一種奧沙利鉑脂質體凍干粉針劑的制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬于醫藥技術領域，設及祀向藥物和脂質體領域，尤其設及奧沙利銷脂質 體制劑的制備。
【背景技術】
[0002] 奧沙利銷（oxaliplatin)是繼順銷和卡銷之后的第Ξ代銷類抗癌藥，也是迄今為 止唯一對結直腸癌具有顯著活性的絡銷類藥物。與前兩代銷類藥物相比，奧沙利銷在體內 及體外的抗腫瘤作用效果好，且用藥相對安全。它對結直腸癌、非小細胞肺癌、卵巢癌等實 體瘤有明顯的抑制作用。然而奧沙利銷具有特異的屯、臟和神經系統毒性，且注射入體內后 在腫瘤組織蓄積較少，難W達到有效治療濃度。
[0003] 脂質體（liposome)作為一具有類生物膜雙分子層結構的藥物載體，具有低毒、細 胞親和性和祀向性等特點，在新型抗癌藥物的研究中具有廣闊的應用前景。脂質體是將脂 質在水中再分散時形成脂質雙分子層膜小泡，將藥物包封入類脂雙分子層形成的超微球 體。它通過外層類似細胞的雙層憐脂膜與人體細胞發生吸附、融合、脂交換和內吞等相互作 用，將脂質體內包封的藥物導入細胞中發揮作用。脂質體所載藥物廣泛，并能夠減少所需藥 量，增強藥物體內穩定性和藥理作用，降低毒副作用，使藥物具有被動祀向性特征。
[0004] 奧沙利銷作為一種新型抗腫瘤藥物，已在臨床應用中顯現出其獨特的優點。將 脂質體技術應用于奧沙利銷新制劑中，進一步降低其不良反應，增強藥物的祀向性，提 高生物利用度，減小給藥劑量，是近年來研究的熱點。上海醫藥工業研究院申報的專利 CN101897668A，一種奧沙利銷脂質體及其制備方法和用途；陳祥峰、蔡課霞申報的專利 CN101103972A，一種奧沙利銷脂質體葡萄糖制劑及其制備方法、應用，國立大學法人德島大 學、大鵬藥品工業株式會社申報的專利CN101925356,包含奧沙利銷脂質體制劑的抗腫瘤效 果增強劑和包含該脂質體制劑的抗腫瘤劑等，均提出了奧沙利銷脂質體的制備方法。 陽〇化]然而由于脂質體劑型穩定性較差，易發生聚集和滲漏，同時奧沙利銷也極易降解， 因此通常須將奧沙利銷脂質體制成凍干粉針劑W延長制劑的保存時間。然而奧沙利銷脂質 體在僅采取常規保護措施的情況下進行凍干將產生嚴重的滲漏，致使奧沙利銷的保留率降 低為20%甚至更低。在凍干過程中，預凍、冷凍干燥、復溶等步驟均不利于脂質體結構和功 能的穩定。冰晶的形成、滲透壓的改變、相分離及相轉變等因素均可導致脂質體膜折疊、融 合、破裂及藥物滲漏，運些現象在包載水溶性藥物的脂質體身上尤為嚴重。多數有關奧沙利 銷脂質體的文獻中制備得到的奧沙利銷脂質體保留率約在30%~50%左右，難W滿足運 輸、膽藏和臨床使用的要求。另一方面，包括上述專利在內，此領域內也尚未有專利解決奧 沙利銷脂質體的凍干滲漏問題，運極大限制了奧沙利銷脂質體的臨床價值。本專利詳細考 察了奧沙利銷脂質體的工藝，在凍干復溶的過程中采用了專屬的凍干保護劑和專屬的復溶 溶劑，顯著減少了奧沙利銷脂質體的凍干滲漏，為奧沙利銷脂質體的工業生產和臨床應用 打下了堅實的基礎。
【發明內容】
[0006] 本發明旨在提供一種注射用奧沙利銷脂質體凍干粉針劑。
[0007] 本發明的優點在于制備得到的奧沙利銷脂質體凍干粉針劑復溶后滲漏率較低，月旨 質體對奧沙利銷的保留率達到65%W上，較佳的，保留率達到70%W上。本發明中包封率 的測定同時采用透析法及葡聚糖凝膠柱法（S巧hadexG-50)，結果相互印證，可信度高。
[0008] 本發明制備得到的奧沙利銷脂質體凍干粉針劑復溶后的粒徑為150nm~200nm， Zeta電位為-35mV~-25mV，不易發生聚集或沉淀，體系具有良好的穩定性。
[0009] 本發明提供了一種價格低廉、工藝簡單的奧沙利銷脂質體的制備方法：稱取處方 比例的卵憐脂、膽固醇、DSPE-mPEG2000,混合后加入有機溶劑溶解，向其中滴加奧沙利銷溶 液，采用探頭超聲或高速剪切機制備反相膠束，置旋轉蒸發儀上去除有機溶劑后最終形成 脂質體。透析去除游離奧沙利銷，經0. 22μm微孔濾膜過濾除菌后得到。
[0010] 本發明提供了一種奧沙利銷脂質體凍干、復溶的方法：取制備得到的奧沙利銷脂 質體，稀釋后加入葡萄糖、薦糖、海藻糖、甘露醇、精氨酸中的一種或幾種作為凍干保護劑并 凍干，并采用含有葡萄糖、薦糖、海藻糖、甘露醇、精氨酸中的一種或幾種的水溶液復溶得 到。
[0011] 本發明詳細考察了奧沙利銷脂質體的凍干、復溶全過程，提供了一套能夠保證產 品具有良好重復性的凍干、復溶參數。所述的冷凍干燥過程包括預凍和凍干兩個步驟。預 凍過程中將奧沙利銷脂質體緩慢降溫至一定溫度后保持一段時間，再在一定真空度下完成 凍干。
[0012] 本發明提供的奧沙利銷脂質體凍干粉針劑安全、有效、穩定、質量可控，具有很大 的開發前景，有望成為一個新的制劑。
【具體實施方式】 陽〇1引 實施例1 :
[0014] 奧沙利銷 30mg
[0015] 大豆卵憐脂 120mg
[0016] 膽固醇 30mg 陽017] 配制6mg/血奧沙利銷9%薦糖水溶液5血。稱取卵憐脂、膽固醇，混合后加入8血Ξ氯甲燒和6mL乙酸的混合溶液溶解，向其中滴加奧沙利銷溶液，使用超聲細胞破碎儀在 350W功率條件下分散3min后，置旋轉蒸發儀上，在30°C，0. 5~0. 6MPa真空度條件下旋轉 蒸發化后最終形成脂質體，采用截留分子量為3500化的透析袋透析1化去除游離奧沙利 銷，經0. 22μm微孔濾膜過濾除菌。加入甘露醇和薦糖適量，溶解并混勻，使成甘露醇和薦 糖含量均為2 %的脂質體溶液，分裝至西林瓶中，每瓶凍干2地，并采用含有0. 2g/M^薦 糖和0.Ig/mL海藻糖的混合溶液復溶得到奧沙利銷脂質體溶液。 陽01引制備得到的奧沙利銷脂質體粒徑為196. 0 + 1. 7皿，Zeta電位為-28. 82 + 0. 80mV;奧沙利銷的濃度為0. 387111邑/1^，保留率為70%。
[0019] 實施例2:
[0020] 奧沙利鉆 40 mg 大