用于刺激皮膚的表皮層和真皮層的局部組合物的制作方法
【專利說明】用于刺激皮膚的表皮層和真皮層的局部組合物 發明領域
[0001] 本發明涉及局部組合物，其包含維生素 A和胰島素樣生長因子（"IGF"），更具體地， 本發明涉及一種局部組合物，其包含維生素 A、初乳(或具有高IGF含量的初乳提取物），包含 或不含鳥類(avian)卵殼膜，該局部組合物刺激皮膚的表皮層和真皮層并處理皮膚老化。更 具體地，本發明涉及這樣的制劑:其包含皮膚學上可接受的載體中的維生素 A、初乳(或具有 高IGF含量的初乳的肽提取物），包含或不含鳥類卵殼膜，其可用于改善表面斑點、褐斑、發 紅區域、皺紋的出現和皮膚紋理。提供用于制備這些組合物的方法。
[0002] 發明背景
[0003] 維生素 A在身體中具有多種功能，例如視力、基因轉錄、免疫功能、胚胎發育和生 殖、骨代謝、造血作用、皮膚和細胞健康，以及抗氧化劑活性。維生素 A是一種脂溶性維生素， 在局部施用后，其能夠容易地進入皮膚。維生素 A的三種主要形式為：視黃醇、視黃醛 (retinaldehyde)(也稱為維生素 A醛(retinal))，以及視黃酸。最常用的形式是醇--視黃 醇。維生素 A及其類似物是細胞分化、細胞增殖和凋亡的高效調節劑。由于具有這些活性，維 生素 A和相關的化合物在胚胎發育和細胞增殖過程，以及相關于皮膚結構和皮膚健康的方 面中已具有最為廣泛的研究。近期，在增進對于類維生素 A在其它代謝過程(例如能量代謝） 的發展中可能所起的作用的方面，集中了相當多的新研究興趣。視黃醇對于皮膚的主要作 用涉及表皮增殖、糖胺多糖形成和結締組織保持。此外，維生素 A，如視黃醇，是一種眾所周 知的抗氧化劑。
[0004] 人類皮膚持續直接暴露至空氣、太陽輻射、環境污染物或其它機械與化學損傷，這 能夠誘導我們自身代謝的活性氧物質(ROS)以及自由基的生成。如下幾種因素會導致發展 外在的皮膚損傷：電離輻射、嚴重的身體和心理壓力、酒精攝入、營養不良、過度飽食、環境 污染，以及暴露至紫外輻射(UVR)。在所有這些環境因素中，估計UVR的作用高達80%。紫外 誘導的皮膚中ROS的生成發展出氧化壓力，此時，它們的形成超過了目標細胞的抗氧化防御 能力。UVR啟動人類皮膚中分子響應的主要機理是:通過ROS的光化學生成，主要形成超氧陰 離子(0(2)(-)( ·))、過氧化氫(H(2)0(2))、羥基自由基(0H( ·))，和單態氧（（1)0(2))。對 于我們皮膚的僅有的保護是其內源性保護（黑色素和酶促抗氧化劑)和我們由食物消耗獲 得的抗氧化劑(維生素 A、C、E等）。降低日光UVR損傷的最重要的策略是避免日光暴露和使用 防曬劑。下一步是通過經口或局部施用的外源性抗氧化劑的應用，以及阻止氧化壓力和增 強DNA修復的介入的應用。在紫外光的存在下，視黃醇是非常有效的抗氧化劑;事實上，據信 其對于抵抗紫外輻射的皮膚防御機制的正常運轉而言是必需的。
[0005] 維生素 A在皮膚中被代謝成視黃醛，以及維生素 A的生物活性形式，視黃酸。這些化 合物通稱為類維生素 A。類維生素 A是具有多效性功能，并且對于某些皮膚結構具有相對選 擇性靶向的化合物。它們屬于維生素，因為視黃醇(維生素 A)不在體內合成而是必須源自飲 食，但也屬于具有內分泌活性的激素，因為視黃醇會被轉換成與核受體結合的分子，顯示活 性，然后失活。類維生素 A通過結合并活化核類維生素 A受體來對目標細胞發揮其作用。類維 生素 A受體與其二聚體形式的配體結合。兩種不同的類維生素 A受體分子之間，以及，類維生 素 A X受體和維生素 D受體以及三碘甲狀腺氨酸受體之間，均能形成異二聚體。這指示了類 維生素 A和其它激素信號轉導分子之間的復雜相互作用。被其它信號轉導機制(例如AP-1) 激活的類維生素 A受體與轉錄因子的相互作用可能會使類維生素 A的作用離解。類維生素 A 能顯示激動活性，但也可以是中性拮抗劑和反向激動劑。局部和經口的視黃醇、維甲酸、異 維甲酸和貝沙羅汀(bexarotene)，局部的阿利維A酸、視黃醛、毛替垂尼、阿達帕林、他扎羅 汀，和系統素阿曲汀(acitretin)由一系列發布的類維生素 A構成。
[0006] 牛皮癬和相關疾病、角質化的先天性疾病、痤瘡、光老化和維生素缺乏癥A，是標準 公認的類維生素 A治療的適應癥;皮膚T細胞淋巴瘤、AIDS相關的卡波濟氏肉瘤、急性早幼粒 細胞性白血病和光化性小痣在近期被增加確認為類維生素 A治療的適應癥。類維生素 A已被 成功用于若干其它皮膚病，例如，上皮前癌和腫瘤、皮脂溢、紅斑痤瘡和痤瘡樣皮膚病、扁平 苔蘚、嗜酸性膿皰性毛囊炎、尖圭濕疏、萎縮性硬化性苔蘚和萎縮癥(atrophicus)。
[0007] 用于皮膚時，類維生素 A是高度有效的抗老化美容化合物。其能夠逆轉由UVA范圍 (315~400nm)內的紫外光所致的真皮損傷。類維生素 A的主要美容應用之一是用于造成老 化的皮膚的薄表皮的受控增殖。眾所周知，維生素 A對于皮膚健康的控制而言是必需的，其 中它在包含過度增殖和加速表皮增殖的延遲和減少方面均起作用。已顯示對皮膚施加某些 濃度的視黃醇會造成過度增殖。此外，在表皮和真皮的代謝之間存在相互關系，其中類維生 素 A(例如視黃醇)能夠誘導膠原合成和修復，并且促進再生。視黃醇施用的主要作用是增加 糖胺聚糖，具體是增加透明質酸。
[0008] 維生素 A控制表皮增殖，增加膠原彈性蛋白和糖胺聚糖的量，起到抗氧化劑的作 用，協助防止由UVA所致的損傷，使皮膚更加彈韌柔軟，并且協助控制區段性色素沉積。因為 其對皮膚具有多種益處，希望制出包含維生素 A的改善的組合物，以用于處理老化和日光損 傷的皮膚。
[0009] 胰島素樣生長因子(IGF)
[0010] 胰島素樣生長因子(IGF)是與胰島素具有高度序列相似性的一組蛋白質。IGF是細 胞通常與其生理環境交流的復雜系統的一部分。該復雜系統(通常稱作IGF〃軸〃）由以下部 分構成:兩種細胞表面受體（IGF1R和IGF2R)、兩種配體（IGF-1和IGF-2)、六種高親和性IGF 結合性蛋白質（IGFBP-1~IGFBP-6)的家族，以及相關的IGFBP降解酶，統稱為蛋白酶。胰島 素樣生長因子I(IGF-I)主要由肝臟經生長激素(GH)刺激后分泌。IGF-I對于常規生理學的 調節以及多種病理學狀態(包括癌癥)而言均具重要性。已顯示，IGF軸在細胞增殖的促進和 細胞死亡(凋亡）的抑制中具有作用。認為胰島素樣生長因子2(IGF-2)是早期發育所需的主 要生長因子，而IGF-I表達是實現最大生長所需的。已知造成循環中GH和IGF-I水平變化的 因素包括:個體的遺傳構成、一天中的時間、其年齡、性別、鍛煉狀態、壓力水平、遺傳學、營 養水平和身體質量指數(BMI)、疾病狀態、種族、雌激素狀態和外源性攝入。IGF-I涉及神經 發育的調節，包括神經發生、髓鞘形成、突觸發生，和樹突分枝，以及神經元損傷后的神經元 保護。兒童中IGF-I血清水平的升高與較高的IQ相關聯。IGF確實是多能且重要的生物學物 質。
[0011] 胰島素樣生長因子1受體(IGF-IR)是一種多功能受體，其介導用于細胞增殖、分化 和存活的信號。遺傳學實驗顯示，皮膚中IGF-IR的失活導致表皮破壞。已觀察到，真皮成纖 維細胞產生IGF-I，表皮基底角化細胞呈IGF-I陰性但呈IGF-I受體陽性，并且顆粒層的角化 細胞產生IGF-I。這些觀察結果指示，基底角化細胞的有絲分裂受真皮和顆粒層中表達的 IGF-I的調節，或者真皮成纖維細胞負責對基底角化細胞隔離IGF-I，并且顆粒層源性的 IGF-I可以是表皮分化的自分泌調節劑。IGF-I及其受體在毛囊中的分布指示，IGF-I在那些 位點處可能是成形素而非有絲分裂原，因為其增殖細胞而非其分化細胞呈IGF-I受體陰性。 此外，真皮乳頭的IGF-I受體表達似乎在從毛發生長初期到毛發生長中期的轉變過程中關 閉，這暗示了IGF-I在毛發生長周期中的調節作用。
[0012]胰島素樣生長因子I(IGF-I)受體對于體外表皮角化細胞增殖而言是至關重要的， 并且其在正常和牛皮癬表皮中的表達表明，其可能體內調節角化細胞增殖。在正常皮膚中， IGF-I受體由基底表皮角化細胞以及類基底或未分化的有發育力的與毛囊外根鞘、皮脂腺 和毛母質相關聯的表皮細胞表達。經歷由干癬、慢性皮膚損傷和蕈樣真菌病的〃再生〃分化 (角蛋白16+、Ki67+上基底角化細胞)的增生性表皮持續顯示IGF-I受體的表達的增加。在這 些情況中，擴大的IGF-I受體表達的區域界定了角化細胞增殖的表皮區域。這表明，細胞表 面IGF-I受體由具有增殖潛力的表皮細胞廣泛表達，該受體表達可由不同的表皮生長狀態 來調節，并且這些受體在高度分化的表皮細胞中被大幅下調。
[0013]人角化細胞對于紫外線B(UVB)的正確響應取決于胰島素樣生長因子I(IGF-I)受 體的活化狀態。在其中IGF-I受體非正確失活的條件下生長的角化細胞在UVB-誘導的DNA損 傷的存在下復制。在人類皮膚中，表皮角化細胞不表達IGF-I，從而角化細胞上的IGF-I受體 由真皮成纖維細胞分泌的IGF-I活化。現在已知，由人類成纖維細胞產生的IGF-I是角化細 胞的正確UVB響應所必需的。在體外的衰老的成纖維細胞中，IGF-I的表達被沉默。利用定量 反轉錄酶-PCR和免疫組織化學，已顯示體內的衰老真皮中，IGF-I表達也被沉默。衰老的皮 膚中IGF-I表達的減少與衰老的志愿者中的非正確UVB響應相關聯。最后，正確的UVB響應在 用外源性IGF-I預處理的體內的衰老的皮膚中恢復。這些研究為IGF-I受體(IGF-IR)在抑制 UVB-誘導的癌發生中的作用提供了進一步的證據，表明成纖維細胞在維持角化細胞IGF-IR 的正確活化中具有重要作用，并且暗示IGF-I在衰老的皮膚中的表達減少可能是老化相關 的非黑素瘤皮膚癌發展的重要部分。由除角化細胞以外的皮膚細胞局部產生的IGF-I，與其 受體(主要在基底角化細胞中表達)相互作用，以維持組織穩態。
[0014] IGF調節表皮的增殖;協助皮膚修復，是對UVB紫