貓爪草在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物方面的新用圖
【技術領域】
[0001] 本發明設及貓爪草的新用途，特別是貓爪草多糖的新用途，即在制備治療和/或預 防潰瘍性結腸炎藥物方面的新用途。
【背景技術】
[0002] 潰瘍性結腸炎化C)是一種發生在結腸和直腸的慢性非特異性炎癥性疾病，其發病 年齡較輕，在我國的發病率呈逐年增長的趨勢。潰瘍性結腸炎的病因病機尚不明確，中醫從 《內經》開始，歷經世代醫家的補充與闡釋，大致為W虛為主，兼夾熱、濕、疲。現代醫學則認 為其主要與免疫、感染、環境、遺傳等因素的相互作用有關，潰瘍性結腸炎常存在腸粘膜屏 障受損，導致抗原進入，免疫過度加強，從而導致臨床上的一系列癥狀，患者腸黏膜內常伴 有微血栓形成，血小板增多，血小板活化并啟動免疫反應，導致細胞因子、腫瘤壞死因子、白 介素相關因子的激活，出現一系列腸黏膜受損表現。研究表明潰瘍性結腸炎患者體內促炎 癥細胞因子水平升高，抑炎癥細胞因子水平降低，且升高的水平與疾病的嚴重程度成正相 關。
[0003] 潰瘍性結腸炎是一種病因復雜、病程漫長、病情多變、治愈難度高、復發率高的疾 病，被世界衛生組織列為現代難治病之一。目前的治療藥物主要有糖皮質激素、氨基水楊酸 制劑和免疫抑制劑等，雖然此類藥物已用于結腸炎的基礎研究及臨床治療，但是存在不良 反應發生率高、復發率高和療效欠佳等問題，所W急切需要一種安全有效的治療潰瘍性結 腸炎的藥物。
[0004] 中藥貓爪草的主要活性成分為貓爪草多糖、皂巧。"貓爪草的化學成分及藥理作用 研究進展"《中藥材》研究表明：貓爪草主要含有黃酬類及巧類、揮發油、有機酸等化合物，含 有屯個化合物，分別為羅漢松雙黃酬A、鄰苯二甲酸二、正二十一燒酸甲醋、5-徑甲基燒酸甲 醋、5-徑甲基慷醒、豆醬醇和谷醬醇的混合物、胡蘿h巧、棟桐酸等。其中貓爪草所含的多糖、 皂巧具有免疫調節的作用，被認為是其有效成分。
[000引貓爪草含有貓爪草皂巧、內醋、脂肪酸、醬醇類、多糖及微量元素等多種化學成分， 具有興奮免疫活性、清熱解毒、消腫、散結、利咽、殺菌、抗腫瘤活性等功效。已知貓爪草可用 于治療肺結核、頸淋己結結核、淋己肉瘤、療痛等病癥。
[0006] 目前尚未有貓爪草或貓爪草多糖用于治療潰瘍性結腸炎的相關報道。
【發明內容】
[0007] 本發明的目的是提供貓爪草在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物方面的新用 途；
[0008] 本發明的另一目的是提供貓爪草提取物在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物 方面的新用途；
[0009] 本發明的另一目的是提供貓爪草多糖在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物方 面的新用途；
[0010] 本發明的另一目的是提供貓爪草多糖的制備方法。
[0011] 本發明的目的是通過下列的技術方案實現的：
[001引本發明原料來源：
[0013] 貓爪草:貓爪草系別名貓爪兒草、=散草，系毛賞科植物小毛賞的塊根，為一年生 草本植物，簇生多數肉質小塊根，塊根呈卵球形或紡鍵形，頂端質硬，形似貓爪，直徑約3-5mm。貓爪草莖鋪散，高5-20cm，多分枝，較柔軟，大多五毛。基生葉有長柄，葉片形狀多變，單 葉或3出復葉，長5-40mm，寬4-25mm，小葉2淺裂至3深裂或多次細裂，末回裂片為倒卵形至線 型，無毛;葉柄長6-llcm。貓爪草主要分布在廣西、臺灣、江蘇、浙江等地，生于平原濕草地或 田邊荒地。貓爪草性平，味甘辛、溫，入肝、肺二經。中醫認為貓爪草具有化疲散結，解毒消 月中，治療耐多藥肺結核、追疾和淋己結炎等功效。
[0014] 國內外的研究資料表明，潰瘍性結腸炎可能與腸道的免疫系統密切相關，細胞因 子在機體的免疫系統調節過程中起著重要的作用。在潰瘍性結腸炎患者體內促炎癥細胞因 子水平升高，抑炎癥細胞因子水平降低，且升高的水平與疾病的嚴重程度呈正相關。隨著分 子生物學技術及基礎研究的不斷進展，科學家們認為單核細胞和巨隧細胞產生的炎性細胞 因子IL-I、化-6、IL-8、化-17及TNF-a等在腸道炎癥調控中具有重要作用，而炎性抑制因子 比-Ira、化-4、化-10則與炎性細胞因子的作用相抗衡。發明人在研究潰瘍性結腸炎的治療 過程中發現，植物貓爪草特別是貓爪草所含多糖表現出降低促炎癥細胞因子水平，升高炎 癥抑制細胞因子水平的作用，實現了對潰瘍性結腸炎病理進程的干預和病理癥狀的顯著改 善，從而有效治療潰瘍性結腸炎。
[0015] 白介素（IL)是細胞因子中最主要的具有多種生物活性的一組淋己因子，并在傳遞 信息，激活與調節免疫細胞，介導T、B細胞的增殖與分化及在炎癥反應過程中起著重要的調 節作用。
[0016] 白介素I(IL-I)是一種具有多種功能的細胞因子，尤其在應對病原入侵時宿主反 應的啟動與發展中起關鍵作用，是免疫與炎癥啟動的重要調節因子，可由單核細胞、肥大細 胞、平滑肌細胞和內皮細胞等分泌產生。有研究發現，UC患者治療后IL-I的另一種形式IL-I 0的含量明顯下降。化-ie能增加由巨隧細胞所產生的細胞因子如腫瘤壞死因子-a、化-6和 比-8,使得中性粒細胞向炎癥部位聚集，進入腸道病變部位，從而引起一系列的腸道病變。
[0017] 白介素2(化-2)是T細胞的生長因子，刺激T細胞進入細胞分裂周期，增強T細胞的 殺傷活性，還可增強NK細胞的活性，促進B細胞分泌等細胞免疫反應。UC患者機體內存在細 胞免疫的障礙，免疫系統處于激活狀態，UC發病機制可能與血清IL-2降低有密切關系。
[0018] 白介素4(IL-4)是n型輔助T細胞分泌的細胞因子，是典型的抗炎與免疫抑制性細 胞因子，它可W刺激活化B細胞和T細胞的增殖，在調節體液免疫、適應性免疫及腸道黏膜內 環境中發揮著重要的作用。
[0019] 白介素10(化-10)是一種多細胞源、多功能的細胞因子，參與炎性反應和免疫反 應，是目前公認的炎癥與免疫抑制因子。比-10為化2型細胞分泌，能抑制多種炎癥因子的合 成和生物活性，在黏膜系統中是一種重要的細胞因子調節劑，在潰瘍性結腸炎的發病過程 中發揮重要的作用。
[0020] 目前已有大量的研究證實了炎癥細胞因子在潰瘍性結腸炎中的重要作用。機體內 SOD活性及MDA濃度的變化反映機體局部或整體的炎癥反應情況和抗氧化反應的能力。貓爪 草多糖對UC大鼠的保護作用可能是一個復雜的機制，其具體機制還需做進一步研究。雖然 目前對其具體作用機制還不完全明了，但貓爪草多糖對UC模型動物具有較好的治療及保護 作用，其對炎癥細胞因子的調控過程中可能扮演著重要角色。
[0021] 本發明專利臨床應用的安全性較高，在治療潰瘍性結腸炎的藥物治療中不失為一 種好藥，其拓寬了治療潰瘍性結腸炎的新方法，同時為患者解決了現有技術治療潰瘍性結 腸炎時出現的不良反應。
[0022] 因此，申請人提供貓爪草、貓爪草提取物、貓爪草多糖能夠用于治療和/或預防潰 瘍性結腸炎藥物方面的新用途。
[0023] 本發明公開了貓爪草提取物在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物的應用，所 述貓爪草提取物的制備包括W下步驟：
[0024] 取貓爪草藥材，粉碎，加入藥材總重量6-12倍的水，70-100°C進行浸提2-3次，每次 1 -3h，過濾，濾液合并，得貓爪草提取液。
[0025] 本發明公開了貓爪草提取物在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物的應用，所 述貓爪草提取物的制備優選為W下步驟：
[0026] 取貓爪草藥材，粉碎，加水浸提2次，第一次加藥材重量12倍水100°C浸提3小時，第 二次加藥材重量10倍水l〇〇°C浸提2小時，合并提取液，過濾，得貓爪草提取液。
[0027] 本發明還公開了貓爪草多糖在制備治療和/或預防潰瘍性結腸炎藥物的應用，所 述貓爪草多糖的制備包括W下步驟：
[0028] 貓爪草提取液加熱濃縮至每L濃縮液含藥材300-800g，加濃縮液重量0.5-3倍的體 積百分比為30%-95%的乙醇攬拌均勻，靜置化，所得沉淀再用沉淀物重量5倍的30%-95% 乙醇洗涂2次，干燥，得貓爪草多糖。
[0029] 本發明公開的貓爪草多糖制備方法優選為W下步驟：
[0030] 貓爪草提取液加熱濃縮至每L濃縮液含藥材700g，加濃縮液重量1倍的體積百分比 為95%的乙醇攬拌均勻，靜置化，所得沉淀再用沉淀物重量5倍的95%乙醇洗涂2次，干燥， 得貓爪草多糖。
[0031] 貓爪草提取物和貓爪草多糖與醫藥學上可接受的載體配合成在制備治療和/或預 防潰瘍性結腸炎藥物方面的新用途。
[0032] 本發明提供的貓爪草、貓爪草提取物、貓爪草多糖用于治療和/或預防潰瘍性結腸 炎藥物方面的新用途具有W下優點：
[0033] 1、貓爪草、貓爪草提取物、貓爪草多糖從植物貓爪草中而得，安全無毒，可長期服 用。
[0034] 2、在"對潰瘍性結腸炎小鼠的影響"實驗中發現，貓爪草提取物及貓爪草多糖給藥 后，可提高UC小鼠血清中IL-2水平，降低血清中IL-IO水平。"對潰瘍性結腸炎大鼠的影響" 實驗結果顯示，本發明能降低UC大鼠血清中比-1水平，升高血清中化-4水平，升高大鼠腸組 織中SOD的含量，降低MDA的含量。運些數據表明本發明對潰瘍性結腸炎模型動物血清白介 素含量等具有明顯的改善作用，可有效治療潰瘍性結腸炎，治療效果最優為貓爪草多糖，貓 爪草提取物次之，但兩者均顯示出顯著的治療效果。
【具體實施方式】
[0035] 下面通過實施例進一步說明本發明。應該理解的是，本發明的實施例是用于說明 本發明而不是對本發明的限制。根據本發明的實質對本發明進行的簡單改進都屬于本發明 要求保護的范圍。
[0036] 實施例1:
[0037] 取Ikg貓爪草藥材，粉碎，加水浸提2次，第一次加藥材重量12倍水100°C浸提3小 時，第二次加藥材重量10倍水l〇〇°C浸提2小時，合并提取液，過濾，得貓爪草提取液。
[003引 實施例2:
[0039] 取化g貓爪草藥材，粉碎，加水浸提3次，第一次加藥材重量12倍水70°C浸提2小時， 第二次加藥材重量10倍水70°C浸提2小時，第二次加藥材重量8倍水70°C浸提1小時，合并提 取液，過濾，得貓爪草提取液。
[0040] 實施例3:
[0041] 取Ikg貓爪草藥材，粉碎，加水浸提2次，第一次加藥材重量12倍水100°C浸提3小 時，第二次加藥材重量10倍水l〇〇°C浸提2小時，合并提取液，過濾，得貓爪草提取液;取貓爪 草提取液加熱濃縮至每L濃縮液含藥材700g，加濃縮液重量1倍的體積百分比為95%的乙醇 攬拌均勻，靜置化，所得沉淀再用沉淀物重量5倍的95%乙醇洗涂2次，干燥，得貓爪草多糖。
[0042] 實施例4:
[0043] 取化g貓爪草藥材，粉碎，加水浸提3次，第一次加藥材重量12倍水70°C浸提2小時， 第二次加藥材重