獲得透明質酸和游離形式維生素c和/或它們的鹽的穩定凝膠的方法
【專利說明】獲得透明質酸和游離形式維生素C和/或它們的鹽的穩定 凝膠的方法 發明領域
[0001] 本發明涉及一種交聯或非交聯透明質酸或稱為透明質酸鹽的其至少一種鹽，和維 生素C或稱為抗壞血酸鹽的其鹽的能存儲數月無任何顯著降解且優選不泛黃的穩定水凝 膠形式的可注射含水組合物的獲得方法。更具體地說，本發明涉及一種可通過這種方法獲 得的交聯或非交聯透明質酸或其鹽，和酸形式的維生素C或其衍生自維生素C鹽的抗壞血 酸鹽形式的等價物的水凝膠形式的可注射含水組合物。
[0002] 根據本發明的組合物可尤其用于美容或治療目的。
[0003] 現有技術方案
[0004] 通常以可注射凝膠的形式使用透明質酸組合物。在美容醫學或再生醫學中，為了 能夠填充皺紋和細紋、重塑面部或嘴唇，可在皮膚下注射透明質酸凝膠。這些凝膠也在治療 醫學中使用并尤其應用于眼科領域，其中，在角膜移植或青光眼或白內障手術后凝膠能夠 使眼睛獲得水分并緩解角膜疼痛。為了減少關節疼痛，特別是風濕病，也可在關節中注入凝 膠。
[0005] 通過使用添加劑可對這些凝膠進行改進，尤其是其效果的持續時間和在體內的抗 降解性。
[0006] 這些添加劑也可具有通過注射透明質酸增強治療效果的補充性效果。這樣的添加 劑，例如能延長期望效果的持續時間、優化所注入產品的分布、限制注射過程中的疼痛并提 供補充性作用，尤其是抗瘀斑性、抗氧化性或生成透明質酸或膠原的刺激性。
[0007] 在可以使用的各種添加劑中，L-抗壞血酸或維生素C由于其抗氧化性、抗衰老及 膠原促進性，因此是特別有利的。
[0008] 然而，已證明，將游離形式維生素C和/或其鹽-即以酸形式或衍生自維生素C鹽 的抗壞血酸鹽形式-與透明質酸凝膠組合不可能生成足夠穩定的凝膠。實際上，加入維生 素C使透明質酸降解并導致凝膠的液化和溶液的泛黃。在加熱消毒這些組合物時，它們快 速降解的情況下，這種變質是特別不希望的。此外，維生素C分子本身不是很穩定且快速降 解。因此，這樣的組合物不容易生產、存儲備用或滅菌。
[0009] 透明質酸凝膠和維生素C的降解導致凝膠粘度和粘彈性的顯著降低，即在完全分 解成液體之前早期降解的跡象，伴隨出現深黃色。
[0010] 從文獻US2001/0171286、TO2011/086458 和US2012/0225842 已知結合透明質酸 凝膠和抗壞血酸衍生物的可能包含添加穩定劑的穩定組合物。然而，只有當使用維生素C 衍生物，特別是抗壞血酸磷酸鎂或抗壞血酸磷酸鈉和抗壞血酸-2-葡糖苷（AA2G)時，這樣 的組合物才是穩定的。實際上，當使用游離形式的維生素C和/或其鹽時，當在高壓釜中對 組合物滅菌時，透明質酸凝膠迅速降解。在高壓釜中處理后，凝膠泛黃且降解。本領域技術 人員也知道透明質酸的這種降解。例如，文獻W0 95/29683和FR2 900 575描述了當透明 質酸凝膠與游離形式的維生素C或其鹽結合時，透明質酸凝膠的穩定性問題。
[0011] 此外，人們普遍接受的是，使用抗壞血酸酯，特別是棕櫚酸酯或其他維生素C衍生 物-例如，脂肪酸抗壞血酸鹽、抗壞血酸-2-葡糖苷或抗壞血酸磷酸鹽提供比直接使用游離 形式維生素C或其鹽更少的效果。
[0012] 因此，需要一種包含透明質酸和游離形式的維生素C和/或一種其鹽的可注射凝 膠，其足夠穩定以能夠在高壓釜中加熱滅菌，即凝膠的粘度和/或粘彈性不會顯著降低、凝 膠不會降解成液體形式且不會泛黃。
[0013] 發明目的
[0014] 本發明的目的尤其在于克服現有技術的這些缺點。
[0015] 更準確地說，本發明的一個目的是實施包含交聯或非交聯透明質酸或稱為透明質 酸鹽的其至少一種鹽、游離形式的維生素C和/或稱為抗壞血酸鹽的其鹽和選自偏亞硫酸 氫鹽的穩定劑的含水凝膠的獲得方法。
[0016] 在其實施方案的至少一個中，本發明的另一個目的是提供一種包含交聯或非交聯 透明質酸或對應透明質酸鹽，和游離形式的維生素C和/或稱為抗壞血酸鹽的其鹽的含水 凝膠。在凝膠或其組分，特別是維生素C無任何顯著降解的情況下，為了存儲數月，優選至 少6個月，凝膠必須足夠穩定以能夠在高壓釜中滅菌并包裝。
[0017] 在其實施方案的至少一個中，本發明的另一個目的是將透明質酸注射劑的優點和 以游離形式使用的維生素C和/或其鹽的抗氧化作用、抗衰老作用以及膠原促進作用結合。
[0018] 本發明的另一個目的是含有酸或鹽形式的交聯或非交聯透明質酸；游離形式，即 酸或抗壞血酸鹽形式的維生素C和/或其鹽，特別是抗壞血酸鈉；以及選自偏亞硫酸氫鹽的 穩定劑的制劑（formula)在化妝品領域中的用途。
[0019] 本發明的另一個目的是包含酸或鹽形式的交聯或非交聯透明質酸；游離形式的維 生素C或其鹽，特別是抗壞血酸鈉；以及選自偏亞硫酸氫鹽的穩定劑的可注射凝膠在美容 目的、再生目的或治療目的的用途。
[0020] 發明描述
[0021] 根據具體實施方案，本發明涉及一種制備包含透明質酸、維生素C和選自偏亞硫 酸氫鹽的穩定劑的含水凝膠的方法。
[0022] 根據本發明，這樣的方法包括下述步驟：
[0023] a)制備一種混合物，所述混合物包含摩爾質量為lOOODa至lOMDa的交聯或非交聯 透明質酸和/或其鹽、〇.lwt% -20.Owt%的酸形式的維生素C或其衍生自維生素C鹽的抗 壞血酸鹽形式的等價物、0. 〇lwt% -1. 00wt%的選自偏亞硫酸氫鹽的穩定劑以及為了形成 水凝膠加入的使得透明質酸含量為0. 01mg/ml-100mg/ml的水溶液；
[0024] b)在正在形成的水凝膠完全溶脹之前將混合物脫氣。
[0025] 本發明的一般原理是基于加入選自偏亞硫酸氫鹽的穩定劑，所述加入與在制備凝 膠過程中的組合物脫氣步驟結合。令人驚訝的是，發明人發現，當加入穩定劑與在制備凝膠 過程中的組合物脫氣步驟結合時，獲得凝膠的穩定性，即，至少6個月的時間內或在高壓釜 內處理時沒有降解，且沒有出現泛黃。所述穩定性對應于透明質酸凝膠本身關于其粘彈性 的穩定性和維生素C的穩定性兩者，后者也導致所述凝膠不存在泛黃。
[0026] 在凝膠的組合物中使用穩定劑。這種穩定劑必須與醫學應用或化妝品應用，特別 是注射劑相容。所述穩定劑選自按質量計〇. 01% -1%的濃度，優選〇. 08% -1%的濃度下 使用的還原劑或抗氧化劑。這種穩定劑選自偏亞硫酸氫鹽，優選地選自堿金屬偏亞硫酸氫 鹽和堿土金屬偏亞硫酸氫鹽，更優選地選自堿金屬偏亞硫酸氫鹽，最優選地選自偏亞硫酸 氫鉀和偏亞硫酸氫鈉。優選的穩定劑是偏亞硫酸氫鈉。
[0027] 因此，本發明是基于將使用偏亞硫酸氫鹽形式的穩定劑與脫氣步驟結合的完全新 穎和具有創造性的方法。事實上，如果加入穩定劑使得防止凝膠液化，但出人意料的是， 即使在高濃度穩定劑下，其也不可能防止凝膠泛黃。例如，濃度為〇.〇8wt% -lwt%的穩定 劑不可能防止凝膠的泛黃。為了防止透明質酸凝膠的泛黃，有必要在制備凝膠過程中進行 脫氣步驟。
[0028] 特別是，本發明人通過制備包含摩爾質量為lOOODa至10MDa(107Da)，優選50KDa 至5MDa，或更優選200KDa至3MDa的交聯或非交聯透明質酸或其鹽的膠凝化含水組合物解 決了這些降解和變色問題，過高摩爾質量使凝膠難以處理，而l〇〇〇Da以下的摩爾質量使組 合物太稀。膠凝化含水組合物還包含0.lwt% -20.Owt%，優選2wt% -10wt%的酸形式的 維生素C或其衍生自維生素C鹽的抗壞血酸鹽形式的等價物；0.Olwt% -1. 00wt%，優選 0. 08wt% -1. 00wt%的、選自偏亞硫酸氫鹽，優選地選自堿金屬偏亞硫酸氫鹽和堿土金屬偏 亞硫酸氫鹽，更優選地選自堿金屬偏亞硫酸氫鹽，最優選地選自偏亞硫酸氫鈉和偏亞硫酸 氫鉀的穩定劑（優選的穩定劑是偏亞硫酸氫鈉）；以及加入的使得透明質酸含量在〇. 〇lmg/ ml-100mg/ml，優選在 2mg/ml-50mg/ml的水溶液。
[0029] 將使用術語透明質酸以無差別地描述交聯或非交聯透明質酸或相應的透明質酸 鹽。優選地，透明質酸鹽是鈉鹽。
[0030] 根據期望的應用，可以使用交聯和非交聯透明質酸的混合物。事實上，交聯透明質 酸允許獲得較高的粘度和穩定性。相反，非交聯透明質酸允許獲得更流態的組合物。交聯 劑優選是二醇，其特別可選自1，4-丁二醇二縮水甘油醚、1，4-雙（2, 3-環氧丙氧基）丁烷、 1，4-雙縮水甘油氧丁烷、1，2-雙（2, 3-環氧丙氧基）乙烯和1- (2, 3-環氧丙基）-2, 3-環 氧環己烷。
[0031] 由于這些原因，在制造植入物中組合交聯透明質酸和非交聯透明質酸可以是有利 的。透明質酸特別在Allergan公司的商標Juvederm下或MedicisAesthetics公司的商 標Restylane下出售。
[0032] 術語維生素C可被解釋為涵蓋游離形式的抗壞血酸，即左旋酸形式或稱為抗壞血 酸鹽的其鹽形式的抗壞血酸。
[0033] 本領域技術人員可基于公知常識選擇用于制備透明質酸凝膠的水相以使其與可 注射凝膠的應用相容。
[0034] 可注射凝膠應