一種用于應(yīng)激性不孕癥機能修復(fù)的生物制劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種生物制劑，尤其設(shè)及一種用于應(yīng)激性不孕癥機能修復(fù)的生物制劑 及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 世界衛(wèi)生組織(WHO)將不孕癥定義為，結(jié)婚后至少1年同居、有正常性生活，且未采 取任何避孕措施而不能受孕的現(xiàn)象。進(jìn)一步地，根據(jù)既往有無妊娠史分為原發(fā)不孕和繼發(fā) 不孕。根據(jù)中國人口協(xié)會發(fā)布的調(diào)查結(jié)果顯示，我國不孕不育患者目前已超過4000萬，占育 齡人口的12.5%。而在20多年前，我國育齡人群中不孕不育率僅為3%。
[0003] 應(yīng)激是指內(nèi)外環(huán)境劇變刺激時，機體出現(xiàn)的包括精神、神經(jīng)、內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)等 的綜合應(yīng)答狀態(tài)。強烈身屯、應(yīng)激，尤其是長期慢性應(yīng)激，嚴(yán)重影響著人類的身屯、健康，導(dǎo)致 臨床疾病、亞健康狀態(tài)及早衰。其中，生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)對應(yīng)激刺激尤為敏感，月經(jīng)失調(diào)、高雄 激素血癥、閉經(jīng)、不孕、男女性功能障礙等均與身屯、應(yīng)激密切相關(guān)。
[0004] 在應(yīng)激性不孕癥的女性患者中，大部分是知識層次高、生活條件好的職業(yè)女性。運 些女性由于工作壓力大、生活節(jié)奏快而導(dǎo)致內(nèi)分泌失調(diào)，其癥狀有莫名地?zé)┰辍⑹?、月?jīng) 素亂等。有研究表明：自由基對糖類、脂類、蛋白質(zhì)、酶、核酸均有損害，自由基是機體代謝過 程不斷產(chǎn)生的損害自身的毒性產(chǎn)物，參與機體的生理病理過程。更年期女性的體內(nèi)自由基 含量升高，自由基清除酶活性下降，自由基代謝素亂。自由基含量升高會造成廣泛的屯、血管 損害，引起應(yīng)激性不孕癥的發(fā)生。而服用抗氧化劑能減輕氧化應(yīng)激損傷，可W有效改善應(yīng)激 性不孕癥。
[0005] 其中，CN102813834A公開了一種治療女性不孕癥的中藥制劑，CN1686497公開了一 種治療性功能障礙、月經(jīng)不調(diào)、不育癥和增強免疫功能的中藥制劑，在運些現(xiàn)有技術(shù)中，都 是由多種中草藥或其提取物研制而成的，而且需要經(jīng)過炮制或加工、進(jìn)一步提取有效成分 后服用方有顯著效果，但是往往運一過程繁瑣復(fù)雜;而如果不經(jīng)過加工直接服用，則由于吸 收的障礙，導(dǎo)致有效成分不易利用、效果不明顯的缺陷。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0006] 基于上述【背景技術(shù)】，本發(fā)明提供了一種用于應(yīng)激性不孕癥機能修復(fù)的生物制劑及 其制備方法，通過微生物復(fù)合發(fā)酵技術(shù)對植物的有效成分進(jìn)行轉(zhuǎn)化，使得到的生物制劑具 有更易吸收利用、效果顯著等特點，不僅如此，還能夠有效實現(xiàn)抗氧化、清除自由基、恢復(fù)應(yīng) 激性不孕癥機能的有益效果，是一種能夠改善應(yīng)激性不孕癥的天然生物制劑。
[0007] 本發(fā)明的技術(shù)方案包括一種用于應(yīng)激性不孕癥機能修復(fù)的生物制劑的制備方法， 其特征在于，包括：
[000引步驟1:按照釀酒酵母10-20份、嗜酸乳桿菌40-60份、雙歧桿菌20-30份的重量配比 混合得到混合菌，將其添加到紅糖水培養(yǎng)基中，于28-32°C條件下密閉培養(yǎng)至pH小于3.00， 然后繼續(xù)培養(yǎng)12-15天，得到復(fù)合菌；
[0009] 步驟2:按照葛根20-30份、沙棘10-15份、葡萄巧15-20份、紅糖5-10份、水40-60份 的重量配比混合得到復(fù)合培養(yǎng)基；
[0010] 步驟3:將所述復(fù)合菌添加到所述復(fù)合培養(yǎng)基中，于28-32°C條件下密閉培養(yǎng)50-70 天，得到復(fù)合發(fā)酵物；
[0011] 步驟4:對所述復(fù)合發(fā)酵物進(jìn)行浸泡、淋洗、濃縮、滅菌、成型，得到所述生物制劑。
[0012] 在本發(fā)明的一個實施例中，其中：
[0013] 所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)為保藏編號為ACCC20065的菌種；
[0014] 所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)為保藏編號為ACCC10637的菌種；
[0015] 所述雙歧桿菌(Bifidobacterium)為保藏編號為ACCCl 1054的菌種。
[0016] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述制備方法還包括菌種的培養(yǎng)，具體為：
[0017] 將釀酒酵母菌種接入馬鈴馨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，其中，培養(yǎng)溫度為28-32 °C，振蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)數(shù)為180-22化pm，振蕩時間為48-72小時，待培養(yǎng)基渾濁后取出，放入2-4 °0冰箱保存待用；
[001引將嗜酸乳桿菌菌種、雙歧桿菌菌種分別接入MRS液體培養(yǎng)基中進(jìn)行靜置培養(yǎng)，其 中，培養(yǎng)溫度為35-39°C，培養(yǎng)時間為48-72小時，待培養(yǎng)基渾濁后取出，放入2-4°C冰箱保存 待用。
[0019] 在一個實施例中，關(guān)于步驟1，優(yōu)選地，所述混合菌按照1:80-120的重量配比添加 到紅糖水培養(yǎng)基中，其中，所述紅糖水培養(yǎng)基的組分及其重量配比為紅糖5-10份、水90-98 份。
[0020] 在另一個實施例中，關(guān)于步驟2,優(yōu)選地，所述葛根、沙棘、葡萄巧通過粉碎機粉碎， 得到30-50目顆粒。
[0021] 在一個實施例中，優(yōu)選地，關(guān)于步驟3,所述復(fù)合菌按照1:15-20的重量配比添加到 所述復(fù)合培養(yǎng)基中。
[0022 ]在又一個實施例中，優(yōu)選地，關(guān)于步驟4，其中：
[0023] 將所述復(fù)合發(fā)酵物中添加水至固液重量配比為1:1，浸泡1-2天；
[0024] 然后淋洗，并將淋洗液在40-50°C條件下濃縮至20-30%，得到濃縮液；
[0025] 進(jìn)一步地，在60-70°C條件下滅菌10-30分鐘，得到濃縮滅菌液；
[0026] 所述成型是進(jìn)一步的加工過程，其中，所述生物制劑可W是固態(tài)制劑，也可W是液 態(tài)制劑，如口服液；
[0027] 其中，關(guān)于固態(tài)制劑的進(jìn)一步地加工步驟為:按照濃縮滅菌液15-30份、赤薛糖醇 15-30份、乳糖30-60份、保護(hù)劑3-5份的重量配比進(jìn)行稱取，先將所述赤薛糖醇和乳糖依次 加入噴霧干燥一步制粒機中，然后開始噴入所述濃縮滅菌液，流量為10-20ml/min，最后噴 入溶解于水中的保護(hù)劑，其中，所述制粒機的進(jìn)風(fēng)溫度為60-80°C，出風(fēng)溫度為40-60°C，待 噴霧器內(nèi)溫度降到25-35°C時出料，得到所述固態(tài)制劑；
[00%]其中，所述口服液的進(jìn)一步地加工步驟為:按照濃縮滅菌液45-50份、赤薛糖醇45-50份、保護(hù)劑5-10份的重量配比進(jìn)行稱取，先將所述赤薛糖醇和保護(hù)劑中加入適量熱水?dāng)?拌溶解，待冷卻至25-35°C后，加入所述濃縮滅菌液，攬拌至澄清，得到所述口服液。
[0029]本發(fā)明的技術(shù)方案還包括一種上述所述制備方法制備得到的所述生物制劑，用于 應(yīng)激性不孕癥機能的修復(fù)。
[0030] 本發(fā)明采用國家衛(wèi)計委公告的《可用于食品的菌種名單》中的菌種，采用常用的植 物和果實為原料，進(jìn)行復(fù)合發(fā)酵制備得到一種天然生物制劑。本發(fā)明綜合了現(xiàn)有保健品中 的第一類和第二類的有效成分，產(chǎn)品中富含大量抗氧化能力的活性成分，例如：黃酬類 (5.43%)、皂武類（83.4111旨/100旨）、氨基酸（6.51%)、谷脫甘膚（889111旨/100旨）、維生素0 (334111旨/100旨）、維生素6(90祉旨/100旨）、500(1940001]/100旨），乳酸鹽(5.04%似及多種微量 元素(鐵:503mg/kg;砸:0.18mg/kg等)等。
[0031] 本發(fā)明的技術(shù)方案具備改善應(yīng)激性不孕癥的功能，通過微生物復(fù)合發(fā)酵技術(shù)對植 物的有效成分進(jìn)行轉(zhuǎn)化，使其具有更易吸收利用、效果顯著等特點，是一種改善應(yīng)激性不孕 癥的天然生物制劑。
【具體實施方式】
[0032] 本發(fā)明提供了一種用于應(yīng)激性不孕癥機能修復(fù)的生物制劑的制備方法，其特征在 于，包括：
[0033] 步驟1:按照釀酒酵母10-20份、嗜酸乳桿菌40-60份、雙歧桿菌20-30份的重量配比 混合得到混合菌，將其添加到紅糖水培養(yǎng)基中，于28-32°C條件下密閉培養(yǎng)至pH小于3.00， 然后繼續(xù)培養(yǎng)12-15天，得到復(fù)合菌；
[0034] 步驟2:按照葛根20-30份、沙棘10-15份、葡萄巧15-20份、紅糖5-10份、水40-60份 的重量配比混合得到復(fù)合培養(yǎng)基；
[0035] 步驟3:將所述復(fù)合菌添加到所述復(fù)合培養(yǎng)基中，于28-32°C條件下密閉培養(yǎng)50-70 天，得到復(fù)合發(fā)酵物；
[0036] 步驟4:對所述復(fù)合發(fā)酵物進(jìn)行浸泡、淋洗、濃縮、滅菌、成型，得到所述生物制劑。
[0037] 在本發(fā)明的一個實施例中，其中：
[0038] 所述釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)為保藏編號為ACCC20065的菌種；
[0039] 所述嗜酸乳桿菌(Lactobacillus acidophilus)為保藏編號為ACCC10637的菌種；
[0040] 所述雙歧桿菌(Bifidobacteri皿)為保藏編號為ACCC11054的菌種。
[0041] 在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述制備方法還包括菌種的培養(yǎng)，具體為：
[0042] 將釀酒酵母菌種接入馬鈴馨液體培養(yǎng)基中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，其中，培養(yǎng)溫度為28-32 °C，振蕩培養(yǎng)的轉(zhuǎn)數(shù)為180-22化pm，振蕩時間為48-72小時，待培養(yǎng)基渾濁后取出，放入2-4 °0冰箱保存待用；
[0043] 將嗜酸乳桿菌菌種、雙歧桿菌菌種分別接入MRS液體培養(yǎng)基中進(jìn)行靜置培養(yǎng)，其 中，培養(yǎng)溫度為35-39°C，培養(yǎng)時間為48-72小時，待培養(yǎng)基渾濁后取出，放入2-4°C冰箱保存 待用。
[0044] 在一個實施例中，關(guān)于步驟1，優(yōu)選地，所述混合菌按照1:80-120的重量配比添加 到紅糖水培養(yǎng)基中，其中，所述紅糖水培養(yǎng)基的組分及其重量配比為紅糖5-10份、水90-98 份。
[0045] 在另一個實施例中，關(guān)于步驟2,優(yōu)選地，所述葛根、沙棘、葡萄巧通過粉碎機粉碎， 得到30-50目顆粒。
[0046] 在一個實施例中，優(yōu)選地，關(guān)于步驟3,所述復(fù)合菌按照1:15-20的重量配比添加到 所述復(fù)合培養(yǎng)基中。
[0047]在又一個實施例中，優(yōu)選地，關(guān)于步驟4，其中：
[004引將所述復(fù)合發(fā)酵物中添加水至固液重量配比為1:1，浸泡1-2天；
[0049] 然后淋洗，并將淋洗液在40-50°C條件下濃縮至20-30%，得到濃縮液；
[0050] 進(jìn)一步地，在60-70°C條件下滅菌10-30分鐘，得到濃縮滅菌液；
[0051] 所述成型是進(jìn)一步的加工過程，其中，所述生物制劑可W是固態(tài)制劑，也可W是液 態(tài)制劑，如口服液；
[0052] 其中，關(guān)于固態(tài)制劑的進(jìn)一步地加工步驟為:按照濃縮滅菌液15-30份、赤薛糖醇 15-30份、乳糖30-60份、保護(hù)劑3-5份的重量配比進(jìn)行稱取，先將所述赤薛糖醇和乳糖依次 加入噴霧干燥一步制粒機中，然后開始噴入所述濃縮滅菌液，流量為10-20ml/min，最后噴 入溶解于水中的保護(hù)劑，其中，所述制粒機的進(jìn)風(fēng)溫度為60-80°C，出風(fēng)溫度為40-60°C，待 噴霧器內(nèi)溫度降到25-35°C時出料，得到所述固態(tài)制劑；
[0053] 其中，所述口服液的進(jìn)一步地加工步驟為:按照濃縮滅菌液45-50份、赤薛糖醇45-50份、保護(hù)劑5-10份的重量配比進(jìn)行稱取，先將所述赤薛糖醇和保護(hù)劑中加入適量熱水?dāng)?拌溶解，待冷卻至25-35°C后，加入所述濃縮滅菌液，攬拌至澄清，得到所述口服液。
[0054] 本發(fā)明還提供了一種上述所述制備方法制備得到的所述生物制劑，用于應(yīng)激性不 孕癥機能的修復(fù)。
[0055] 其中，需要注意的是，