攸縣油茶提取物及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于化妝品和醫藥技術領域，具體涉及從攸縣油茶中提取天然活性物 質--攸縣油茶提取物，以其為活性成分的化妝品或藥物，以及攸縣油茶提取物在制備保 濕、嫩膚、抗皺、防曬、美白等多種皮膚化妝品中的應用，還有在制備治療或預防皮膚病的藥 物中的應用。 技術背景，
[0002] 攸縣油茶（Camellia yuhsienensis Η· H. Hu.)為山茶科山茶屬常綠灌木或小喬 木。樹皮光滑，葉革質，橢圓形或近倒卵形，深綠色，花單生枝頂，為白色，葉面深綠色，無光 澤或略具光澤，沿中脈被微硬毛，背面淡綠色。生長于我國湖南省攸縣境內。
[0003] 攸縣油茶是我國特有的經濟樹種之一，也是我國江南丘陵地區最重要的食用油料 樹種，已有了兩千多年的栽培歷史。由于攸縣油茶果實中富含不飽和脂肪酸、甘油脂及各種 維生素，具有清熱降火、清肝明目、延年益壽之功效，所以一直以來，攸縣油茶一直是理想 的高營養、低熱量，高檔保健食用油的主要材料來源。本發明通過實驗提取攸縣油茶茶花中 的有效成分，并進行了細胞毒性及皮膚化妝品活性實驗，明確了攸縣油茶提取物不僅擁有 良好的安全性還表現出優秀的皮膚化妝品活性即良好的DPPH自由基清除效果，使之成為 了良好的天然護膚品原材料來源，為攸縣油茶的開發和利用提供了更好、更佳的途徑，對于 攸縣油茶未來的可持續利用具有重大意義。
【發明內容】
[0004] 本發明目的在于提供攸縣油茶提取物，以其為活性成分的化妝品，它們的制備方 法，及其在制備化妝品中的應用。本發明明確了攸縣油茶提取物具有良好的護膚效果和安 全性，使其成為很好的天然護膚化妝品原材料。
[0005] 為了實現本發明的上述目的，本發明提供了如下的技術方案：
[0006] 攸縣油茶提取物，由下述方法制備而得：取攸縣油茶花，研成粉末，用攸縣油茶花 的15-30倍量的85% -95%乙醇，冷浸18-28h，收集濾液，重復2-5次，濾液減壓蒸餾，濃縮 濾液，低溫干燥，得粗提物，將粗提物經大孔樹脂吸附脫色，85 % -95 %乙醇洗脫后，濃縮蒸 干，低溫冷凍干燥，得攸縣油茶醇提取物。
[0007] 本發明還提供了一種化妝品，由上述的攸縣油茶提取物和化妝品常用載體組成， 所述的載體選自一種或多種含水體系，甘油、C1-4醇、脂肪醇、多元醇、脂肪醚、脂肪酯、乙二 醇、丙二醇、植物油、礦物油、脂質體、層狀類脂材料、硅油、水，或者它們的組合。
[0008] 以及，所述的攸縣油茶提取物在制備化妝品中的應用。
[0009] 所述的攸縣油茶提取物在制備保濕或嫩膚或抗皺或防曬或美白化妝品中的應用。 [0010] 所述的攸縣油茶提取物在制備麻醉劑、抗真菌劑、抗炎劑、防腐劑、螯合劑、著色 劑、脫色劑、軟化劑、乳化劑、脫落劑、成膜劑、芳香劑、濕潤劑、驅蟲劑、潤滑劑、增濕劑、藥 劑、光穩定劑、防腐劑、皮膚保護劑、皮膚滲透增強劑、防曬劑、穩定劑、表面活性劑、增稠劑、 粘度調節劑、維生素中的應用。
[0011] 所述的攸縣油茶提取物在制備麻醉劑、抗真菌劑、抗炎劑、抗氧化劑、防腐劑、螯合 劑、著色劑、脫色劑、軟化劑、乳化劑、脫落劑、成膜劑、芳香劑、濕潤劑、驅蟲劑、潤滑劑、增濕 劑、藥劑、光穩定劑、防腐劑、皮膚保護劑、皮膚滲透增強劑、防曬劑、穩定劑、表面活性劑、增 稠劑、粘度調節劑、維生素中的應用。
[0012] 所述的攸縣油茶提取物在制備、抗氧化劑中的應用。
[0013] 本發明還提供了一種預防或治療皮膚病的藥物組合物，由所述的攸縣油茶提取物 和藥物常用載體組成。
[0014] 本發明所述的攸縣油茶提取物在制備預防或治療皮膚病的藥物中的應用。
[0015] 本發明同時提供了攸縣油茶提取物的制備方法，包括下述步驟：取攸縣油茶花， 研成粉末，用攸縣油茶花的15-30倍量的85 % -95 %乙醇，冷浸18-28h，收集濾液，重復 2-5次，濾液減壓蒸餾，濃縮濾液，低溫干燥，得粗提物，將粗提物經大孔樹脂吸附脫色， 85 % -95 %乙醇洗脫后，濃縮蒸干，低溫冷凍干燥。
[0016] 與現有技術相比，本發明具備如下的優益性：本發明通過對攸縣油茶植物進行濃 縮提取得到目標提取物，對目標提取物進行了細胞毒性實驗和皮膚化妝品活性實驗，證明 了目標提取物的安全性，明確了目標提取物優良的化妝品活性和藥物活性。本發明提高了 攸縣油茶的利用功能和附加值，又拓展了天然護膚品植物原料的來源。本發明通過實驗提 取攸縣油茶樹皮的活性提取物，并進行了細胞毒性及皮膚化妝品活性實驗，明確了攸縣油 茶提取物不僅擁有良好的安全性還表現出良好的抗氧化活性，使之成為了很好的天然護膚 品植物原材料，突破了攸縣油茶傳統利用方式的局限，拓寬了攸縣油茶的利用途徑，對于提 高攸縣油茶的資源利用價值具有重大意義。
【附圖說明】：
[0017] 圖1 :攸縣油茶樹皮提取物對DPPH自由基的清除活性；
[0018] 圖2 :攸縣油茶提取物的制備工藝流程圖。
【具體實施方式】：
[0019] 以下結合附圖，用本發明的實施例對本發明進行更詳細敘述，但并不限制本發明 的范圍。
[0020] 實施例1 :
[0021] 攸縣油茶提取物的制備：
[0022] 稱取攸縣油茶（Camellia yuhsienensis Η. H. Hu)花20g，將其研成粉末狀，用 85%乙醇25倍量（602-603mL)冷浸24h，然后用布氏漏斗收集濾液，重復3次。將濾液用旋 轉蒸發儀減壓蒸餾，濃縮濾液，濃縮濾液低溫干燥，得粗提物。將粗提物經大孔樹脂（D101) 吸附脫色，95%乙醇洗脫后，將洗脫液濃縮蒸干，低溫冷凍干燥，得攸縣油茶茶花提取物 4. 2g，提取率為21 %。
[0023] 或者，稱取攸縣油茶（Camellia yuhsienensis Η. H. Hu)花樣品20g，將樣品研成粉 末狀，用95%乙醇20倍量冷浸20h，然后用布氏漏斗收集濾液，重復4次。將濾液用旋轉蒸 發儀減壓蒸餾，濃縮濾液，濃縮濾液低溫干燥，得粗提物。將粗提物經大孔樹脂（D101)吸附 脫色，90%乙醇洗脫后，將洗脫液濃縮蒸干，低溫冷凍干燥，得攸縣油茶樹皮提取物4. 5g，提 取率為22. 5%。
[0024] 實施例2 :
[0025] 攸縣油茶提取物的細胞毒性實驗：通過MTS比色法，確定樣品的CC5。(50 % cytotoxic concentration)，即對50%的細胞產生毒性時的藥物濃度，從而確定以下活性 實驗的安全樣品濃度。
[0026] 實驗方法：96孔細胞培養板上，將B16細胞與不同濃度的待測藥物溶液混合，設定 3個重復孔，同時設置不含藥物的空白對照，37°C，5% C02培養24h，采用MTS比色法檢測細 胞毒性，酶標儀測定0D值，測定波長490nm。計算得到CC5。值。
[0027] 細胞存活率（％ )=實驗孔OD490nni/空白孔OD490nni X 100 %
[0028] 實驗結果：攸縣油茶茶花乙醇提取物的細胞存活率為87. 781 %，屬于正常水平， 可明顯看出攸縣油茶提取物對細胞沒有毒害作用，作為皮膚化妝品的天然原材料的安全性 是有保證的。
[0029] 實施例3 :
[0030] DPPH自由基清除實驗：將待測藥物與DPPH (終濃度為100 μ M)混合反應，設定3個 重復孔，同時設置不含藥物的空白對照和Trolox陽性對照，30°C，lh，酶標儀測定0D值，檢 測波長為515nm。計算得到抗氧化率。
[0031] 抗氧化率（％ ) = (1-實驗孔 0D515nni/ 空白孔 0D515nJ X 100%
[0032] 實驗結果：在實驗中，攸縣油茶茶花提取物都表現出顯著的DPPH自由基清除能 力，并且根據濃度梯度，呈現良好的量效關系（見圖1)，可被用作具備抗皺或防曬潛力化妝 品活性的良好天然植被來源。
[0033] 本發明提供具有天然植物成分或天然植物成分混合物的局部組合物，它在藥學上 或化妝品上可接受的載體。這些組合物能抑制皮膚的酪氨酸酶活性，B16細胞黑色素生成 抑制活性，彈性蛋白活性，TNF-α分泌抑制活性，促膠原蛋白分泌活性，抑制皮膚的氧化。 這些組合物能用于細紋和/皺紋，皮膚紅疹，干性、敏感肌膚，皮膚瘙癢，膚色不均或皮膚黑 斑，皮膚發炎和其它與此相關的皮膚不適癥。這些組合物包含有從攸縣油茶中得到的提取 物或從該植物中得到的活性成分。這些組合物能進一步抑制皮膚的脂肪氧化酶，C0X(環氧 化酶）活性，MMP-1和MMP-3活性。這些組合物中攸縣油茶提取物的含量是組合物總重的 O.OOlwt% -20.0 wt%。這些組合物可以是護膚液、護膚霜或乳劑等。攸縣油茶的提取物可 以是水溶性提取物，該提取物可以用醇（例如甲醇、乙醇、丙醇，丁醇等）提取。
[0034] 本發明中含有攸縣油茶提取物的組合物可用于局部皮膚護理或護發產品。這些 組合物可以做成乳化劑（例如水包油、油包水、硅油包水，水包硅油，水包油包水，油包水包 油，油包水包硅油等），霜劑，護膚液，液體（例如水劑或水-醇溶液），無水基質（例如唇膏 或粉劑等），啫喱，油膏，奶液，軟膏，噴霧劑，固體劑，眼霜等。
[0035] 本發明中的局部護膚組合物包含有攸縣油茶的提取物或從攸縣油茶提取物中獲 得的組分或成分。局部施用這些組合物可減輕皮膚紅斑的外觀（如皮膚紅斑、過敏性皮膚、 皮膚紅腫、發炎等），還可減輕由于紅斑引起的疼痛。紅斑一般可由皮膚日光灼傷、皮膚的 電療、皮膚燒傷、接觸性過敏、全身過敏、皮膚毒性、鍛煉、蟲咬、細菌感染、病毒感染、真菌感 染、寄生原蟲感染、按摩和吹風引起的皮炎等。可治療干性皮膚、敏感皮膚或皮膚搔癢或減 小膚色不均的外觀。可減小細紋或皺紋的外觀。這些提取物可以是水溶性的或非水溶性的 提取物，它們可用醇（甲醇、乙醇、丙醇或丁醇等）、甘醇、油、水等來提取。
[0036] 本發明中的局部護膚組合物包含有攸縣油茶的提取物或從攸縣油茶提取物中獲 得的組分或成分。局部施用這些組合物可治療或預防皮膚病。皮膚病包括干性皮膚、皮膚搔 癢、皮膚發炎、紅斑、皮膚過敏、瘙癢癥、蜘蛛血管、雀斑、老年斑、老年性紫癜、角化癥、黑斑 病、疙瘩、細紋或皺紋、結節、皮膚太陽損傷、皮炎（脂溢性皮炎、錢幣狀皮炎、接觸性皮炎、 異位性皮炎、剝脫性皮炎、口周皮炎和淤滯性皮炎等）、牛