一種防治酒精性肝損傷有效組分的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及醫藥，特別是一種防治酒精性肝損傷有效組分的制備方法。
【背景技術】
[0002] 酒精性肝病在世界范圍內發病率不斷上升，是一種進行性發展且后期會嚴重危害 身體健康甚至生命的疾病。現代醫學治療酒精性肝病除了戒酒、對癥治療外，尚無特效療 法。近年來中醫藥在防治酒精性性肝病方面積累了豐富的經驗。芪芍方為自擬方，由黃芪， 赤芍，葛根組成，具有健脾化濕解酒、疏肝活血軟堅的功效，臨床用于急性酒精損傷的預防 和治療。目前芪芍方臨床用藥方式為傳統的水煎劑，服用不方便且不利于方中主要有效成 分的溶出。
[0003] 藥效學研究表明芪芍方有效組分具有顯著的抗酒精性肝損傷作用，有效用于：
[0004] 1、抗酒精性肝損傷作用:芪芍方有效組分可顯著降低酒精性肝損傷模型小鼠血清 中AST、ALT的水平；
[0005] 2、抗脂質過氧化作用：能顯著抑制S0D、丙二醛的生成，保護模型小鼠肝臟細胞脂 質過氧化損傷；
[0006] 芪芍方有效組分具有顯著的抗酒精性肝損傷作用。其作用顯著優于葛根單味藥。 物質基礎明確，工藝穩定、可控。可用于酒精性肝損傷的治療與預防。
[0007] 中藥復方化學成分復雜，組分特點各異，正是由于其復雜的化學成分和多靶點的 作用機理使中藥復方制劑在治療復雜疾病中體現了西藥難以比擬的優勢。合適的親水、親 脂比是中藥(或中藥復方)取得良好臨床療效的基礎。大孔吸附樹脂分離技術是20世紀60年 代末發展起來的繼離子交換樹脂后的分離新技術之一，由于其對中藥(或中藥復方)復雜成 分親水、親脂比的構建方面具有高度的選擇性，近十余年大孔吸附樹脂富集技術在藥學領 域(特別是天然藥物精制）中的應用日益廣泛，且呈現出良好的發展態勢。
[0008] 采用大孔吸附樹脂法制備提取物及有效組分雖然是一種較廣泛的技術，但中藥化 學成分復雜，組分特點各異，大孔吸附樹脂型號、制備參數為是否能夠獲得合適有效組分的 關鍵。本發明應用這一技術，對大孔吸附樹脂型號、參數進行系統優化，首次制備出具有解 酒保肝作用的芪芍方復方有效組分。
【發明內容】
[0009] 針對上述情況，為解決現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種防治酒精性 肝損傷有效組分的制備方法，可有效解決傳統的水煎劑服用不方便且不利于方中主要有效 成分的溶出的問題。
[0010] 本發明解決的技術方案是，包括以下步驟：
[0011] 1)上樣液的制備:將干燥藥材葛根、赤芍、黃芪按1:1:1比例粉碎，加藥材6倍重量 的體積濃度為70%的乙醇，提取2次，每次1.5h，合并兩次提取液，減壓回收溶劑至無醇味， 加水分散，得水分散液，水分散液濃度相當于〇. 1-0.2g/mL生藥，在3600r/min下離心30min， 傾取上清液，不溶物加1-2倍藥材重量的體積濃度為5%的乙醇溶解，在3600r/min下離心 30min，合并兩次上清液制得上樣液(濃度相當于生藥材0. l-0.2g/ml);
[0012] 2)對樹脂預處理:方法是，大孔吸附樹脂用體積濃度為95%的乙醇浸泡24h后，濕 法裝柱，并用體積濃度為95%的乙醇動態清洗樹脂，乙醇加入量為樹脂5倍的體積量，再水 洗至無醇味后，依次用體積濃度為5 %的鹽酸浸泡6h，動態清洗樹脂，鹽酸加入量為樹脂3倍 體積量，再次水洗至中性，之后用體積濃度為5 %的NaOH溶液浸泡6h，動態清洗樹脂，NaOH溶 液加入量為樹脂3倍體積量，并用水洗至中性，用體積濃度為95 %的乙醇動態清洗，再用水 清洗至不呈白色混濁溶液為止，得預處理好的樹脂;所述的大孔吸附樹脂為S8型、AB-8型、 HPD-4006型、HPD-826型、NKA-Π 型大孔吸附樹脂中的一種；
[0013] 3)裝柱與洗脫:將步驟2)預處理好的樹脂濕法裝柱，使樹脂床徑高比達1:1-30,再 將步驟1)中的上樣液通過樹脂柱，以1.6BV/h流速進行動態吸附，吸附完后，樹脂柱先用4倍 體積水洗脫，再用2倍體積的體積濃度為5 %的乙醇洗脫，再用6倍體積的體積濃度為70 %的 乙醇洗脫，每次洗脫流速均為3.2BV/h，收集體積濃度為70%乙醇的洗脫液，減壓回收乙醇， 蒸干，即得防治酒精性肝損傷有效組分。
[0014] 本發明的芪芍方有效組分，質量穩定、可控、對小鼠酒精性肝損傷具有顯著的保護 作用(作用效果優于葛根單味藥及市場上同類產品），能夠有效用于制備治療上述疾病相應 的藥物，是醫藥領域內的創新。
【附圖說明】
[0015] 圖1為本發明上樣液泄漏曲線。
[0016]圖2為本發明葛根素、茍藥苷、黃芪總皂苷的洗脫曲。
[0017] 圖3為本發明有效組分制備工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0018] 以下結合附圖和實施例對本發明的【具體實施方式】作進一步詳細說明。
[0019] 實施例1
[0020] 1)上樣液的制備：將干燥的藥材葛根、赤芍、黃芪共1.5kg粉碎，加9L體積濃度為 70%的乙醇，提取2次，每次1.5h，合并兩次提取液，減壓回收溶劑至無醇味，加水分散，在 3600r/min下離心30min，傾取上清液，不溶物加1500mL體積濃度為5 %的乙醇溶解，在 3600r/min下離心30min，合并兩次上清液制得上樣液15L( 15000mL)(濃度相當于生藥材 0.lg/mL)；
[0021] 2)對樹脂預處理:方法是，S8型大孔吸附樹脂2.4L用體積濃度為95%的乙醇浸泡 24h，濕法裝柱，并用體積濃度為95%的乙醇動態清洗樹脂，乙醇加入量為12L，再水洗至無 醇味后，用體積濃度為5 %的鹽酸浸泡6h，動態清洗樹脂，鹽酸加入量為7.2L，再次水洗至中 性，之后用體積濃度為5 %的NaOH溶液浸泡6h，動態清洗樹脂，NaOH溶液加入量為7.2L，并用 水洗至中性，用體積濃度為95%的乙醇動態清洗，再用水清洗至不呈白色混濁溶液為止，得 預處理好的樹脂；
[0022] 3)裝柱與洗脫:將步驟2)預處理好的樹脂濕法裝柱，于內徑為10cm的層析柱，使樹 脂床徑高比達1:6，再將步驟1)中的上樣液15L通過樹脂柱，以1.6BV/h流速進行動態吸附， 吸附完后，樹脂柱先用4倍體積水洗脫，棄去水洗脫液;再用2倍體積的體積濃度為5 %的乙 醇洗脫，棄去5 %乙醇洗脫液;再用6倍體積的體積濃度為70 %的乙醇洗脫，每次洗脫流速均 為3.2BV/h，收集體積濃度為70%乙醇的洗脫液，減壓回收溶劑乙醇，蒸干，即得防治酒精性 肝損傷有效組分。
[0023] 實施例2
[0024] 1)上樣液的制備：將干燥的藥材葛根、赤芍、黃芪共3kg粉碎，加18L體積濃度為 70%的乙醇，提取2次，每次1.5h，合并兩次提取液，減壓回收溶劑至無醇味，加水分散，在 3600r/min下離心30min，傾取上清液，不溶物加3000mL體積濃度為5 %的乙醇溶解，在 3600r/min下離心30min，合并兩次上清液制得上樣液30L(30000mL)(濃度相當于生藥材 0.lg/mL)；
[0025] 2)對樹脂預處理:方法是，AB-8型大孔吸附樹脂4.8L用體積濃度為95%的乙醇浸 泡24h，濕法裝柱，并用體積濃度為95 %的乙醇動態清洗樹脂，乙醇加入量為24L，再水洗至 無醇味后，用體積濃度為5 %的鹽酸浸泡6h，動態清洗樹脂，鹽酸加入量為14.4L，再次水洗 至中性，之后用體積濃度為5 %的NaOH溶液浸泡6h，動態清洗樹脂，NaOH溶液加入量為 14.4