日蟾毒它靈在制備抑制血管新生藥物中的應用及日蟾毒它靈的藥物制劑的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及一種日蟾毒它靈的具體應用，特別是日蟾毒它靈在制備抑制血管新生 藥物中的應用，以及利用日蟾毒它靈制備的藥物制劑。
【背景技術】
[0002] 腫瘤在臨床上有實體瘤和非實體瘤之分，實體瘤即有形瘤，可通過臨床檢查如X 線攝片、CT掃描，B超、或觸診捫及到的有形腫塊稱實體瘤(如肺癌、乳腺癌、肝癌等）；非實 體瘤體瘤)，為X線、CT掃描，B超及觸診無法看到或捫及到的腫瘤屬于非實體瘤，如血液 病中的白血病、惡性淋巴瘤、多發性骨髓瘤等。目前，對非實體瘤的治療無法采用手術的方 式，多采用化療藥物聯合治療的方法。臨床化療藥物包括烷化劑、抗代謝藥物、植物堿、激素 和雜環類等。這些藥物的作用是全身性的，即作用于病變細胞的同時，也作用于正常細胞， 且毒性作用較強，對起重要防御作用的淋巴細胞、骨髓造血細胞的破壞較大，使機體免疫功 能受抑，以至患者死于化療副作用。近年來，中藥及天然藥物以其具有化療藥物活性，提高 機體免疫功能，減輕化療對機體的損害，無明顯毒副作用，藥源廣泛，價格低廉，宜長期服用 的優點，日益受到廣泛重視與研究。
[0003] 實體瘤的生長、發展可分為血管前期和血管化期。在腫瘤形成的早期，瘤體內并無 血管生長，此為血管前期，此期腫瘤細胞的增生和凋亡處于平衡狀態，生長緩慢，可持續多 年，相當于臨床上的原位癌，幾乎不發生轉移。腫瘤的進一步生長有賴于隨后的血管新生 (angiogenesis)表型啟動，促使腫瘤形成新生血管，進入血管化期。此期腫瘤組織主要 以血流灌注的方式獲取營養，腫瘤細胞呈指數生長且凋亡減少，導致腫瘤生長加速；新生血 管也為腫瘤細胞侵襲、轉移提供了有利條件。近年來大量研究結果表明，腫瘤生長依賴于血 管新生，不僅適用于實體瘤，并已擴展至包括白血病（又稱液體腫瘤）在內的所有腫瘤。因 此，抑制腫瘤血管新生對抑制腫瘤生長、轉移具有重要的指導意義，同時血管生成抑制劑已 成為抗腫瘤藥物研究的熱點，在腫瘤治療中發揮越來越重要的作用。
[0004] 蟾酥為蟾蜍科動物中華大蟾蜍（ife/bZw/b 或黑眶蟾蜍 (及//〇 的耳后腺及皮膚腺分泌的白色衆液，經加工干燥制成。 蟾酥在中國被應用了數千年，具有鎮痛、強心、升壓、局麻、抗炎和抗腫瘤等多種藥理活性， 特別是其抗腫瘤活性，近年來逐漸成為研究的熱點。
[0005] 日蟾毒它靈（Gamabufotalin)，是從中藥蟾酥（CS)分離出的一種單體化合物，屬 于蟾蜍二烯羥酸內酯的主要衍生物。分子式：C24H3405，分子量：402. 52,結構式如下所示
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【發明內容】
[0006] 本發明是為了解決現有技術所存在的上述不足，提出一種日蟾毒它靈在制備抑制 血管新生藥物中的應用，以及利用日蟾毒它靈制備的能夠抑制血管新生的藥物制劑。
[0007] 本發明的技術解決方案是： 日蟾毒它靈在制備抑制血管新生藥物中的應用。
[0008]日蟾毒它靈在制備抑制血管內皮細胞生長的藥物中的應用。
[0009] -種日蟾毒它靈的藥物制劑，其特征在于：所述的藥物制劑由含有有效治療劑量 的日蟾毒它靈及其藥物組合物配以一種或多種藥學上可接受的藥用賦形劑制成。
[0010] 所述的藥物組合物選自片劑、膠囊、丸劑、注射劑、緩釋制劑、控釋制劑或微粒給藥 系統。
[0011] 本發明同現有技術相比，具有如下優點： 本發明首次提出日蟾毒它靈在體內、體外均具有明顯的抑制血管新生作用的功效，請 求保護日蟾毒它靈在制備抑制血管新生作用的藥物中的應用，特別是日蟾毒它靈在制備抑 制血管內皮細胞生長的藥物中的應用；同時本發明還公開了一種藥物制劑，該制劑由含有 有效治療劑量的日蟾毒它靈及其藥物組合物配以一種或多種藥學上可接受的藥用賦形劑 制成，能夠起到抑制血管新生的作用。本發明涉及我國傳統中藥的現代化研究，促進了來源 于中藥的有效成分用于非實體瘤的治療以及中藥新藥的開發。因此可以說它具備了多種優 點，適合于在本領域中推廣應用，其市場前景十分廣闊。
【附圖說明】
[0012] 圖1.日蟾毒它靈對VEGF誘導HUVEC細胞管形成的影響。
[0013] 圖2.日蟾毒它靈對VEGF誘導主動脈環微血管生長的影響。
[0014] 圖3.日蟾毒它靈對VEGF誘導體內微血管形成的影響。
[0015] A通過專屬性染色觀察基質膠中微血管的數目。
[0016] B從小鼠皮下取出基質膠，觀察其顏色以初步判斷微血管的數目。
[0017] 圖4.日蟾毒它靈對A多發性骨髓瘤細胞系（麗1. S、RPMI8226、0PM2); B對三位患者體內分離到的⑶138+細胞； C以及健康志愿者B細胞存活率的影響。
[0018] D日蟾毒它靈作用于各種細胞的IC5。值。
[0019] 圖5.日蟾毒它靈對兩種荷瘤小鼠腫瘤體積及小鼠存活率的影響。
【具體實施方式】
[0020] 下面將結合【附圖說明】本發明的【具體實施方式】。
[0021] 本發明要求保護日蟾毒它靈在制備抑制血管新生藥物中的應用；特別是日蟾毒它 靈在制備抑制血管內皮細胞生長的藥物中的應用。所述的抑制血管新生是指體內抑制VEGF 誘導的血管新生或體外抑制血管內皮細胞的增殖以及主動脈環微血管生成。
[0022] 同時還要求保護一種日蟾毒它靈的藥物制劑，該藥物制劑由含有有效治療劑量的 日蟾毒它靈及其藥物組合物配以一種或多種藥學上可接受的藥用賦形劑制成；這里的藥物 組合物選自片劑、膠囊、丸劑、注射劑、緩釋制劑、控釋制劑或微粒給藥系統。
[0023] 上述藥物組合物可根據本領域公知的方法制備。可通過將本發明所公開的日蟾毒 它靈及其藥物組合物與一種或多種藥學上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結合，制 成適于人或動物使用的任何劑型。日蟾毒它靈在其藥物組合物中的含量通常為〇. 1-95重 量％。
[0024] 本發明所述的藥物制劑可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如 口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。
[0025] 給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括 真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括〇/V型、w/ο型和復乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑 和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、 分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散 劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉）霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠 劑、糊劑等。
[0026] 本發明所述的藥物制劑可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制 劑及各種微粒給藥系統。
[0027] 為了將本發明的藥物制劑制成片劑，可以廣泛使用本領域公知的各種賦形劑，包 括稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄 糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤劑可以是 水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉 伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹 月旨、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙 基纖維素、交聯聚乙烯吡咯烷酮、交聯羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、 聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化 硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。