C-型鈉肽在制備外用避孕藥和精子功能檢測試劑中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥衛生領域，具體地說，涉及C-型鈉肽在制備外用避孕藥和精子功 能檢測試劑中的應用。
【背景技術】
[0002] 由于氣候環境變化，生活工作節奏變快等因素導致的男性不育人群增加，有些導 致男性不育的原因至今尚未明確。常規精液分析主要可以了解精液量、精子密度及精液中 精子的總量、精子凝集、精子活力與活率、精子形態、精液液化等方面的信息。實際上，通過 上述常規分析，難以真正了解精子的功能和受精潛能，特別是在人工授精及試管嬰兒方面， 尚不能僅僅通過精液常規分析所提供的信息，決定是否可以進行人工授精。因此，有必要探 討新的檢測精子功能的方法。
[0003]計劃生育是我國的基本國策，對于提尚我國人口素質、提尚生殖健康水平、提尚民 族整體實力意義重大。在這種大環境下，相關生育節育技術和相關避孕藥具的研發得到快 速發展，各種避孕藥具相繼面市，如常見的女性用物理屏障避孕工具有陰道隔膜和避孕宮 頸帽，這些避孕工具在使用前，需經婦科檢查，根據陰道大小選擇適當型號的陰道隔膜試行 放入，然后在醫生指導下學會放入和取出的方法，直到完全能夠掌握使用為止，但婦女生育 后所需陰道隔膜的型號大小可能與以前不同，往往還需重新配置，因而使用方法較煩瑣。 [0004]另外，現有女性外用避孕藥均為具有細胞毒性的殺精子藥物，其作用機理均為損 傷或破壞精子細胞，但同時對其它細胞也有毒性且對陰道有一定的刺激作用，故臨床不主 張長期連續使用。目前應用最廣泛的代表性藥物為壬苯醇醚(N-9)，如經常使用，N-9可引起 一些婦科炎癥，如細菌性陰道炎、生殖道潰瘍、外陰炎、中毒性休克綜合癥(TSS)、宮頸陰道 上皮脫落等。
[0005] 口服避孕藥包括以下幾種:短效口服避孕藥、長效口服避孕藥、長效避孕針和探親 避孕藥。它們的作用機制主要通過抑制排卵和阻止受精卵著床而達到避孕。長期服用避孕 藥會抑制排卵，易使女性長胖，增加血栓和偏頭疼的風險。若長期盲目、大量服用，將對健康 造成極大危害。因此，進一步研制出安全、有效且可長期使用的避孕藥成為迫切需要。
【發明內容】
[0006] 本發明的目的是基于精子趨化原理，提供C-型鈉肽在制備外用避孕藥和精子功能 檢測試劑中的應用。
[0007] 本發明的另一目的是提供一種安全、有效、適合育齡女性長期使用的新型外用避 孕藥。
[0008] 本發明的又一目的是提供一種精子功能檢測試劑及檢測裝置。
[0009] 為了實現本發明目的，本發明提供C-型鈉肽在制備外用避孕藥和精子功能檢測試 劑中的應用。
[0010]本發明還提供一種外用避孕藥，其有效成分為C-型鈉肽。
[0011] 所述藥劑還包括藥學上可接受的輔料或輔助性成分。所述輔料包括增塑劑、填充 劑、潤濕劑、粘合劑等。
[0012] 所述藥劑為水劑、栓劑、凝膠劑、膜劑、泡沫劑、片劑或可溶性避孕套。
[0013]本發明的外用避孕藥，所述藥劑的單次劑量單元為C-型鈉肽20 X 10-7-200 X 10一 7mg/Kg 體重。
[0014] 使用時，將避孕藥放置于雌性哺乳動物生殖道內（例如陰道后，或通過外用避孕藥 放置器將避孕藥送達雌性哺乳動物子宮內），待藥劑溶解后再行交配，便可避孕。
[0015] 本發明還提供一種精子功能檢測試劑，所述檢測試劑中含有精子趨化源，其為組 織細胞、液體、凝膠或固體，趨化源所含有效成分為C-型鈉肽。所述精子趨化源中C-型鈉肽 的濃度為O.Ol-lOnM。
[0016] 本發明還提供含有所述檢測試劑的精子功能檢測試劑盒。
[0017] 本發明還提供包被有所述檢測試劑的精子功能檢測試劑條。
[0018] 本發明進一步提供一種精子功能檢測裝置，所述檢測裝置為至少一端開口的管徑 1-10_、長2-lOcm的毛細管;對于一端封閉的毛細管，在毛細管的封閉端預置有所述精子功 能檢測試劑;對于兩端開口的毛細管，在毛細管的一端預置有所述精子功能檢測試劑。
[0019] 研究發現，在排卵發生時，輸卵管受精部位壺腹部表達c-型鈉肽，能誘導精子向卵 子趨化運動，完成受精。如將此時的壺腹部取出，放入毛細管中，壺腹部緩慢釋放的C-型鈉 肽就能使精子向毛細管內做趨化運動。據此可以判斷精子是否具有自然受精的能力。可根 據C-型鈉肽誘導精子趨化的能力來檢測精子中NPR2的表達情況，來檢測精子質量，作為判 斷精子不育的一個臨床標準。
[0020] 可利用上述檢測裝置或者在體外建立毛細管趨化模型，檢測精子的趨化能力，并 根據精子趨化的能力來判斷精子自然不育的原因，從而實現精子功能檢測/鑒定。具體地， 本發明提供的精子功能檢測方法，是將一定量的C-型鈉肽或輸卵管壺腹部放入毛細管的一 端，另一開口端與精液微滴相連，在顯微鏡的10倍物鏡下觀察進入毛細管中的精子數量，如 果進入毛細管中精子的數量與對照(毛細管中不放置有C-型鈉肽或輸卵管壺腹部)相同，則 表明精子沒有趨化能力，可能由此導致不能自然受精。更具體地，將新鮮采集的精液先在獲 能液(如T6)中孵育1.5h，進行獲能，然后加至150μ1獲能液微滴中，精子密度約為10 6個/ml。 取長2.5cm，管徑3mm的毛細管，一端封閉。將剛發生排卵的小鼠壺腹部取出，放入到毛細管 的封閉端，然后將毛細管的開口端與精液微滴相連。而對照組毛細管中不含有壺腹部。在顯 微鏡的10倍物鏡下連續觀察視野內中的精子數量，在同一時間，比較處理組與對照組中的 精子數量，如沒有顯著性差異，則表明該精液不能自然受精的原因可能是NPR2基因變異，導 致無法向卵母細胞做趨化運動，造成受精失敗。
[0021] 同時，利用上述精子趨化原理，在生殖道內干擾精子趨化，能降低雌性哺乳動物的 受精率。因此，可通過干擾精子趨化現象，達到避孕的目的。例如，在雌性哺乳動物的生殖道 中添加一定量的C-型鈉肽，或將C-型鈉肽與精子孵育，改變輸卵管中的C-型鈉肽的濃度梯 度分布。這樣，精子就不能順著濃度梯度向卵母細胞做趨化運動，精子與卵母細胞不能相 遇，從而阻止受精。
[0022] C-型鈉肽(natriuretic peptide type C，CNP，又簡稱NPPC)是一種卵泡液中天然 存在的旁分泌因子。已有研究證明CNP作為卵母細胞成熟抑制因子，可提高卵丘細胞以及卵 母細胞中的環磷酸鳥苷（eyelie guanosine3'，5'-monophosphate，cGMP)水平，同時也增加 卵母細胞中的環磷酸腺苷(cyclic adenosine3'，5'-monophosphate，cAMP)水平。另外，其 受體在精子中的表達特征可作為判斷精子質量好壞的標準。常規精液分析主要可以了解精 液量、精子密度及其精液中精子的總數量、精子凝集、精子活力與活率、精子形態、精液液化 等方面的信息。實際上通過上述常規分析，難以真正了解精子的功能和受精潛能，特別是在 人工授精及試管嬰兒方面，尚不能僅僅通過精液常規所提供的信息，決定是否可以進行人 工授精。C-型鈉肽受體(natriuretic peptide receptor 2，NPR2)具有鳥苷酸環化酶的活 性，CNP與其結合后，可刺激NPR2產生高水平的cGMP，通過升高精子細胞內鈣離子水平，使精 子向卵母細胞做趨化運動，完成受精。因此，可根據NPR2表達特點來檢測精子質量，作為判 斷精子不育的一個臨床標準。
[0023]本發明提供的新型外用避孕藥，其有效成分C-型鈉肽為內源性蛋白，且是外用，因 此，其副作用要比口服避孕方法小。該藥劑能應用到雌性哺乳動物生殖道內，特別是女性陰 道中，適用于大多數育齡女性避孕，且避孕藥無毒副作用和不良反應，使用方便，具有廣闊 的應用前景。另外，利用由c-型鈉肽制備的精子功能檢測試劑對精子質量進行鑒定，操作方 法簡單，結果易觀察，所需精液量少，適用于雄性/男性精子功能的體外檢測。
【具體實施方式】
[0024]以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。若未特