一種光熱治療腫瘤的主動靶向納米球及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及醫藥，特別是一種光熱治療腫瘤的主動靶向納米球及其制備方法與應用。
【背景技術】
[0002]腫瘤組織的病理生理特征與正常組織存在顯著不同，主要表現為腫瘤部位血管滲透性強，大分子藥物、載體等可通過滲透和滯留增強效應(即EPR效應)穿透血管內皮細胞進入腫瘤組織，可長時間、高濃度蓄積在腫瘤部位。納米粒(Nanoparticles，NPs)，包括納米球和納米囊，是將藥物分子負載或包裹到納米材料，利用納米載體的靶向性、緩釋性和腫瘤部位的EPR效應，通過靜脈注射的方式將納米粒輸送到腫瘤部位，實現高效靶向治療的目的。NPs已成為現代給藥系統研究的熱點，在生物醫學領域具有非常大的應用前景。主動靶向給藥系統是用修飾的藥物載體作為“導彈”，將藥物定向地運送到靶區濃集發揮藥效的藥物傳遞系統。主動靶向給藥系統因其靶向性較強、毒副作用小，越來越受到醫藥界的重視，目前研究較多的是腫瘤靶向給藥系統。
[0003]近年來提出的近紅外光介導的光熱治療，能夠對腫瘤組織進行定點清除并且對正常組織具有較低的毒副作用，為腫瘤的治療提供了新的方法。最新報道的半導體硫化銅(Cu2 XS)納米粒子，制備工藝簡單、成本低廉、并且具有突出的光熱穩定性和良好的生物相容性，成為了當今納米醫學領域研究的熱點。
[0004]目前，通過納米載體負載Cu2XS納米粒子和化療藥物，并通過腫瘤靶向分子修飾形成主動靶向藥物轉運系統，特別是在腫瘤熱化治療藥物中的應用尚未見公開報道。
【發明內容】
[0005]針對上述情況，為克服現有技術之缺陷，本發明之目的就是提供一種光熱治療腫瘤的主動靶向納米球及其制備方法與應用，可有效解決現有腫瘤治療藥物副作用大、治療效果不佳的問題。
[0006]本發明解決的技術方案是，該主動革El向納米球是由腫瘤革El向分子、硫化銅納米粒子和化療藥物構成，所述的腫瘤靶向分子為葉酸；所述的硫化銅為聚維酮或檸檬酸修飾后的一種；所述的化療藥物為多西他賽(DTX)，其制備方法是:
1)合成硫化銅納米粒子:稱取0.4-0.6mmoL CuCl2溶解于8~12mL濃度為0.2g/mL的聚維酮(PVP)溶液中，磁力攪拌下形成淡藍色溶液；另將1.2-1.8mmoL Na2S溶解于8~12mL超純水，成Na2S溶液，將淡藍色溶液和Na2S溶液合并，180°C水浴反應12h，1200r/min離心lOmin，得黑綠色沉淀物，黑綠色沉淀物用40~60mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化銅納米粒子(PVP-Cu2 XS)；
2)制備被動靶向納米球:稱取6~9mg硫化銅納米粒子(PVP-Cu2XS)溶于含有殼聚糖的醋酸溶液8~12mL中，醋酸溶液質量濃度為1%，醋酸溶液中殼聚糖的含量為2mg/mL，室溫攪拌1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另稱取4~6mg多西他賽(DTX)溶于4~6mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，攪拌30min，注入3.2-4.8mL三聚磷酸鈉(TPP)，攪拌2.5h，400w探超40次，1200r/min離心30min，除去上清液，即成被動革巴向納米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制備主動革E向納米球:稱取1.6-2.4mg葉酸(FA)加入4~6mL步驟(2)制備的DTX-Cu2xS-NPs,再加入8~12mg的1-乙基_(3_ 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC -HC1)，室溫避光攪拌lh，得黃色納米混懸液，1200r/min離心30min，除去上清液，即得主動靶向納米球(FA-DTX-Cu2 xS-NPs )。
[0007]本發明制備的主動靶向納米球(FA-DTX-Cu2 xS_NPs)有效用于光熱治療腫瘤，實現主動靶向納米球(FA-DTX-Cu2 xS-NPs)在制備光熱治療腫瘤藥物中的應用。
[0008]本發明是以腫瘤靶向分子作為靶彈頭，結合硫化銅光熱轉換特性，實現腫瘤熱化療聯合靶向治療，有效克服了腫瘤治療藥物副作用大、治療效果不佳的問題，方法穩定可靠，所得產品性能穩定，使用方便，效果好，易操作，原料來源豐富，成本低，副作用小，能有效抑制腫瘤細胞的增殖，是腫瘤靶向治療中藥物上的創新，經濟和社會效益巨大。
【附圖說明】
[0009]圖1為本發明水溶性硫化銅光照時間-溫度變化圖。
【具體實施方式】
[0010]以下結合實施例對本發明的【具體實施方式】作詳細說明。
[0011]本發明在具體實施中，可由以下實施例給出。
[0012]實施例1
本發明在具體實施中，由以下步驟實現:
1)合成硫化銅納米粒子:稱取0.4mmoL CuCl2溶解于8mL濃度為0.2g/mL的聚維酮(PVP)溶液中，磁力攪拌下形成淡藍色溶液；另將1.2mmoL Na2S溶解于8mL超純水，成Na2S溶液，將淡藍色溶液和Na2S溶液合并，置于反應釜中，180°C水浴反應12h，1200r/min離心1min,得黑綠色沉淀物，黑綠色沉淀物用40mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化銅納米粒子(PVP-Cu2XS)；
2)制備被動革E向納米球:稱取6mg硫化銅納米粒子(PVP-Cu2XS)溶于含有殼聚糖的醋酸溶液SmL中，醋酸溶液質量濃度為1%，醋酸溶液中殼聚糖的含量為2mg/mL，室溫攪拌
1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另稱取4mg多西他賽(DTX)溶于4mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，攪拌30min，注入3.2mL三聚磷酸鈉(TPP)，攪拌2.5h，400w探超40次，1200r/min離心30min，除去上清液，即成被動靶向納米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制備主動靶向納米球:稱取1.6mg葉酸(FA)加入4mL步驟(2)制備的DTX-Cu2 xS_NPs中，再加入Smg的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)，室溫避光攪拌lh，得黃色納米混懸液，1200r/min離心30min，除去上清液，即得主動革El向納米球(FA-DTX-Cu2xS-NPs)0
[0013]實施例2
本發明在具體實施中，也可由以下步驟實現:
I)合成硫化銅納米粒子:稱取0.5mmoL CuCl2溶解于1mL濃度為0.2g/mL的聚維酮(PVP)溶液中，磁力攪拌下形成淡藍色溶液；另將1.5mmoL Na2S溶解于1mL超純水，成Na2S溶液，將淡藍色溶液和Na2S溶液合并，置于反應釜中，180°C水浴反應12h，1200r/min離心1min,得黑綠色沉淀物，黑綠色沉淀物用50mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化銅納米粒子(PVP-Cu2XS)；
2)制備被動靶向納米球:稱取7.5mg硫化銅納米粒子(PVP-Cu2 XS)溶于含有殼聚糖的醋酸溶液1mL中，醋酸溶液質量濃度為1%，醋酸溶液中殼聚糖的含量為2mg/mL，室溫攪拌
1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另稱取5mg多西他賽(DTX)溶于5mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，攪拌30min，注入4mL三聚磷酸鈉(TPP)，攪拌2.5h，400w探超40次，1200r/min離心30min，除去上清液，即成被動靶向納米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制備主動靶向納米球:稱取2mg葉酸(FA)加入5mL步驟(2)制備的DTX-Cu2xS_NPs中，再加入1mg的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)，室溫避光攪拌lh，得黃色納米混懸液，1200r/min離心30min，除去上清液，即得主動革El向納米球(FA-DTX-Cu2xS-NPs)0
[0014]實施例3
本發明在具體實施中，也可由以下步驟實現:
1)合成硫化銅納米粒子:稱取0.6mmoL CuCl2溶解于12mL濃度為0.2g/mL的聚維酮(PVP)溶液中，磁力攪拌下形成淡藍色溶液；另將1.8mmoL Na2S溶解于12mL超純水，成Na2S溶液，將淡藍色溶液和Na2S溶液合并，置于反應釜中，180°C水浴反應12h，1200r/min離心1min,得黑綠色沉淀物，黑綠色沉淀物用60mL乙醇洗3次，60°C真空干燥，成硫化銅納米粒子(PVP-Cu2XS)；
2)制備被動革E向納米球:稱取9mg硫化銅納米粒子(PVP-Cu2XS)溶于含有殼聚糖的醋酸溶液12mL中，醋酸溶液質量濃度為1%，醋酸溶液中殼聚糖的含量為2mg/mL，室溫攪拌
1.5h，成PVP-Cu2 XS溶液；另稱取6mg多西他賽(DTX)溶于6mL甲醇，加入到PVP-Cu2 XS溶液中，攪拌30min，注入4.8mL三聚磷酸鈉(TPP)，攪拌2.5h，400w探超40次，1200r/min離心30min，除去上清液，即成被動靶向納米球(DTX-Cu2 xS_NPs)；
3)制備主動靶向納米球:稱取2.4mg葉酸(FA)加入6mL步驟(2)制備的DTX-Cu2 xS_NPs中，再加入12mg的1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDC.HCl)，室溫避光攪拌lh，得黃色納米混懸液，1200r/min離心30min，除去上清液，即得主動革El向納米球(FA-DTX-Cu2xS-NPs)0
[0015]上述制備的主動靶向納米球(FA-DTX-Cu2 xS_NPs)可有效用于腫瘤熱化療聯合靶向治療，實現主動靶向納米球(FA-DTX-Cu2 xS-NPs)在治療腫瘤熱化療聯合靶向藥物中的應用。
[0016]以上所述僅是本發明的優選實施方式，應當指出，對于本技術領域的普通技術人員，在不脫離本發明方法的前提下，還可以做出若干改進和補充，這些改進和補充也應視為本發明的保護范圍。
[0017]本發明的主動靶向納米球(FA-DTX-Cu2 xS_NPs)作為藥物載體可以負載硫化銅和化療藥物，特別是難溶性藥物，有效用于制備抗腫瘤藥物，采用靜脈注射給藥、結合980nm近紅外激光照射，實現腫瘤熱化療聯合治療。硫化銅具有光熱轉換特性