用于治療心肌梗塞的sdf-1的逆行遞送的制作方法
【專利說明】
[0001] 相關(guān)專利申請的交叉引用
[0002] 本專利申請要求2013年3月15日提交的美國臨時專利申請61/792, 954的權(quán)益， 所述專利申請全文以引用方式并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本文所公開的發(fā)明涉及缺血性心臟疾病的治療領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0004] 心力衰竭（HF)是西方國家發(fā)病率和死亡率的主要原因之一。即使當(dāng)前已有規(guī)范 化原則指導(dǎo)下的治療方法，但在美國仍有660萬的HF患者，并且每年的新發(fā)病例為670000。 HF的治療費(fèi)用在醫(yī)療保健系統(tǒng)中極為高昂。2008年，美國的慢性HF的估算直接和間接治 療費(fèi)用為348億美元，主要原因是與疾病相關(guān)的反復(fù)長期住院治療。新型有效的HF治療將 提高生活質(zhì)量并減少HF住院治療次數(shù)，這將為醫(yī)療保健系統(tǒng)提供臨床益處并節(jié)省費(fèi)用。
[0005] 產(chǎn)生HF的主要原因之一是由于缺血性心血管疾?。òㄐ募」Ｈ∕I))引起的 先前損傷。大多數(shù)缺血性HF患者的癥狀為心臟收縮功能障礙或心臟栗送能力下降。根據(jù) 最新的臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)，據(jù)估計，62% -67%的患有收縮性HF的患者都是由于以前的缺血性 心臟疾病而引起HF。這部分HF人群很有可能從治療性干預(yù)中受益。
[0006] 最近，已通過具有良好初期效果的基于干細(xì)胞的再生醫(yī)療對缺血病因及其前體、 急性MI引起的兩種HF進(jìn)行了針對性治療。再生醫(yī)療對于缺血性心臟病的治療具有較高的 治療潛力，因?yàn)榕c目前的治療不同，其重點(diǎn)是減輕癥狀或減少心臟的工作量，為退化器官提 供了修復(fù)和保留功能的機(jī)會。初步有效性（即，心臟功能的改善）已在若干臨床試驗(yàn)中得 到證明。雖然臨床效果良好，但干細(xì)胞治療仍然面臨與獲得和制備臨床用細(xì)胞的復(fù)雜和耗 時過程相關(guān)的挑戰(zhàn)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0007] 本文描述了治療局部缺血受試者的方法，該方法包括通過經(jīng)皮冠狀靜脈竇逆行灌 注向受試者的心臟施用一種藥物組合物，該藥物組合物包含編碼SDF-1的DNA質(zhì)粒和藥學(xué) 上可接受的載體或稀釋劑。
【附圖說明】
[0008] 圖1示出了編碼熒光素酶的質(zhì)粒的逆行灌注之后的熒光素酶表達(dá)。將施用了 5mg(A和B)或15mg(C和D)的質(zhì)粒的豬心臟切片并進(jìn)行生物發(fā)光成像，從而測定表達(dá)。
[0009] 圖2示出了編碼熒光素酶的質(zhì)粒的逆行灌注之后的熒光素酶表達(dá)。有色區(qū)域代表 蛋白質(zhì)表達(dá)的區(qū)域。圖中示出了兩個單獨(dú)的心臟的前部（A和D)、后部（B和E)以及心肌內(nèi) (C和F)等角度。
[0010] 圖3示出了在心力衰竭的豬模型中，在JVS-100的逆行冠狀靜脈竇遞送給藥60天 后的左室射血分?jǐn)?shù)（A)、左室收縮末期容積（B)和室壁運(yùn)動評分指數(shù)（WMSI) (C)的變化。
[0011] 圖4示出了逆行灌注的冠狀靜脈竇中的球囊導(dǎo)管的熒光鏡圖像。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 除非另外限定，否則本文所用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語具有與應(yīng)用所屬領(lǐng)域的 技術(shù)人員通常所理解的含義相同的含義。除非另外指明，否則本文全部公開內(nèi)容通篇 提及的所有專利、專利申請、已公布的申請和公布、Genbank序列、網(wǎng)站和其他已公布 資料的全文以引用方式并入本文。在本文中存在對術(shù)語的多個定義的情況下，此部分 中的定義優(yōu)先。除非另外限定，否則本文所用的所有技術(shù)術(shù)語具有與應(yīng)用所屬領(lǐng)域的 普通技術(shù)人員通常所理解的含義相同的含義。分子生物學(xué)術(shù)語的通常所理解的定義 可見于例如Riegeretal. ,GlossaryofGenetics:ClassicalandMolecular, 5th edition，Springer-Verlag:NewYork，1991 (Rieger等人，《經(jīng)典分子遺傳學(xué)詞匯表》，第 五版，施普林格出版社紐約分社，1991年）；以及Lewin，GenesV，OxfordUniversity Press:NewYork，1994(Lewin，《基因5》，牛津大學(xué)出版社紐約分社，1994年）。
[0013] 本文描述了涉及常規(guī)分子生物學(xué)技術(shù)的方法。此類技術(shù)在本領(lǐng)域中是眾所 周知的，并且在方法論文中進(jìn)行了詳細(xì)描述，例如MolecularCloning:ALaboratory Manual, 2nded.,vol. 1-3,ed.Sambrooketal. ,ColdSpringHarborLaboratory Press，ColdSpringHarbor，N.Y.，1989 (《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》，第二版，第 1-3 卷，Sambrook 等人編輯，冷泉港實(shí)驗(yàn)室出版社，紐約，1989年）；以及CurrentProtocolsinMolecular Biology,ed.Ausubeletal.,GreenePublishingandffiley-Interscience,New York，1992(《現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)》，Ausubel等人編輯，GreenePublishing和 Wiley-Interscience，紐約，1992年）（定期更新）還討論了核酸的化學(xué)合成方法，例如在 BeaucageandCarruthers，Tetra.Letts. 22:1859-1862, 1981(Beaucage和Carruthers， 《四面體通訊》，第 22 卷，第 1859-1862 頁，1981 年）；以及Matteuccietal.，J.Am.Chem. Soc. 103:3185, 1981 (Matteucci等人，《美國化學(xué)會志》，第103卷，第3185頁，1981年）中所 述。核酸的化學(xué)合成可在例如商用的寡核苷酸自動合成儀中進(jìn)行。免疫學(xué)方法（例如，抗原 特異性抗體的制備、免疫沉淀和免疫印跡）在例如CurrentProtocolsinImmunology，ed. Coliganetal·，JohnWiley&Sons，NewYork，1991(《免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室指南》，Coligan等人 編輯，約翰威立出版社，紐約，1991 年）；以及MethodsofImmunologicalAnalysis，ed. Masseyeffetal·，JohnWiley&Sons，NewYork，1992(《免疫分析方法》，Masseyeff等 人編輯，約翰威立出版社，紐約，1992年）中有所描述?；蜣D(zhuǎn)移和基因治療的常規(guī)方 法也可適用于本應(yīng)用。參見例如66116 1'116以口7:?1'；!_11(^口168 311(1八口口1；!_03七；!_0118,6(1· T.Blackenstein，SpringerVerlag，1999 (《基因治療：原理和應(yīng)用》，T.Blackenstein 編輯，施普林格出版社，1999 年）；GeneTherapyProtocols(MethodsinMolecular Medicine)，ed.P.D.Robbins，HumanaPress，1997(《基因治療方案（分子醫(yī)學(xué)方法）》， Ρ·D.Robbins編輯，Humana出版社，1997 年）；以及Retro-vectorsforHumanGene Therapy，ed.C.Ρ·Hodgson，SpringerVerlag，1996(《人類基因治療的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體》， C.P.Hodgson編輯，施普林格出版社，1996年）。
[0014] 在引用URL或其他此類標(biāo)識符或地址時，應(yīng)當(dāng)理解，此類標(biāo)識符可能發(fā)生改變并 且互聯(lián)網(wǎng)上的具體信息可不斷變化，但是可以通過搜索互聯(lián)網(wǎng)獲取等效的信息。對此類標(biāo) 識符的引用表明了此類信息的可獲得性和公眾傳播性。
[0015] 如本文所用，"核酸"是指包含至少兩個共價連接的核苷酸或核苷酸類似物亞基的 多核苷酸。核酸可為脫氧核糖核酸（DNA)、核糖核酸（RNA)、或者DNA或RNA的類似物。核苷 酸類似物可以商購獲得，并且制備包含此類核苷酸類似物的多核苷酸的方法是已知的。核 酸可以是單鏈的、雙鏈的、或它們的混合。出于本文的目的，除非另外指明，或者從上下文中 可明顯看出，否則核酸是雙鏈的。
[0016] 如本文所用，"DNA"旨在包括所有類型和大小的DNA分子，包括cDNA、質(zhì)粒以及包 含改性核苷酸和核苷酸類似物的DNA。
[0017] 如本文所用，"核苷酸"包括單磷酸核苷、二磷酸核苷和三磷酸核苷。核苷酸還包括 改性的核苷酸，例如但不限于硫代磷酸核苷酸和脫氮嘌呤核苷酸以及其他核苷酸類似物。
[0018] 如本文所用，