片仔癀及其制劑在制備治療多發(fā)性硬化癥的藥物中的應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，具體涉及片仔癀及其制劑在制備治療多發(fā)性硬化癥的藥物 中的應用。
【背景技術(shù)】
[0002] 多發(fā)性硬化癥（Multiplesclerosis，MS)是一種以中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性脫髓鞘病 變?yōu)榛A的自身免疫性疾病，病理特征為中樞神經(jīng)系統(tǒng)白質(zhì)內(nèi)多發(fā)的神經(jīng)髓鞘破壞及炎性 細胞浸潤。多發(fā)性硬化癥的多數(shù)患者病程呈復發(fā)、緩解型，每次復發(fā)后殘留程度不同的后遺 癥，隨著發(fā)作次數(shù)的增多，后遺癥逐漸加重，病情呈階梯式惡化，這也是青壯年致殘的主要 原因之一。目前，對于多發(fā)性硬化癥，一般采用糖皮質(zhì)激素、苯二氮革類、肌松劑等進行對癥 治療。然而，上述藥物存在毒副作用較大、不良反應多等缺點，進而導致患者依從性較差，從 而限制了其應用。
[0003] 片仔癀是國家一級中藥保護品種，米用麝香、牛黃、蛇膽、二七等名貴中藥精制而 成，具有清熱解毒、散瘀止血、消腫定痛的功效，臨床常用于治療細菌感染性疾病、病毒性肝 炎、支氣管炎、惡性腫瘤等疾病。關(guān)于片仔癀及其制劑在制備治療多發(fā)性硬化癥的藥物中的 用途未見報道。
[0004] 因此，研究新型的治療多發(fā)性硬化癥的藥物具有重要意義。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 為此，本發(fā)明提出片仔癀及其制劑在制備治療多發(fā)性硬化癥的藥物中的應用。
[0006] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)的：
[0007] 本發(fā)明提供片仔癀及其制劑在制備治療多發(fā)性硬化癥的藥物中的應用。
[0008] 優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述治療多發(fā)性硬化癥是指減輕多發(fā)性硬化癥的發(fā)病 程度。
[0009] 優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述治療多發(fā)性硬化癥是指降低血清中的IFN-γ和 IL-17、并升高血清中的IL-4。
[0010] 優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述治療多發(fā)性硬化癥是指減輕脊髓組織的病理損傷。
[0011] 優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述治療多發(fā)性硬化癥是指增加腦組織中S0D的表達。
[0012] 優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述治療多發(fā)性硬化癥是指促進腦組織細胞的凋亡。
[0013] 進一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述片仔癀按照常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成臨 床上可接受的制劑。
[0014] 進一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述制劑選自錠劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、 丸劑、酊劑、酒劑、煎膏劑或合劑。
[0015] 所述藥學上可接受的輔料為：填充劑、崩解劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、甜味劑、矯 味劑、防腐劑、基質(zhì)等。填充劑包括：淀粉、預膠化淀粉、乳糖、甘露醇、甲殼素、微晶纖維素、 蔗糖等；崩解劑包括：淀粉、預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷 酮、低取代羥丙纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素納等；潤滑劑包括：硬脂酸鎂、十二烷基硫酸鈉、 滑石粉、二氧化硅等；助懸劑包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纖維素、蔗糖、瓊脂、羥丙基甲基 纖維素等；粘合劑包括，淀粉漿、聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基甲基纖維素等；甜味劑包括：糖精 鈉、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矯味劑包括：甜味劑及各種香精；防腐劑包括：尼 泊金類、苯甲酸、苯甲酸鈉、山梨酸及其鹽類、苯扎溴銨、醋酸氯乙定、桉葉油等；基質(zhì)包括： PEG6000、PEG4000、蟲蠟等。
[0016] 進一步優(yōu)選地，本發(fā)明上述應用，所述片仔癀及其制劑的單位制劑中含片仔癀 0. 3-3. 0g〇
[0017] 本發(fā)明的上述技術(shù)方案相比現(xiàn)有技術(shù)具有以下優(yōu)點：
[0018] 本發(fā)明以多發(fā)性硬化癥的經(jīng)典動物模型一Μ0Ρ誘導的EAE為模型，從神經(jīng)功能評 分、病灶局部組織病理改變、炎癥因子表達、細胞凋亡等多方面、多角度評價了片仔癀對多 發(fā)性硬化癥的治療效果。實驗結(jié)果表明，片仔癀可以減輕EAE的發(fā)病程度，降低血清中的 IFN-γ和IL-17、并升高血清中的IL-4,減輕脊髓組織的病理損傷，增加腦組織中S0D的表 達，促進腦組織細胞的凋亡，對多發(fā)性硬化癥具有一定的治療作用，可以作為潛在的治療多 發(fā)性硬化癥的藥物。
【附圖說明】
[0019] 為了使本發(fā)明的內(nèi)容更容易被清楚的理解，下面根據(jù)本發(fā)明的具體實施例并結(jié)合 附圖，對本發(fā)明作進一步詳細的說明，其中：
[0020] 圖1是本發(fā)明實驗例中采用SABC免疫組化染色法測定腦組織中S0D的表達情況 的結(jié)果。
【具體實施方式】
[0021] 實施例1
[0022] 片仔癀按照常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成臨床上可接受的片劑。
[0023] 實施例2
[0024] 片仔癀按照常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成臨床上可接受的錠劑。
[0025] 實施例3
[0026] 片仔癀按照常規(guī)工藝，加入常規(guī)輔料制成臨床上可接受的膠囊劑。
[0027] 實驗例片仔癀對多發(fā)性硬化癥治療作用的研究
[0028] 1、實驗材料
[0029] M0G33-55多肽購自合肥國肽生物科技有限公司，完全弗氏佐劑、百日咳毒素購自 美國Sigma公司，片仔癀由漳州片仔癀藥業(yè)股份有限公司提供。
[0030] 2、實驗方法
[0031] 2. 1實驗動物
[0032] SPF級雌性SJL/J小鼠，6-8周齡，體重20-22g，50只。
[0033] 2. 2實驗性變態(tài)反應性腦脊髓炎動物模型（EAE)的建立方法
[0034]將50μgM0G33-55多肽溶于100μLPBS中，再與等量含有4mg/mL滅活結(jié)核菌素 H37RA的完全弗氏佐劑充分混合，用注射器反復抽打制成乳化劑。
[0035] 實驗組每只小鼠后背（脊柱兩側(cè)）皮下分4個點注射0. 2mL乳化劑，并于第1天 和第2天分別給實驗組小鼠腹腔注射百日咳毒素0. 5μg/只；空白組每只小鼠注射生理鹽 水。
[0036] 2.3實驗分組
[0037] 造模成功后，根據(jù)小鼠造模成功數(shù)量，將實驗動物隨機分組，分別為EAE模型組 (10只）、片仔癀高劑量組（10只）、片仔癀中劑量組（10只）、片仔癀低劑量組（10只），并 設置空白對照組（10只）。
[0038] 2.4給藥方法
[0039] 按照小鼠與人體表面積等效劑量折算，片仔癀低劑量組、片仔癀中劑量組、片仔癀 高劑量組分別設定給藥量為〇. 117g/kg/d、0. 234g/kg/d、0. 468g/kg/d。
[0040] 造模成功后，片仔癀低劑量組、片仔癀中劑量組、片仔癀高劑量組灌胃給藥；空白 對照組和EAE模型組每天灌服等體積的生理鹽水。連續(xù)給藥40天。
[0041] 2.5臨床評分標準
[0042] EAE模型小鼠的神經(jīng)功能評價采用Kono5分法評分標準：（1)不發(fā)病記為0分； ⑵尾巴無力、脫垂行走，記為1分；（3)輕微后肢無力或單側(cè)后肢拖行，記為2分；（4)嚴重 后肢麻痹或雙側(cè)后肢拖行，記為3分；（5)四肢麻痹，記為4分；(6)瀕臨死亡或死亡，記為5 分。
[0043] 當臨床癥狀介于兩個評分之間時，以較低分數(shù)加0. 5分表示；當達到或超過1分 時，為臨床EAE發(fā)病。
[0044] 3、檢測指標
[0045] 3· 1 -般行為學的觀察
[0046] 每日觀察小鼠的一般行為學，并測定小鼠體重隨造模及給藥時間的變化。神經(jīng)功 能評價采用上述Kono5分法評分標準。
[0047] 3. 2 血清中IFN-γ、IL-4、IL-17 的檢測
[0048] 各組動物分別于造模后20天（發(fā)病高峰期）尾部靜脈取血，室溫靜置1小時，低 溫離心留取血清，-80°C冰箱凍存待用。
[0049] ELISA檢測血清中IFN-γ、IL-4、IL-17,按照說明書進行操作。
[0050] 3. 3組織病理學的檢測
[0051] 給藥40天后，處死小鼠，分別取各組小鼠腦和脊髓組織，置于4%的多聚甲醛中固 定24小時。依次進行石蠟切片、HE染色、Luxolfastblue(LFB)髓鞘染色后進行觀察，并 比較各組之間的差異。
[0052] 3.4免疫組織化學的檢測
[0053] 采用SABC免