治療結腸炎的組合物、藥物及其制備方法
【技術領域】
[0001] 本發明設及一種治療結腸炎的組合物、藥物及其制備方法，即兩株益生菌與牛初 乳生長因子聯合使用的藥物，屬于醫藥技術領域。
【背景技術】
[0002] 結腸炎又稱非特異性潰瘍性結腸炎，其種類繁多，引發原因多樣，并且起病多緩 慢，病情輕重不一，主要臨床表現腹瀉、腹痛、粘液便及脈血便、里急后重、甚則大便秘結、數 日內不能通大便，時而腹瀉時而便秘，常伴有消瘦乏力等，多反復發作。腹痛一般多為隱痛 或絞痛，常位于左下腹或小腹。其它表現有食欲不振、腹脹、惡屯、、嘔吐及肝大等，左下腹可 有壓痛，有時能觸及疫李的結腸。常見的全身癥狀有消瘦、乏力、發熱、貧血等。有少部分病 人在慢性的病程中，病情突然惡化或初次發病就呈暴發性，表現嚴重腹瀉，給人或動物帶來 極大的痛苦。
[0003] 目前治療結腸炎的方法主要包括藥物治療、營養治療、屯、理治療及手術治療，其中 藥物治療是最主要的方法。在臨床上用于治療結腸炎的藥物主要有氨基水楊酸類藥物、腎 上腺糖皮質激素類和免疫抑制劑類等。氨基水楊酸類藥物能很好的抑制前列腺素合成，清 除氧自由基從而減輕炎癥反應；然而其無法根治結腸炎，且患者服藥劑量偏大時，易產生諸 多不良反應（如：頭疼、惡屯、、白細胞下降等）。糖皮質激素是重度或爆發性結腸炎患者的 首選藥；然而該類藥物易導致機體代謝素亂、水滯留等副作用，可作為應急藥物，無法長期 使用。免疫抑制類藥物藥物依賴性大，治療期較長，且可能致毒致癌，副作用較大，所W-般 只作為輔助治療使用。總體來說，上述藥物治療見效快、療效好，可緩解結腸炎患者燃眉之 苦，但仍存在很多問題。首先，無法根治患者結腸炎，治標不治本；其次，不良作用大，易引起 患者頭疼、惡屯、，造成機體消化系統、血液系統異常；然后，潛在的致毒致癌性；最后，抗生 素類藥物（如應用最廣的SAS巧易導致機體耐藥抗藥性。
[0004] 也有專利報道采用中藥組合物對結腸炎進行治療，如申請號為200710066007. 3的 發明專利"治療慢性結腸炎及潰瘍性結腸炎的藥物及制備方法"，申請號為200610167659. 1 的發明專利"一種治療潰瘍性結腸炎的藥物及其制備方法"，由于運些中藥的成分復雜，療 效慢，療程長，治療效果也難W保證，因此運些中藥組合物制成的藥物至今沒有得到大范圍 推廣應用。所W對于治療結腸炎運種難W治愈的疾病，研發一種新的藥物具有十分重要的 意義。雖有文獻報道益生菌可W治療潰瘍性結腸炎，但是目前還沒有關于采用益生菌聯合 牛初乳生長因子聯合使用治療結腸炎的報道。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的之一是提供一種治療結腸炎的組合物，可W有效的治療結腸炎，并 且毒副作用較小，不易產生抗性。
[0006] 本發明的另一個目的是提供一種治療結腸炎的藥物及其制備方法，使用療結腸炎 的組合物，同樣可W達到好的效果。
[0007] 為了實現上述目的，本發明提供如下技術方案：
[0008] 一種治療結腸炎的組合物，包括益生菌和牛初乳生長因子，所述的益生菌為嗜 酸乳桿菌（Xactobacillusacidophilus)CGMCC10436 和植物乳桿菌（Xactobacillus planta;rum)CGMCC9961，所述的嗜酸乳桿菌菌體數量占益生菌菌體總數量的20~80%。
[0009] 優選地，所述的嗜酸乳桿菌和植物乳桿菌的菌體數量比為1 :1。
[0010] 所述的牛初乳生長因子為從牛初乳中提取的生長因子粗提物；所述的益生菌均為 活菌菌體形式，所述的益生菌的活菌菌體由均處于穩定初期的乳桿菌液體培養物分別離屯、 收集的菌泥。
[0011] 所述的益生菌菌體用量為2Xl〇i°CRJ/kg，所述的牛初乳生長因子用量為220~ 320mg/kg。即每千克的動物、人體等所用的藥物中嗜酸乳桿菌CGMCC10436和植物乳桿菌 CGMCC9961的總數量為2Xl〇i°CFU，牛初乳生長因子用量為220~320mg，具體地，可W根據 實際情況進行計算，比如，一個重量為20g的大鼠，其用藥中含有嗜酸乳桿菌CGMCC10436和 植物乳桿菌CGMCC9961的總數量為2XIO9CFU,牛初乳生長因子用量為4. 4~6. 4mg;-個 重量為50kg的人，其用藥中含有嗜酸乳桿菌CGMCC10436和植物乳桿菌CGMCC9961的總數 量為IXIOi2CRJ,牛初乳生長因子用量為11~16邑。
[0012] 其中，所述的組合物可W制成一切可W保留其活性的物品，如乳品、藥物、食品等。
[0013] 本發明還公開了一種治療結腸炎的的藥物，包括前述的組合物。
[0014] 所述的結腸炎包括潰瘍性結腸炎、感染性結腸炎、出血性結腸炎，并且不限于此。
[0015] 上述治療結腸炎的藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0016] (1)分別將嗜酸乳桿菌和植物乳桿菌在MRS培養基培養12~16h;
[0017] (2)分別取步驟（1)得到的嗜酸乳桿菌菌液9~11體積份，植物乳桿菌菌液3~ 5體積份，離屯、取菌泥，然后分別將它們溶于1體積份無菌PBS中，得混合菌泥；
[0018] (3)對牛初乳離屯、脫脂、酸沉酪蛋白、二次超濾、透析及干燥制得牛初乳生長因子 粗提物；
[0019] (4)將牛初乳生長因子粗提物44~64質量份加入到上述混合菌泥中，攬拌均勻， 然后加入合適的輔料制成臨床可接受的劑型。運里的體積份和質量份理解為：如果步驟 (2)中用9~Ilml的嗜酸乳桿菌菌液、3~5ml植物乳桿菌菌液，則對應用44~64mg的牛 初乳生長因子粗提物，即體積份/質量份=ml/mg。
[0020] 優選地，所述治療結腸炎的藥物的制備方法，包括如下步驟：
[0021] (1)分別將嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌在MRS培養基培養14h;
[00巧 似分別取步驟（1)得到的嗜酸乳桿菌菌液10體積份，植物乳桿菌菌液4體積份， 離屯、取菌泥，然后分別將它們溶于1體積份無菌PBS中，得混合菌泥；
[0023] (3)對牛初乳離屯、脫脂、酸沉酪蛋白、二次超濾、透析及干燥制得牛初乳生長因子 粗提物；優選地，對牛初乳在4°C離屯、，干燥采用冷凍干燥。
[0024] (4)將牛初乳生長因子粗提物54質量份加入到上述混合菌泥中，攬拌均勻，然后 加入合適的輔料制成臨床可接受的劑型。
[0025] 本發明所采用的嗜酸乳桿菌CGMCC10436的保藏號為CGMCCNo. 10436,保藏日期 為2015年Ol月26號，所述植物乳桿菌CGMCC9961的保藏號為CGMCCNo. 9961，保藏日期 為2014年11月13號，保藏單位均為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中屯、，地 址為北京市朝陽區北辰西路I號院3號，中國科學院微生物研究所。
[00%] 本發明的有益效果：
[0027] 牛初乳生長因子可通過與腸黏膜細胞酪氨酸激酶受體結合，從而促使腸黏膜細胞 生長和增殖，增加腸絨毛高度，促進腸道發育；并可通過調控炎性因子水平來促進機體免疫 力。本發明采用的益生菌可通過與有害菌競爭位點來調節腸道菌群平衡，而且植物乳桿菌 CGMCC9961可產生細菌素，抑制有害菌的增殖；嗜酸乳桿菌CGMCC10436具有很好的益生作 用。結果顯示，兩者聯合使用制成的藥物具有較好的抗結腸炎作用。并且具有協同增效的 作用。其效果比單獨使用兩種菌、單獨使用牛初乳生長因子效果要好。具體表現在顯著改 善結腸炎小鼠的表觀狀態，增加結腸炎小鼠的體重、結腸長度，并顯著提高小鼠結腸組織的 完整性。
【附圖說明】
[0028] 圖1為不同組小鼠宏觀病理學評分。
【具體實施方式】
[0029] 本發明人針對當今全球醫藥領域對結腸炎的治療都感到棘手的情況下，依據益生 菌及生長因子可W增強機體免疫力，對人體腸道病（如腹瀉等）有很好的治療效果，本發明 將兩株益生效果較好的乳桿菌活菌菌體與牛初乳生長因子粗提物聯合制成藥物，用于動物 試驗研究，W下是對本發明的詳細描述。
[0030] 實施例僅是范例性的，并不對本發明的范圍構成任何限制。本領域技術人員應該 理解的是，在不偏離本發明的精神和范圍下可W對本發明技術方案的細節和形式進行修改 或替換，但運些修改和替換均落入本發明的保護范圍內。本發明所采用的各種材料、試劑或 用具如無特殊說明，均可W從市場中獲得。
[0031] 為了證明本發明的有效性，申請人進行了如下試驗。 陽〇3引（一）材料與試劑
[0033] 1、培養基：MRS培養基。
[0034]MRS培養基配制：蛋白腺5g/L，牛肉膏5gA，膜蛋白腺lOg/L，酵母粉5g/L，葡萄 糖20g/l，無水乙酸鋼5g/l，巧樣酸氨二胺2g/l，憐酸氨二