一種用于治療心血管疾病的土鱉蟲小肽有效部位組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種用于治療屯、血管疾病的中藥有效部位組合物及其制備方法，具體 地說從±整蟲、=屯、丹參、鉤藤中提取的中藥有效部位組合物及其制備方法，屬于中藥領 域。
【背景技術】
[0002] 屯、血管疾病，又稱為循環系統疾病，是一系列設及循環系統的疾病，是世界范圍內 威脅人類健康的主要疾病，并己成為中國成人首要的死亡原因，是21世紀中國所面臨的主 要公共衛生問題之一。屯、血管疾病可W細分為急性和慢性，一般都是與動脈硬化有關，其基 本癥狀為屯、惇呼吸困難、紫組、眩暈、暈厥，常見病種有冠屯、病、高血壓、高血脂、屯、絞痛、急 性屯、肌梗死和運動巧死等。2008~2009年度《中國屯、血管疾病報告》指出：平均每10個成 年人中就有兩個人患屯、血管疾病，平均每10秒就有一個人死于屯、血管疾病然而，由于屯、血 管疾病的潛伏期較長，而且在此期間經常很少發現病毒潛入的征兆，所W在發病前，很難得 到人們足夠的重視。屯、血管疾病除了潛伏期長之外，還有另一個特點就是致死率高。平均 每兩個死亡人數之中，便有一個因屯、血管疾病死亡。由此可見，因屯、血管疾病死亡的人數是 所有死亡人數的一半，是當之無愧的"第一殺手"。
[0003] 隨著現代醫學的發展，屯、血管疾病的防治工作取得了一定的進展，新的治療手段 層出不窮。在西醫中，通常采用西藥巧日阿司匹林、0阻滯劑等)和手術治療。然而，西藥療 法療效雖好，但副作用大并且具有窄譜性；手術治療法則傷害大，容易給患者留下手術后遺 癥。因此，西醫治療未必是治療屯、血管疾病的上上之策。
[0004] 屯、血管疾病屬于中醫"胸搏、屯、痛"的范疇。病因病機為本虛標實，虛實夾雜。本 虛多表現為氣虛、屯、陽虛及氣陰兩虛；標實多表現為血疲、氣滯、疲濁、寒凝，臨證時要注意 辨證論治。應用中醫氣血理論指導屯、血管疾病的治療，并提出屯、血管疾病的基本病機是氣 虛血疲，治療應W益氣活血為基本治則。《癥因脈證?胸痛論》提出"疲凝氣結，或過飲辛熱， 傷其上焦則血積于內，而胸悶胸痛矣"。指出疲疲阻絡，導致胸痛。現代人多屬濕濁偏勝體 質，濕濁久之則變為疲濁，阻滯經絡，氣血運行失常，血液疲滯，疲疲互阻致屯、脈不楊，發為 胸悶屯、痛。中醫藥在防治屯、血管疾病上有其獨到之處，對改善臨床癥狀，提高生活質量有顯 著療效。相對于治療屯、血管疾病化學藥物的不良反應大的弊端，中藥及復方制劑因其藥物 的多組分性，常常對屯、血管疾病從抗氧化，改善微循環，擴張冠脈，增加血流量等多方面同 時發揮作用。目前應用的中藥多為有效部位或復方制劑，其所含的化學成分較多，作用也較 復雜，因此一些藥理作用機制及臨床的治療范圍有待進一步的研究，W便更好的指導該類 中藥的臨床用藥。
[0005] 中藥通過多途徑、多祀點、整合調節機制發揮藥效作用，具有系統性特點，但是，傳 統中藥化學成分復雜，藥效物質基礎不明確，難于質量控制。治療屯、血管疾病的各種中藥有 效部位的功效各有不同和側重，用有效部位的配伍代替全方，既具備中藥整體作用的特點， 同時降低了其復雜性，便于藥物的質量控制。因此，提供更加方便有效的中藥有效部位復方 制劑具有重要的臨床意義。
【發明內容】
[0006] 本發明的一個目的在于提供一種治療屯、血管疾病的中藥有效部位組合物； 本發明的另一個目的在于提供上述中藥組合物的制備方法和用途。
[0007] 本發明的第一目的：^±整蟲小膚、立屯總皂巧、丹參總酪酸和鉤藤總生物堿為原 料，加入適當藥用輔料，制成相關的劑型。
[0008] 本發明藥物的組合物的原料藥的組成及配比為：±整蟲小膚8~12重量份、立屯 總皂巧3~7重量份、丹參總酪酸6~10重量份、鉤藤總生物堿2~4重量份。
[0009] 本發明中藥藥物組合物優選的組成及配比為：±整蟲小膚10重量份己屯總皂巧 5重量份；丹參總酪酸8重量份；鉤藤總生物堿3重量份。
[0010] 上述小膚有效部位中小膚的含量不低于提取物的40%，總皂巧有效部位中總皂巧 不低于提取物的50% (w/w)，總酪酸有效部位中總酪酸不低于提取物的50% (w/w)，總生物 堿有效部位中總生物堿不低于提取物的60% (w/w)。
[0011] 該藥物組合物可W加入相應輔料，制成丸劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑中 的任一種。然后可W再加入其他具有治療屯、血管疾病的有效部位、有效成分、化學合成品或 者半合成品，然后再加入相應輔料，制成丸劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑中的任一 種。
[0012] 本發明中藥組合物的制備方法包括W下步驟： ① 上整蟲小膚的制備：取±整，適當粉碎，加10倍量水勻漿lOmin，加熱煮沸15min，放 冷至室溫，采用鹽酸調抑至1. 5~2. 0,然后加入底物量1%的胃蛋白酶，在40°C條件下酶解 Ih,然后采用氨氧化鋼溶液調節抑7. 5~8. 0,加入底物量1%的膜蛋白酶，在40°C條件下酶 解化，，酶解完畢后繼續升溫煮沸15min，放冷，離屯、，收集上清液，用截留相對分子質量為 SkD的中空纖維膜進行超濾，收集透過液，再W截留相對分子質量為150D~300D的陶瓷膜 進行納濾，收集未透過液，減壓濃縮，干燥，得±整蟲小膚；其中±整蟲小膚的含量為30%~ 50% ； ②S屯總皂巧的制備：取S屯根莖，粉碎后加入15倍量70%的乙醇回流提取3次，每次 2小時，合并乙醇提取液回收溶劑，干燥得乙醇提取物，乙醇提取物用少量水溶解后，按樹脂 量與藥材比例1:1通過DlOl大孔吸附樹脂柱層析，先用6倍量水洗脫，再用80%乙醇W2BV/ h的速度洗脫，收集4BV的洗脫液；減壓條件下濃縮，蒸干，得=屯總皂巧；其中總皂巧的含 量不得低于總提取物的50%。
[0013] ③丹參總酪酸的制備：取丹參藥材，粉碎后加入15倍藥材重量的水，于80加熱提 取3次，每次2小時，濾過，合并每次提取液，冷卻至室溫；提取液濃縮，醇沉至80,去醇，水 溶解后W樹脂：藥材1:1過大孔樹脂，先用6倍量水洗脫，再用70%乙醇W2BV/h的速度洗 脫，收集4BV的洗脫液，減壓條件下濃縮，蒸干得丹參總酪酸；其中總酪酸的含量不得低于 總提取物的50%。
[0014] ④鉤藤總生物堿的制備：取鉤藤藥材，粉碎后加入15倍藥材重量的70%乙醇，回 流提取3次，每次2小時，合并乙醇提取液回收溶劑，干燥得乙醇提取物，乙醇提取物用適量 2%鹽酸溶解后，按照樹脂量：藥材量1:1通過陽離子交換樹脂柱層析，先用6倍量水洗脫， 再用8倍量含5%的氯化鋼的50%乙醇溶液洗脫，合并洗脫液，用10%氨氧化鋼溶液調至近 中性后，堿液濃縮至干，將干燥品用無水乙醇加熱回流提取3次脫鹽，所得乙醇提取液合并 后減壓濃縮乙醇，干燥，得鉤藤總生物堿；其中總生物堿有效部位中總生物堿不低于提取物 的 60〇/〇。
[0015]⑥按照比例取上述小膚、總皂巧、總酪酸和總生物堿，不加輔料或加入輔料，制成 藥學上可W接受的劑型。
[001引增加：各樹脂的型號可W是Dioi大孔樹脂、D201大孔樹脂、AB-8大孔樹脂， 001X2. 5、001X7、001X15型陽離子交換樹脂。
[0017] 小膚、總皂巧、總酪酸、總生物堿的含量測定方法為： 小膚含量測定方法：取牛血清白蛋白對照品適量，精密稱定，加水制成每毫升含 0. 25mg的溶液，即得。精密量取對照品溶液0,0. 2,0. 4,0. 6,0. 8,1.Oml,分別置具塞試管 中，各精密加水至1.Oml,再分別精密加堿性銅試液1.Oml,搖勻，各精密加入福林酪試液 [取福林試液儲備液（1 一 16) ]4.Oml,搖勻，于55°C水浴中保溫5min，取出，置冷水浴中冷 卻lOmin，迅速測定，W0管為空白，照紫外一可見分光光度法，在650nm波長處測定吸光度 W吸光度為縱坐標，牛血清白蛋白質量為橫坐標，繪制標準曲線，并計算回歸方程。精密量 取提取液1ml，別置100mL量瓶中，加水至刻度，搖勻，作為供試品溶液；照標準曲線的制備 項下自分別精密加堿性銅試液1.Oml起，依法測定吸光度，從回歸方程中計算多膚的含量。
[0018] 總皂巧含量測定方法：精密稱取=屯皂巧Rl對照品適量，加甲醇制成每Iml含 0. 962mg的溶液，既得。分別精密吸取10. 0, 20. 0, 30. 0,40. 0, 50.Oul,分別置磨口具塞試管 中，熱水浴揮干溶劑，加5%香草醒-冰醋酸溶液（新配制）0. 2ml，高氯酸0. 8ml，于60恒溫 水浴15min，立即置冰水浴內冷卻，精密移取冰醋酸5mU搖勻，W相應試劑為空白，分別在 560nm波長