一種氯硝西泮的藥物組合物及其醫藥用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于生物醫藥領域，設及氯硝西泮的新用途，具體設及氯硝西泮的藥物組 合物及其在抗炎止咳中的應用。
【背景技術】
[0002] 氯硝西泮作用類似地西泮及硝西泮。但抗驚厥作用比前二者強5倍，且作用迅速。 與其他BDZ類藥物的中樞抑制作用類似，由于加速神經細胞的氯離子內流，使細胞超極化， 使神經細胞興奮性降低。同時它還對谷氨酸脫簇酶有一定作用，因而具有廣譜抗癒痛作用。 本品尚具有抗焦慮、催眠及中樞性肌肉松弛作用。
[0003] 迄今為止，尚未見氯硝西泮及其藥物組合物與抗炎止咳的相關性報道。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的在于提供一種氯硝西泮的藥物組合物，該藥物組合物中含有氯硝西 泮和一種天然產物，氯硝西泮和該天然產物可W協同抗炎止咳。
[0005] 本發明的上述目的是通過下面的技術方案得W實現的：
[0006] -種具有下述結構式的化合物(I)，
U
[0008] -種氯硝西泮的藥物組合物，包括氯硝西泮、如權利要求1所述的化合物（I)和藥 學上可W接受的載體，制備成需要的劑型。
[0009] 進一步地，藥學上可W接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤劑、 崩解劑、吸收促進劑、表面活性劑、吸附載體或潤滑劑。
[0010] 進一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0011] 上述化合物（I)的制備方法，包含W下操作步驟：（a)將積雪草粉碎，用70~80%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油酸、乙酸乙醋和水飽和的正下醇萃 取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步驟(a)中正下醇萃取物 用大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫10個柱體積，收集70% 洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠 分離，依次用體積比為80:1、30:1、15:1和5:1的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d) 步驟(C)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1、15:1和2:1的二氯甲燒-甲 醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體 積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~14個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得 到純的化合物(I)。
[0012] 進一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用75%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0013] 進一步地，化合物(I)的制備方法中，所述大孔樹脂為DlOl型大孔吸附樹脂。
[0014] 進一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲燒代替乙酸乙醋進行萃 取，得到二氯甲燒萃取物。
[0015] 上述化合物(I)在制備抗炎止咳的藥物中的應用。
[0016] 上述氯硝西泮的藥物組合物在制備抗炎止咳的藥物中的應用。
[0017]本發明的優點：
[0018] 本發明提供的氯硝西泮的藥物組合物中含有氯硝西泮和一種結構新穎的天然產 物，氯硝西泮和該天然產物單獨作用時，具有抗炎止咳作用；二者聯合作用時，抗炎止咳效 果更好，可W開發成抗炎止咳的藥物。本發明與現有技術相比具有突出的實質性特點和顯 著的進步。
【具體實施方式】
[0019] 下面結合實施例進一步說明本發明的實質性內容，但并不W此限定本發明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可W對 本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和范圍。
[0020] 實施例1:化合物(I)分離制備及結構確證
[0021] 試劑來源：乙醇、石油酸、乙酸乙醋、正下醇、二氯甲燒為分析純，購自上海凌峰化 學試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[0022] 分離方法：（a)將積雪草(化g)粉碎，用75%乙醇熱回流提取(2化X3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（化），依次用石油酸(化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水飽和的正下醇 (化X3次）萃取，分別得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（b)步驟(a)中 正下醇萃取物用DlOl型大孔樹脂除雜，先用15%乙醇洗脫6個柱體積，再用70%乙醇洗脫10 個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（C)步驟(b)中70%乙醇洗脫 濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1 (8個柱體積）、30:1 (8個柱體積）、15:1 (8個柱 體積)和5:1(10個柱體積）的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步驟(C)中組分3用 正相硅膠進一步分離，依次用體積比為25:1 (8個柱體積）、15:1 (10個柱體積)和2:1 (5個柱 體積)的二氯甲燒-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~14個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(IKHPLC歸一化純度大于98% )。
[0023] 結構確證:皿-ESI-MS顯示[M+化r為m/z 397.1988,結合核磁特征可得分子式為 C22H3QO5，不飽和度為8。核磁共振氨譜數據SH(ppm，CDCl3,500MHz ):H-la( 1.27，m) ,H-Ib (1.43，m)，H-2a(1.82，m)，H-2b(1.99，m)，H-3(4.88，s)，H-6a(2.56，d，J=12.2Hz)，H-6b (2.71，d，J=12.2Hz)，H-9(2.26，m，2H)，H-12(1.83，s)，H-13(2.03，s)，H-14(0.95，s)，H-15 (1.12, s)，H-4'（ 1.26, s)，H-5'（ 1.32, s)，3'-Ac0( 1.95, s);核磁共振碳譜數據Sc(ppm， CDCl3，125MHz):32.4(Ol2，l-C)，27.6(CH2,2-C)，77.3(CH，3-C)，137.8(C，4-C)，137.3(C，5- C)，22.3(CH2,6-C)，130.2(C，7-C)，201.1(C，8-C)，58.5(CH2,9-C)，36.7(C，10-C)，136.3(C， ll-C)，22.3(Ol3，12-C)，23.1(ai3，13-C)，18.4(CH3，14-C)，15.3(ai3，15-C)，167.3(C，r-C)，104.6(C，2，-C)，155.8(C，3，-C)，16.8(C 出，4，-C)，10.7(CH3,5，-C)，169.6(C，3，-Ac0)， 21.3(C出，3'-AcO)。紅外波譜中的1715cnfi與1680cm-i吸收帶表明結構中存在幾基與雙鍵片 段。Uc-NMR、DEPT和HSQ村普中顯示有22個碳信號，包括屯個甲基，四個亞甲基，一個連氧次甲 基，W及十個季碳(=個幾基碳和六個締控碳）。W上功能結構再結合不飽和數表明該化合 物為雙環結構。Ih-MIR譜結合HSQC譜顯示六個甲基質子信號Sh 1.83(3H，s)、2.03(3H，s)、 0.95(3H，s)、H-15(1.12，s)、1.26(3H，s)、1.32(3H，s)，一個乙酷基甲基質子信號Sh 1.95 (3H，s)，一個連氧次甲基質子信號?4.88aH，s);W上NMR數據可W確認該化合物為闊巷 菊酬衍生物。HMBC譜中曲-12與C-Il，曲-13與C-Il，曲-14與C-10,曲-15與C-4的相關信號可 W歸屬為闊巷菊酬上的甲基片段，C-3位質子信號移向低場說明C-3^基被醋化，而通過 HMBC譜中H-3與C-r的相關信號得到進一步確認。通過HMBC譜中出-4'與C-3 '，曲-5 '與C-2 ' 和C-1'，W及乙酷甲基質子信號與C-3'的相關信號可W確認結構中存在3'-乙酷基-2'-甲 基-2'-下締酷基氧基邊鏈結構，而質子信號Sh 1.26(3H，s)W及1.32(3H，s)可W歸屬為H-4'的甲基信號與H-5 '的甲基信號。NOESY譜中He-I/曲-14，也-1/H-3的相關信號表明H-3和 曲-14為0構型。此外，該化合物的相對構型進一步通過X-單晶衍射確認，C-3位的絕對構型 通過酸解反應與Mosher法可W確認為R構型。綜合氨譜、碳譜、HMB幻普和NOESY譜，W及文獻 關于相關類型核磁數據，可基本確定該化合物如下所示，立體構型進一步通過ECD試驗確 定，理論值與實驗值基本一致。該化合物化學式及碳原子編號如下：
[00巧]實施例2:藥理作用
[0026] 1、材料與方法
[0027] 1.1藥物和試劑
[002引氯硝西泮購自中國藥品生物制品檢定所。化合物（I)自制，制備方法見實施例1。冰 醋酸，廣西南寧化學試劑廠生產;二甲苯，中國醫藥集團上海化學試劑公司生產;伊文思蘭， 上海化學試