本發明涉及一種三磷酸腺苷類似物，(9-(3,4-二羥基-5-(((羥基((羥基(膦酰基氧) 磷酰基)氧基) 磷酰基)氧基)甲基) 四氫呋喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)磷酸，其分離方法及用途。
背景技術：
三磷酸腺苷二鈉是核苷酸衍生物，能夠穿透血-腦脊液屏障，能提高神經細胞膜性結構的穩定性和重建能力、促進神經突起的再生長。本品與戊糖在體內酶的作用下可以合成核酸；與磷脂膽胺在轉胞苷酸酶的作用下能合成腦磷脂和單磷酸胞苷。臨床用于因組織損傷、細胞酶活力下降所致的各種疾病。如心力衰竭，心肌炎、心肌梗塞、腦動脈硬化、冠狀動脈硬化、進行性肌萎縮、腦出血后遺癥、急慢性肝炎、肝硬化和聽力障礙等。其化學結構式為：
對于人類用藥，活性藥物成分（API）在其生產、儲存、使用過程中可能產生雜質而導致藥物質量下降，國內和國際機構對毒性未定的確定雜質規定非常嚴格。通常這些限度是單個雜質低于0.15%（HPLC），對未確證的毒性未定的雜質，其限度要求更低，低于0.1%（HPLC）。因此在API的制備、存儲過程中，產生的雜質及雜質制備方法、檢測方法進行研究是十分必要的。
技術實現要素：
本發明目的之一是提供一種全新結構的三磷酸腺苷類似物，其化學結構如式（I）所示
（I）
結構式（I）化學名稱為(9-(3,4-二羥基-5-(((羥基((羥基(膦酰基氧) 磷酰基)氧基) 磷酰基)氧基)甲基) 四氫呋喃-2-基)-9H-嘌呤-6-基)磷酸。
本發明目的之二是提供一種制備上述化合物（如結構式I所示）的方法，為實現上述目的，采用以下制備分離工藝：
1) 三磷酸腺苷二鈉在高溫條件下反應，用反相高效液相色譜進行分離，0-50℃避光去除溶劑后即得。進一步的三磷酸腺苷二鈉反應溫度是60-100℃，反應時間是4-72小時。更進一步的三磷酸腺苷二鈉反應溫度是85℃，時間為4小時。
2) 分離方法為高效液相色譜采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，流動相為有機相和水相的混合溶劑，檢測波長為240-280nm。進一步的流動相中有機相和水相的體積比為20:80~50:50，所述有機相選自甲醇或乙腈；所述水相pH為4.0~7.0，pH調節劑為磷酸水溶液、鹽酸水溶、醋酸或醋酸銨；流動相的流速為0.6~0.9 mL/min，檢測波長為240-280nm。更進一步的流動相的有機相為甲醇；流動相的流速為0.8 mL/min，檢測波長為270nm。
3) 所述化合物作為有關物質檢測用對照品在三磷酸腺苷二鈉原料藥或包含三磷酸腺苷二鈉制劑的質量控制中的應用。
具體實施方式
以下結合實施例用于進一步描述本發明，但這些實施例并非限制著本發明的范圍。
實施例1：化合物的制備
取三磷酸腺苷二鈉原料藥15g置于85℃，75±5%濕度下高溫反應4小時備用。將固體溶于100mL甲醇中，采用高效液相色譜儀進行分離，色譜條件為：色譜柱：Agilent Eclipse XDB-C18,4.6*150mm（3.5um）；流動相a為pH5.0（醋酸）的水，流動相b為甲醇；流動相流動相的流速為0.75 mL/min，柱溫：20℃，檢測波長為270nm，進樣量：0.5mL。梯度洗脫如下：
得化合物20mg，檢測結果：化合物HPLC：98%。分子離子峰為m/z=586.1，為[M-H]。1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ:8.35 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 6.16(d, 1H), 5.45(m, 1H), 4.80(m, 2H), 4.75(m, 1H), 4.51~4.20(m, 9H), 4.04(t, 1H) ppm.
實施例2：化合物的制備
取三磷酸腺苷二鈉原料藥30g置于60℃，75±5%濕度下高溫反應72小時備用。將固體溶于1000mL乙腈中，采用高效液相色譜儀進行分離，色譜條件為：色譜柱：Agilent 1260 Dubhe-C18,50*250mm（10um）；流動相a為pH3.5（醋酸）的水，流動相b為乙腈；流動相流動相的流速為0.9 mL/min，柱溫：25℃，檢測波長為250nm，進樣量：0.5mL。梯度洗脫如下：
得目標化合物25mg。