)-1h-吡唑-4-甲酰胺7j(120mg，0.34mmol)為原料，參照實施例1中1的合成方法合成，得到標題產物1-(1-(丁-2-炔酰)吡咯烷-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲酰胺7(30mg，固體)，產率：21％。msm/z(esi)：415[m+1]1hnmr(400mhz，cd3od)δ8.18(d，j＝7.0hz，1h)，7.71(dd，j＝8.7，1.9hz，2h)，7.39(t，j＝7.9hz，2h)，7.15(t，j＝7.4hz，1h)，7.04(dd，j＝13.9，8.3hz，4h)，5.10(d，j＝2.9hz，1h)，4.22-4.12(m，1h)，4.06-3.86(m，2h)，3.83-3.62(m，1h)，2.60-2.44(m，2h)，2.05(d，j＝12.0hz，3h)。實施例81-((1-(丁-2-炔酰)哌啶-4-基)甲基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲酰胺參照實施例7的操作步驟合成實施例8，但在第一步中用叔-丁基4-(羥甲基)哌啶-1-羧酸酯取代叔-丁基3-羥基吡咯烷-1-羧酸酯。msm/z(esi)：443[m+1]1hnmr(400mhz，cd3od)δ8.10(s，1h)，7.72-7.64(m，2h)，7.45-7.34(m，2h)，7.16(t，j＝7.4hz，1h)，7.10-6.98(m，4h)，4.46(dd，j＝12.7，8.8hz，2h)，4.12(d，j＝7.2hz，2h)，3.17(d，j＝2.5hz，1h)，2.74(d，j＝2.9hz，1h)，2.35-2.19(m，1h)，2.04(s，3h)，1.71(d，j＝15.5hz，2h)，1.31(s，2h)。實施例91-(1-(丁-2-炔酰)吖丁啶-3-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1h-吡唑-4-甲酰胺參照實施例7的操作步驟合成實施例9，但在第一步中用叔-丁基3-羥基吖丁啶-1-羧酸酯取代叔-丁基3-羥基吡咯烷-1-羧酸酯。msm/z(esi)：401[m+1]1hnmr(400mhz，meod)δ8.21(s，1h)，7.75(d，j＝8.7hz，2h)，7.44-7.33(m，2h)，7.16(t，j＝7.4hz，1h)，7.11-6.93(m，4h)，5.33(s，1h)，4.69(dd，j＝20.5，6.8hz，2h)，4.47(dd，j＝27.8，6.7hz，2h)，2.05(s，3h)。btk的活性抑制測試使用體外激酶檢測實驗評估本發明的化合物對bruton酪氨酸激酶(btk)活性的影響實驗方法概述如下：使用promega公司的adp-glotm激酶檢測試劑盒，通過檢測激酶反應中所產生的adp水平來測定btk的體外活性。在激酶檢測實驗中，激酶消耗atp將底物磷酸化，同時產成adp。adp-glo試劑將終止激酶反應并且將剩余的atp完全消耗，最后加入激酶檢測試劑，將adp轉化為新的atp。檢測試劑中的螢光素酶在atp和o2參與下能夠催化熒光素，產生氧化型的熒光素、amp并且產生光量子，從而將化學信號轉為光信號(luminecence)。光信號的強度與激酶反應中adp產生量呈正相關，從而能夠定量檢測激酶btk的活性。所有檢測實驗均在23℃恒溫進行，使用corning3674白色384孔檢測板，激酶btk(全長his-tag)由公司內部表達純化，激酶底物為多肽(4∶1glu，tyr)(購自signalchem)和atp(sigma)，使用酶標儀envision(perkinelmer)讀取光信號。檢測緩沖液包括40mmtris-hc(ph7.5)、10mmmgcl2(sigma)、2mmmncl2(sigma)、0.05mmdtt(sigma)和0.01％bsa(sigma)；將激酶btk使用檢測緩沖液配制為1.6ng/ul濃度的激酶反應溶液；底物反應溶液包括0.2mg/ml多肽底物和50μmatp。化合物ic50由10個濃度點通過以下公式計算。先將化合物在100％dmso中溶解稀釋至1mm，然后用dmso進行3倍的系列稀釋至最低濃度為0.05μm，每個濃度點再使用檢測緩沖液稀釋40倍。向384孔檢測板中先添加1ul系列濃度的化合物溶液和2ul激酶反應溶液，混合均勻后室溫避光孵育30分鐘；隨后加入2ul底物反應溶液，反應總體積為5ul，將反應混合物在室溫避光反應60分鐘；隨后加入與反應等體積的5uladp-glotm試劑終止反應，混合均勻后室溫放置40分鐘；最后加入10ul激酶檢測試劑，室溫避光放置30分鐘，然后在envision上讀取數值。抑制百分率基于以下公式計算：抑制％＝[1-(rlu化合物-rlumin)/(rlumax-rlumin)]x100其中rlu化合物為給定化合物濃度下的冷光讀數，rlumin為不加入激酶的情況下的冷光讀數，rlumax為不加入化合物的情況下的冷光讀數。通過使用excel中xlfit程序來計算化合物的ic50。化合物編號ic50(nm)化合物編號ic50(nm)1.a2.a3.c4.a5.a6.a7.a8.c9.aa＜100nm；b＝100至500nm；c＞500nm結論：本發明的化合物對bruton酪氨酸激酶(btk)的活性具有明顯的抑制效應。當前第1頁12