宜肝樂片在制備抑制胎盤絨毛癌細胞jar細胞增殖藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于中藥技術領域，具體設及一種宜肝樂片在制備抑制胎盤絨毛癌細胞 JAR細胞增殖藥物中的應用及宜肝樂片的制備方法。
【背景技術】
[0002] 宜肝樂顆粒標準號WS-10148(ZD-0148)-2002,記載于國家中成藥標準匯編內科肝 膽分冊。由雞矢藤200g、虎杖160g、馬鞭草200g、六月雪200g、馬蘭草200g、茅替200g、吉祥草 170g、功勞木lOOg、冷水花70g作為原料藥制成，具有清熱解毒，利膽退黃的功效。用于肝膽 濕熱所致的急慢性乙型肝炎。
[0003] 現有技術中，尚未有宜肝樂片在在制備抑制人胎盤絨毛癌細胞JAR細胞增殖藥物 中的應用的報道，也未見有宜肝樂片提取制備方面采用超臨界萃取的報道，而傳統水煎煮、 乙醇回流提取的方法，工藝粗糖、落后，雜質多，導致患者用量過大，不方便服用，嚴重影響 了本品在臨床上應用。
【發明內容】
[0004] 發明目的：本發明的目的在于提供一種宜肝樂片在制備抑制胎盤絨毛癌細胞JAR 細胞增殖藥物中的應用。
[000引本發明的另一個目的在于提供一種宜肝樂片的制備方法。
[0006] 本發明的目的是通過如下的方案實現的： 宜肝樂片在制備抑制胎盤絨毛癌細胞JAR細胞增殖藥物中的應用，所述宜肝樂片由雞 矢藤200g、虎杖160g、馬鞭草200g、六月雪200g、馬蘭草200g、茅替200g、吉祥草170g、功勞木 lOOg、冷水花70g作為原料藥制成，所述宜肝樂片的制備方法包括如下步驟:取雞矢藤200g、 虎杖160g、馬鞭草200g、六月雪200g、馬蘭草200g、茅替200g、吉祥草170g、功勞木lOOg、冷水 花70g，加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為 4-6%，萃取壓力 15-30MPa，溫度30-50°C，C〇2流量l-3ml/g生藥· min，萃取時間700-800min， 得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片 重0.30邑。
[0007] 優選的，上述的宜肝樂片在制備抑制胎盤絨毛癌細胞JAR細胞增殖藥物中的應用， 所述宜肝樂片的制備方法包括如下步驟：取雞矢藤200g、虎杖160g、馬鞭草200g、六月雪 200g、馬蘭草200g、茅替200g、吉祥草170g、功勞木lOOg、冷水花70g，加入到C〇2超臨界萃取 器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40 °C，0)2流量2ml/g生藥· min,萃取時間750min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀 粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重0.30g。
[000引現有技術中，宜肝樂顆粒口服，一次lOg，一日3-4次。宜肝樂顆粒服藥量大。采用本 發明方法制備成的宜肝樂片每片重0.30g，每次僅需2片，一日服用3-4次。在具有更多活性 成分的條件下大大減少了服用量。此結論可w通過下述試驗證明。
[0009] 試驗一、不同方法制備的宜肝樂片中大黃素含量的比較 1、儀器及試藥本發明宜肝樂片：按實施例1方法制備，使用1500g原料藥，經提取制成 200片，每片重0.30g。原宜肝樂顆粒，按照￥5-10148(20-0148)-2002標準方法制備。 Agi 1 ent 1200高效液相色譜儀;METTLERAE240電子分析天平;大黃素對照品（中國藥品生物 制品檢定所）。
[0010] 2、方法 照高效液相色譜法(中國藥典2015年版第四部凡例十五)測定。
[0011] 色譜條件及系統適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.1%憐酸 溶液(80:20)為流動相;檢測波長為437nm。理論板數按大黃素峰計算應不低于4000。
[0012] 對照品溶液的制備精密稱取大黃素對照品適量，加甲醇制成每1ml含50yg的溶 液，即得。
[0013] 本發明的宜肝樂片的供試品溶液的制備取本發明的宜肝樂片5片，研細，取 0.12g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇20ml，超聲處理(功率250W，頻率25k監）1小 時，放冷，濾過，藥渣用無水乙醇洗涂4次，每次10ml，合并濾液與洗涂液，蒸干，殘渣加稀鹽 酸10ml使溶解，加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，放冷，移至分液漏斗中，用少量氯仿洗涂容 器，并入分液漏斗中；分取氯仿液，酸液加氯仿洗涂2次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣 精密加入甲醇10ml，稱定重量，微熱使溶解，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖 勻，濾過，取續濾液，即得。
[0014] 對照產品供試品溶液的制備取本品對照的宜肝樂顆粒20g，研細，取4g，精密稱 定，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇20ml，超聲處理(功率250W，頻率25k監）1小時，放冷，濾過， 藥渣用無水乙醇洗涂4次，每次10ml，合并濾液與洗涂液，蒸干，殘渣加稀鹽酸10ml使溶解， 加氯仿20ml，加熱回流30分鐘，放冷，移至分液漏斗中，用少量氯仿洗涂容器，并入分液漏斗 中；分取氯仿液，酸液加氯仿洗涂2次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘渣精密加入甲醇 10ml，稱定重量，微熱使溶解，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續 濾液，即得。
[0015] 測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μ1，注入液相色譜儀，測定，即 得。
[0016] 3、結果 結果表明，本發明宜肝樂片中大黃素的含量為0.95-1.86mg/片；而原宜肝樂顆粒中大 黃素的含量為〇.91mg/袋(每袋含顆粒劑lOg)，每次服用量2片的大黃素含量為原顆粒劑lOg 含量的2-4倍，在服用量減少的情況下，大黃素含量有很大提高。
[0017] 上述研究表明，采用本發明制備方法制備的宜肝樂片，有效成分含量遠遠高于胖5- 10148 (ZD-0148 ) -2002標準記載的方法制備的宜肝樂顆粒。
【具體實施方式】
[0018] 下面結合具體實施例對本發明作更進一步的說明，W便本領域的技術人員更了解 本發明，但不應將此理解為本發明上述主題的范圍僅限于W下的實例，凡基于本發明上述 內容所實現的技術均屬于本發明的范圍。
[0019] 實施例1 取雞矢藤200g、虎杖160g、馬鞭草200g、六月雪200g、馬蘭草200g、茅替200g、吉祥草 17〇g、功勞木lOOg、冷水花7〇g，加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃 取溶劑的體積百分比為5%，萃取壓力25MPa，溫度40°C，0)2流量2ml/g生藥· min,萃取時間 750min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200 片，每片重0.30g。
[0020] 經檢測，成品中大黃素的含量為1.85mg/片。
[0021] 實施例2 取雞矢藤200g、虎杖160g、馬鞭草200g、六月雪200g、馬蘭草200g、茅替200g、吉祥草 17〇g、功勞木lOOg、冷水花7〇g，加入到C〇2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃 取溶劑的體積百分比為4%，萃取壓力15MPa，溫度30°C，0)2流量Iml/g生藥· min,萃取時間 900min，得超臨界萃取物，將超臨界萃取物加入淀粉，70%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200 片，每片重0.30g。
[002引經檢測，成品中大黃素的含量化.21mg/片。