一種子宮輸卵管腔道超聲造影劑及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種醫學造影劑，特別設及一種在水溶液載體中充氣微泡的可注射超 聲祀向造影劑，屬于醫學超聲影像診斷領域。
【背景技術】
[0002] 氣體微泡在載體液中的懸浮液用作有效的超聲反射體，運在現有技術中是眾所周 知的。隨著超聲的應用，雖然經陰道超聲檢查較W前的腹部超聲檢查在女性內生殖器方面 有了更清晰的圖像，但一般的實時超聲檢查仍無法全部顯示輸卵管的走行情況及其形態， 對于宮內或卵巢的病變，也不能清晰顯示。目前國內外常用子宮輸卵管艦油造影技術和腹 腔鏡檢查輸卵管的通楊性，但往往許多患者會對艦油產生過敏反應，而且艦油造影劑進入 腹腔可W刺激腹膜引起輸卵管周圍腹膜粘連，影響輸卵管蠕動，另外會受到X射線的照射， 對人體產生危害。而腹腔鏡屬于創傷性操作，另外價格昂貴，大部分患者不愿意接受。
[0003] 將經陰道超聲檢查與宮腔內注入生理鹽水或造影劑結合起來應用，即宮腔超聲造 影術。該技術在診斷卵巢、宮腔內病變及輸卵管病變方面取得了較滿意的效果，但國內外現 有的超聲造影劑存在一些問題:如，超聲微泡膜材料成分復雜，用料多，合成制備的過程中， 使用氯仿、叔下醇等對人體有害的溶劑，所W需要選擇制膜材料及其配置比例，W制備出更 節約、有效、安全和易于制備的微泡;合成工藝復雜，步驟繁瑣，超聲空化法、機械制定法、冷 凍干燥法、反復凍融法等，要么制備工藝較復雜、要么制備微泡粒徑及分布還不夠理想，都 需要進一步改進;包裹氣體的膜狀材料層數多導致脂質體在血管或者腔內不能及時的將氣 體釋放出，從而影響超聲的效果。
[0004] 普通超聲造影劑，不能用于超聲分子成像，而將祀向多膚結合在微泡表面制備祀 向超聲造影劑，祀向顯示組織器官分子水平的病理改變;并W祀向造影劑為載體，實現藥 物、基因定點釋放，在超聲祀向治療領域有廣泛的應用前景。
[0005] 隨著分子祀向治療的出現，人們對婦科生殖系統的惡性病變，尤其是卵巢癌和宮 頸癌的分子生物學機制理解也越來越深入。FA受體a(化Iaterec邱tora，FRa)是一種由憐脂 酷肌醇連接在細胞膜上的膜蛋白，在超過90 %的卵巢癌中過量表達，在上皮性癌細胞中也 有不同程度地表達，而在正常組織中的表達程度很低，因此FRa成為某些腫瘤的特征標記和 功能性受體。FA是一種該受體高親和性的配體，即使連接到各種分子后依然保持與受體結 合并介導細胞內吞的能力，是一種理想的脂質體祀向配體。
[0006] 理想的祀向造影劑特性應包括:①循環半衰期長(理想的超過30~60分鐘）；②在 祀區部位停留時間長;③敏感、特異性地連接于感興趣區抗原決定簇;④產生高的信噪比； ⑤毒性小;⑥易于生產和臨床使用;⑦能采用標準化、商業化的成像方式成像。
[0007] 針對上述現有超聲造影劑工藝和技術的不足，結合分子祀向診斷和治療技術，本 發明合成出一種安全性高、薄片狀可注射的經陰道輸卵管超聲祀向造影劑。
【發明內容】
[0008] 本發明的目的是提供一種W合成憐脂和多膚修飾等為膜材料的祀向超聲造影劑 及其制備方法。制備的超聲微泡大小適宜、粒徑分布均一、穩定、濃度適宜、祀向結合率高； 不需要添加造影劑制備原料W外的試劑材料用于連接配體，制備方法簡單，對微泡本身特 性干擾小，有利于純化祀向造影劑。
[0009] 本發明的目的是提供一種穩定，生物相容性好，具有祀向性的超聲造影劑。主要通 過W下方式實現的：
[0010] -種子宮輸卵管腔道超聲造影劑，包括W下組分，第一組分為載體，由憐脂、聚乙 二醇或其衍生物，W及連接特異性配體的聚合憐脂組成;=者的重量比例為:〇.5-2:0.005-0.02:0.003-0.007，第二組分為憐脂穩定劑，第=組分是生理溶劑，第四組分是氣碳類氣 體，第一，二，S組分的重量百分比例為:0.0005-0.002:0.000005-0.00002:0.5-2，作為氣 體，第四組分的濃度為10 8~IO9個/血。
[0011] 本發明所述的超聲造影劑，其中所述第一組分的憐脂包括天然憐脂和合成憐脂； 天然憐脂選自卵憐脂、大豆卵憐脂、大豆憐脂，合成憐脂選自憐脂酸、憐脂酷膽堿、憐脂乙醇 胺、憐脂甘油；其中所述第一組分的聚乙二醇或其衍生物選自：聚乙二醇-2000、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-10000,其中所述連接特異性配體的聚合憐脂選自：二臂N-徑基下二酷亞胺 下二酸醋基聚乙二醇-二硬脂酷憐脂酷乙醇胺，二臂N-徑基班巧酷胺醋-二棟桐酷憐脂酷乙 醇胺；其中，連接特異性配體的聚合憐脂中所述的特異性配體，選自葉酸或其衍生物、抗 VEGF單克隆抗體和多膚YIGSR，其中，憐脂、聚乙二醇或其衍生物，W及連接特異性配體的聚 合憐脂;=者的重量比例為：1:0.Ol :0.005,所述連接特異性配體的聚合憐脂中，特異性配 體和聚合憐脂的重量比例為:0.,05-0.02:0.5-2,所述第一組分在造影劑中的重量百分比 為:0.1%~5%。
[0012] 本發明所述的超聲造影劑，其中所述第二組分選自泊洛沙姆，第二組分在造影劑 中的重量百分比為:0.0001%~0.1%。
[0013] 本發明所述的超聲造影劑，其中所述第=組分選自蒸饋水、生理鹽水，第=組分在 造影劑中的重量百分比為:95%~99.9%。
[0014] 5根據權利要求1所述的超聲造影劑，其特征在于，其中所述第四組分選自全氣甲 燒、全氣乙燒、全氣丙烷、全氣下燒、全氣環下燒、氣利昂、六氣化硫，第四組分其濃度為:在2 ~4微米粒徑范圍IO 8~IO9個/mL。
[0015] 本發明所述的超聲造影劑，其中所述第一組分的憐脂選自：卵憐脂，所述聚乙二醇 或其衍生物選自：聚乙二醇-4000,所述連接特異性配體的聚合憐脂中的聚合憐脂選自：二 棟桐酷憐脂酷乙醇胺，二臂N-徑基班巧酷胺醋-二棟桐酷憐脂酷乙醇胺，所述連接特異性配 體的聚合憐脂中的連接特異性配體選自：葉酸;其中，卵憐脂，聚乙二醇-4000,和葉酸-二棟 桐酷憐脂酷乙醇胺，或葉酸二臂N-徑基班巧酷胺醋-二棟桐酷憐脂酷乙醇胺之間的重量比 例為：1:0.01:0.005，所述第二組分選自泊洛沙姆，所述第=組分選自生理鹽水，所述第四 組分選自全氣戊燒和六氣化硫，第一，二，立組分的重量百分比例為:0.001:0.00001:1，作 為氣體，第四組分的濃度為在4~5微米粒徑范圍IO 8~IO9個/11〇^;所述造影劑為平均直徑1-4 微米的微球構成的混懸劑，微球表面連接有特異性配體，其中的載體具有層狀或薄片狀。
[0016] 本發明還包括本發明所述超聲造影劑的制備方法，包括A方法或B方法，其中A方 法，步驟如下：
[0017] (I)將第一組分的憐脂、聚乙二醇或其衍生物、連接特異性配體的聚合憐脂、第二 組分加入到第=組分中，均勻混合和溶解；
[0018] (2)減壓或常壓條件下，將第四組分氣碳類氣體通入上述溶液中，用高速機械剪切 設備均化，得到超聲造影劑。
[0019] 其中B方法，步驟如下：
[0020] (1)或將A方法步驟（1)中所得的混合物靜置24h，棄掉下清液并加入等量的蒸饋水 洗涂、純化幾次，棄掉下清液，得到薄片狀或片狀的類脂質體，用真空冷凍干燥法將類脂質 體干燥成粉末；
[0021 ] (2)將第四組分氣碳類氣體注射到粉末中；
[0022] (3)將其溶解于生理鹽水中，得到超聲造影劑；
[002引其中，所述連接特異性配體的聚合