白頭翁皂苷b4作為免疫調節劑在治療急性炎癥藥物中的應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及白頭翁皂苷B4作為免疫調節劑在治療急性炎癥藥物中的應用。
【背景技術】
[0002]炎癥是具有血管系統的活體組織對各種損傷因子的刺激所產生的防御反應，典型的反應是出現紅、腫、熱、痛等臨床癥狀，是機體對內外環境中有害刺激所產生的一種復雜的生理和病理反應。炎癥反應是一種保護性防御反應，又是引起人類多種重大疾病的共同通路，參與人體感染、腫瘤、心腦血管病、老年癡呆和神經退行性疾病、變態反應疾病、精神病等許多重大疾病的發生和發展過程。臨床上，抗炎藥物是僅次于抗感染藥物的第二大類藥物。
[0003]由于現有的合成化學抗炎藥包括非留體抗炎藥和留體抗炎藥，其中留體抗炎藥具有明顯的不良反應。中草藥因其資源豐富、療效確切、副作用小等優點，從天然藥物中開發新型抗炎藥物逐漸成為研究熱點。在形形色色的免疫調節劑中，天然免疫調節劑引起人們極大的興趣。很多天然藥物活性成分在多種炎癥模型上顯示出不同程度的抗炎效果，目前發現的抗炎天然產物活性成分的類別主要包括:單萜與二萜類、三萜及其苷類、苯丙素類、蒽醌類、黃酮及其苷類、生物堿類、多糖類等化合物。
[0004]藥理研究表明皂苷具有顯著的抗炎活性，從植物中篩選活性皂苷化合物是當今藥物開發的一個方向。李曉輝等研究三七總皂苷(PnS)，發現60，120，240 mg/kg PnS 3個劑量組均能一定程度地降低肺泡灌洗液中白細胞數、蛋白含量、腫瘤壞死因子-α (TNF-α )及一氧化氮(NO)含量，提示PnS具有良好抗炎活性，并且其機制與抑制肺泡灌洗液中炎性細胞因子TNF- α及NO水平的升高有密切關系。對黃芪總皂苷基礎研究發現其對關節炎有抑制作用，且無明顯的毒副作用，可用于類風濕關節炎的治療。楊沁等研究其抗炎作用機制與其降低血管通透性和抑制白細胞游出、降低磷脂酶Α2 (PLA2)活性、減少白介素(IL) -8，前列腺素Ε2 (PGE2)，NO等炎癥介質的產生及抑制氧自由基生成有關。桔梗皂苷D為桔梗科植物桔梗的全草中提取出的五環三萜皂苷類活性成分。早期的大鼠足腫脹及佐劑誘導大鼠關節炎的模型研究表明，桔梗皂苷是其主要的抗炎活性成分。最近的動物實驗證實，桔梗皂苷D具有明顯的抗炎活性，其抗炎機制可能是調控炎癥早期介質，如對佛波酯(TPA)所致的炎癥模型，桔梗皂苷D能抑制PGE2產生；對脂多糖(LPS)所致炎癥模型，桔梗皂苷D能抑制NO產生和腫瘤壞死因子TNF- α的分泌。
[0005]白頭翁是毛茛科白頭翁屬植物白頭翁(/Wsa iiWa chinensis(Bunge) Regel)的干燥根，具有清熱解毒、涼血止痢的功效。白頭翁的主要藥理活性包括抗菌作用、抗阿米巴原蟲作用、抗病原體作用、抗癌作用、殺精子作用和鎮靜鎮痛作用。白頭翁的主要有效成分包括白頭翁素和白頭翁皂苷等，其中白頭翁皂苷可通過水提或醇提得到。現代藥理研究發現，白頭翁皂苷具有增強免疫功能、抗炎、抗腫瘤、抗病原微生物等作用，因此受到廣泛的研究和關注，但目前尚未有抗炎活性的白頭翁皂苷單體化合物的報道。
【發明內容】
[0006]本發明的目的是提供白頭翁皂苷B4作為免疫調節劑在治療急性炎癥藥物中的應用。
[0007]白頭翁皂苷B4作為免疫調節劑在治療急性炎癥藥物中的應用。
[0008]其中所述藥物是治療急性肝損傷的藥物。
[0009]其中所述藥物是治療肺損傷的藥物。
[0010]其中所述藥物是治療腎損傷的藥物。
[0011]白頭翁皂苷B4的抗炎作用可能是直接通過抑制淋巴細胞激活及抑制炎性因子分泌產生的，本發明的白頭翁皂苷B4作為免疫調節劑在治療急性炎癥藥物中的應用屬于首次公開，屬于純天然制劑，安全可靠無毒副作用，對治療急性炎癥藥物具有潛在的開發價值。
[0012]本發明通過具體實施例中的實驗證明了白頭翁皂苷B4作為免疫調節劑具有治療急性炎癥的作用。
【附圖說明】
[0013]圖1:具體實施例1中白頭翁皂苷B4對LPS誘導的小鼠肝損傷的影響。
[0014]附圖標記..##表示與正常對照組相比較，P < 0.01，表示與LPS組相比較，P<0.05.^表示與LPS組相比較P < 0.01。
[0015]圖2:具體實施例1中白頭翁皂苷B4對LPS誘導的急性肝損傷小鼠模型肝組織病理學的影響(HE X 400) ο
[0016]附圖標記:A.模型組；B.LPS組;C.B4+LPS高劑量組;D.B4+LPS中劑量組E.B4+LPS低劑量組；F.地塞米松+LPS組.圖3:具體實施例2中白頭翁皂苷B4對LPS誘導的小鼠外周血白細胞數的影響。
[0017]附圖標記:#表示與正常對照組相比較，P < 0.05-表示與LPS組相比較，P<0.05。
[0018]圖4:具體實施例2中白頭翁皂苷B4對LPS處理的小鼠肺濕重比的影響。
[0019]附圖標記..##表示與正常對照組相比較，P < 0.0l^表示與LPS組相比較，P<0.05.^表示與LPS組相比較P < 0.01。
[0020]圖5:具體實施例2中白頭翁皂苷B4對LPS誘導的急性肺損傷小鼠模型肺組織病理學的影響(HE X 400) ο
[0021]附圖標記:A.模型組；B.LPS組;C.B4+LPS高劑量組;D.B4+LPS中劑量組E.B4+LPS低劑量組；F.B4高劑量組.圖6:具體實施例3中白頭翁皂苷B4對LPS誘導的小鼠腎損傷的影響。
[0022]附圖標記..##表示與正常對照組相比較，P < 0.01，表示與LPS組相比較，P<0.05.^表示與LPS組相比較P < 0.01。
[0023]圖7:具體實施例3中白頭翁皂苷B4對LPS誘導的急性腎損傷小鼠模型腎組織病理學的影響(HE X 400) ο
[0024]附圖標記:A.模型組；B.LPS組;C.B4+LPS高劑量組;D.B4+LPS中劑量組E.B4+LPS低劑量組；F.地塞米松+LPS組.圖8:具體實施例4中白頭翁皂苷B4對刀豆素A (Con A)激活的淋巴細胞增殖的影響附圖標記:##表示與陰性對照組相比較，Z5 < Λ似;林表示與刀豆素A組相比較P <0.0l0
[0025]圖9:具體實施例4中白頭翁皂苷Β4對Con A激活的淋巴細胞分泌細胞因子的影響。
[0026]附圖標記..##表示與陰性對照組相比較，P < 0.0l^表示與刀豆素A組相比較P<0.01。
具體實施例
[0027]以下通過實施例對本發明作進一步詳細的說明，但本發明的保護范圍不受具體實施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。
[0028]實施例1:
血生化檢測白頭翁皂苷Β4對LPS刺激后小鼠血清中急性肝炎癥的指標的影響。
[0029]將體重為18-22 g的ICR小鼠隨機分為6組，每組10只，分別為空白對照組，LPS造模組(10 mg/kg)、LPS+陽性對照藥組(地塞米松，5 mg/kg)，LPS+白頭翁皂苷B4低劑量組(50 mg/kg)、LPS+白頭翁皂苷B4中劑量組(100 mg/kg)、LPS+白頭翁皂苷B4高劑量組(200 mg/kg)。在LPS造模前3小時給予B4治療，造模后3小時及6小時再分別給予陽性對照藥、白頭翁皂苷B4進行治療，治療3小時后眼球取血。將取出的小鼠全血室溫靜置2小時，3500 rpm/min,離心15min，取上清200 μ I利用血生化分析儀檢測與肝損傷相關的生化指標。分離每只小鼠肝臟，隨機取三只小鼠肝臟放入10%的甲醛緩沖溶液中使其脫水。然后將固定的組織被嵌入石蠟，并制成切片，用蘇木精、曙紅染色，之后進行形態檢查。
[0030]實驗結果表明，LPS處理組小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶(ALT)相比于空白對照組升高。肝內ALT活性遠遠超過其它臟器的活性，主要存在于肝細胞質的可溶性部分，故測定ALT反映肝臟損害具有特殊意義。急性肝炎能夠導致血清ALT活性增高。白頭翁皂苷B4治療后能下調因LPS誘導的血清中ALT的升高。門冬氨酸氨基轉移酶(AST)過去稱谷草轉氨酶(G0T)，臨床AST測定主要用于診斷急性心肌梗塞、肝細胞及骨骼肌疾病。急性心肌梗塞發作后6?8小時開始升高，24小時達高峰，約3?5