哥納香內酯c抑制血管平滑肌細胞增殖與遷移的用圖
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥領域，具體涉及哥納香內酯C抑制血管平滑肌細胞增殖與遷移的 新用途，更具體而言，本發明涉及抑制平滑肌細胞增殖和遷移的方法，包括向需要的哺乳動 物施用治療有效量的哥納香內酯C，以及含有哥納香內酯C的藥物組合物和藥盒，或者通過 抑制平滑肌細胞增殖和/或遷移而治療或預防疾病狀態的方法，包括向需要的哺乳動物施 用治療有效量的哥納香內酯C，所述疾病選自因內皮損傷、血管平滑肌細胞增生、基質沉積 所致的血管壁增厚和管腔狹窄性心血管疾病，包括動脈粥樣硬化、血管成形術后再狹窄、高 血壓、肺動脈高壓、糖尿病血管病變引起的疾病。
【背景技術】
[0002] 大花哥納香（Goniothalamus griffithii)是番蒸枝科哥納香屬的植物。該屬 植物多為東南亞及我國南方省區的民間草藥，常用作鎮痛藥和殺蟲藥。目前，在大花 哥納香植物中提取出多種活性成分，包括：番蒸枝內酯（acetogenins),苯乙烯批喃酮 (styrylpyrones)以及生物堿（alkaloids)類化合物。大花哥納香提取物對多種腫瘤細胞 有較強的細胞毒作用。
[0003] 哥納香內酯C(Goniolactones C)，是從哥納香屬植物景洪哥納香（Goniothalamus cheliensis Hu)根莖的95%乙醇提取物中分離得到的，其結構上屬于苯乙烯批喃酮類似 物，哥納香內酯C(Goniolactones C)的結構如下：
[0004]
(1)
[0005] 苯乙烯吡喃酮具有較強的抗真菌活性和腫瘤細胞周期抑制作用，而在心腦血管系 統疾病的細胞模型上鮮有此類化合物報道。
[0006] 血管壁由血管內膜、中膜和外膜層組成，是組織和器官的代謝、養分供應、血壓調 節等重要功能維持的生理性結構。血管內膜（tunica intima)是管壁的最內層，由內皮和 內皮下層組成，是三層中最薄的一層；中膜（tunica media)位于內膜和外膜之間，主要由 平滑肌細胞組成。一般說來，血管壁受損，通過細胞內的信號轉導可引起許多原瘤基因的表 達和細胞因子生成，從而使血管平滑肌細胞增殖和凋亡的平衡被打破，導致血管平滑肌細 胞向內膜下遷移、并異常增殖，最終引起血管內膜增厚。
[0007] 血管內膜增厚，是導致血管壁增厚和管腔狹窄性心腦血管疾病，如動脈粥樣硬化 性疾病、血管成形術后再狹窄、高血壓、肺動脈高壓、糖尿病血管病變引起的疾病的病理學 基礎。因此，通過尋找抗平滑肌細胞遷移和增殖達到抑制血管內膜增厚的藥物，是緩解高 血壓血管病變，延緩終末期腎病，改善糖尿病血管病變，預防缺血性卒中和冠心病，治療肺 動脈高壓和動脈樣硬化性疾病的重要手段，和藥物開發方向。
[0008] 研究表明，血小板源性生長因子（Platelet Derived Growth Factor, F1DGF)是重 要的促有絲分裂因子，包括三種主要的二聚體結構，即H)GF-AA，TOGF-BB及TOGF-AB，能促 進特定細胞群分裂增殖。當血管受到機械損傷或者其他因素刺激時，局部TOGF-BB分泌增 加。后者與平滑肌細胞膜上β型I 3DGF受體（PDGFR)結合，促使兩個受體分子形成二聚體， 激活細胞內結構域酪氨酸殘基自身磷酸化，并促使靶蛋白的酪氨酸殘基磷酸化，從而將信 號傳入細胞內，經級聯式放大瀑布效應調控細胞的生命活動，包括靶細胞的分裂增殖，因此 阻斷TOGF/PDGFR信號傳導，是尋找具有抗平滑肌細胞增殖乃至抗血管重塑活性化合物的 重要途徑。本發明首次在闡述了哥納香內酯C通過TOGR/roGFR通路抑制了血管重塑關鍵 環節--血管平滑肌細胞異常遷移和增殖，并繼而抑制了血管外基質沉積，因此具有預防 和\或治療血管重塑性疾病潛在活性，是哥納香植物提取物Goniolactones C的新用途，具 有創新性和新穎性。
【發明內容】
[0009] 本發明的目的在于提供哥納香內酯C在制備抑制平滑肌細胞增殖和/或遷移的藥 物、藥物組合物以及含藥材料設備中的應用。
[0010] 本發明一方面提供了哥納香內酯C在制備抑制平滑肌細胞增殖和/或遷移的藥 物、藥物組合物以及含藥材料設備中的應用，包括向需要的哺乳動物施用治療有效量的哥 納香內酯C。
[0011] 進一步，所述平滑肌細胞增殖和/或遷移是包括但不限于內皮損傷、外源性物質 刺激等因素引起的血管平滑肌細胞數量增加和/或位置的遷移，是導致血管壁增厚和管腔 狹窄性心腦血管疾病的病理學基礎。
[0012] 本發明還提供了哥納香內酯C在制備預防或治療血管壁增厚和/或管腔狹窄性心 腦血管疾病的藥物、藥物組合物以及含藥材料設備中的應用。
[0013] 進一步，所述的血管壁增厚和管腔狹窄性心腦血管疾病選自動脈粥樣硬化性疾 病、血管成形術后再狹窄、高血壓、肺動脈高壓、糖尿病血管病變引起的疾病。
[0014] 更進一步，所述的動脈粥樣硬化性疾病，選自因主動脈粥樣硬化引起的主動脈瘤、 因冠狀動脈粥樣硬化引起的冠狀動脈狹窄或阻塞（冠狀動脈粥樣硬化性心臟病）、因顱腦 粥樣硬化引起的血管狹窄、腦供血不足或局部血栓形成或斑塊破裂、碎片脫落造成腦栓塞 等缺血性腦卒中和慢性腦缺血導致的血管性癡呆、因腎動脈粥樣硬化引起的腎動脈血栓腎 臟缺血并最終導致的腎臟衰竭、因四肢動脈粥樣硬化引起的肢端血供障礙并最終發展成間 歇性跛行和壞疽，及因腸系膜動脈粥樣硬化引起的消化不良、腸道張力減低、便秘和腹痛。 所述的糖尿病血管病變引起的疾病選自糖尿病腎病，糖尿病視網膜病變，糖尿病神經病變， 糖尿病足。
[0015] 本發明還涉及哥納香內酯C的藥物制劑在制備抑制平滑肌細胞增殖和/或遷移以 及管壁增厚和/或管腔狹窄性心腦血管疾病的藥物以及含藥材料設備中的應用。所述藥物 制劑包括哥納香內酯C以及藥學上可接受的載體和/或輔料，所述制劑可以為片劑、膠囊 劑、顆粒劑、口服液、滴丸、微丸、注射劑等藥學上可以接受的藥物制劑形式。
[0016] 所述包含哥納香內酯C的藥物制劑可以利用本領域公知的方法制備得到。
[0017] 本發明化合物藥物組合物的給藥劑量依照所要預防或治療疾病的性質和嚴重程 度，患者或動物的個體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。
[0018] 本發明的有益效果在于：本發明通過I3DGF-BB作為誘導劑，觀察了哥納香內酯C對 TOGF-BB誘導的平滑肌細胞增殖、遷移、DNA合成和細胞增殖周期效應以及細胞外基質合成 與釋放效應，進一步闡述了哥納香內酯能抑制TOGF-BB誘導的平滑肌細胞增殖、遷移和細 胞外基質合成。通過對TOGF受體激酶活性檢測，發現哥納香內酯C能直接作用于TOGF受 體，抑制其受體激酶活性，從而減少TOGF-BB誘導的平滑肌細胞增殖、遷移和基質合成，是 適用于抑制血管平滑肌細胞增殖與遷移的新用途，為預防和/或治療因平滑肌細胞增殖與 遷移引起的血管壁增厚和/或管腔狹窄性心腦血管疾病提供一種高效、安全和經濟的解決 方法。
【附圖說明】：
[0019] 圖1 :哥納香內酯C抑制血清誘導的VSMC增殖效應；
[0020] 圖2 :哥納香內酯C對不同生長因子誘導的VSMC增殖效應的抑制作用；
[0021] 圖3 :哥納香內酯C對大鼠血管平滑肌細胞DNA合成的抑制作用；
[0022] 圖4 :哥納香內酯C抑制I3DGF-BB誘導的VSMC增殖周期；
[0023] 圖5 :哥納香內酯C抑制TOGF-BB誘導的大鼠血管平滑肌細胞遷移；圖6 :哥納香 內酯C抑制TOGF-BB誘導的粘附分子釋放；
[0024] 圖7 :哥納香內酯C對TOGFR激酶活性的作用。
【具體實施方式】
[0025] 下面的實施例用于進一步說明本發明，但這并不意味著對本發明的保護范圍的任 何限制。其中，Goniolactone C為哥納香內酯C。
[0026] 實施例1.哥納香內酯C抑制血清誘導的大鼠血管平滑肌細胞增殖
[0027] 實驗方法：雄性SD大鼠斷頭處死后，于無菌狀態下迅速取出胸主動脈血管，分 離其脂肪層，置于消化液（0.06 %胰酶+0.06 % I型膠原酶），在孵箱中消化20-30min ; 取出，完全去除外膜，用鑷子牽拉血管破壞其內膜，取平滑肌層，剪碎，置于培養皿內；用 DMEM/F12培養基+20% FBS培養；傳代時用0. 125 %胰酶消化；傳至第二代后換培養基： DMEM+10% FBS ;除非特別說明，本發明中所指平滑肌均為P3-P5代。大鼠血管平滑肌細胞 (Vascular Smooth Muscle Cell, VSMC)以IO4每孔的密度種于96孔板，至50%融合，撤血 清繼續孵育24h，隨后根據實驗設計，分別加入0, 2. 5, 5, 10, 20和40 μ M的哥納香內酯C預 孵育24h后，繼續加入血清至終濃度為10%，放入孵箱。24h后取出，采用結晶紫染色法， 在0D590處觀察各個組細胞的吸光度。對數幾率圖解法計算哥納香內酯C的半數抑制濃度 (IC50)。分組如下：正常對照組：未加血清與