Desogestrel在制備抗結腸癌/ER陰性的Ah受體陽性的乳腺癌產品中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種Desogestrel在制備抗結腸癌/ER陰性 的Ah受體陽性的乳腺癌產品中的應用。
【背景技術】
[0002] 腫瘤是威脅人類健康的最常見也是最嚴重的一種疾病，研發高效抗腫瘤藥物對延 長患者的生存周期至關重要。近年來，隨著腫瘤基因組學學和分子藥理學的飛速發展，新型 抗腫瘤藥物的研發取得了不錯的成果，但由于新藥研發投入大，周期長等瓶頸無法克服，以 及腫瘤個體遺傳變異大等特征，導致許多傳統抗腫瘤藥物效果不加，新藥價格昂貴，副作用 未明。
[0003]BarabasiAL等研究者在2011年發表于《NatureReviewsGenetics》的論文中指 出，基于GWAS研究結果和互作組學（interactome)策略開展的分子網絡分析有望揭示復雜 疾病新的藥物靶點和分子標志物，并最終形成對疾病發病機制和治療方案全新的認識。更 值得注意的是，藥物重定位（drugrepositioning)研究發現，GWAS研究鎖定的易感基因及 與其有蛋白-蛋白相互作用（protein-proteininteraction,PPI)的基因更容易成為藥物 間接的靶點，這一發現有助于解釋現有藥物的作用機制并指導新藥的研發。2014年，Okada Y等研究者在《Nature》上發表的論文中顯示GWAS研究結果整合分析得到的類風濕性關節 炎的101個易感基因中有98個目前正用于治療類風濕性關節炎藥物的直接或間接靶標，而 且還通過藥物重定位研究，他們還發現了數十個已獲批準用于其他適應癥的藥物也可用于 治療類風濕性關節炎。
【發明內容】
[0004] 本研究正是通過整合癌癥組學Cosmicversion72數據庫的癌癥基因譜Cancer GeneCensus以及蛋白質相互作用STRINGversion10 數據庫和DrugBankversion4. 2 中 FDA批準的藥物數據庫，獲得的候選重定位藥物，對腫瘤細胞系進行篩查實驗，篩選出新的 抗腫瘤藥物。做腫瘤細胞系篩選的候選腫瘤抑制藥物見如下：
[0005]Nicardipine,Promethazine,Estrone,Desogestrel,Sunlidac,Estradiol,Etono gestrel,Levonorgestrel,Mesalazine,Indomethacin,Sulfasalazine,Balsalazide,Irbe sartan,Ibuprofen,IsoprenalinejPentosanPolysulfate〇
[0006] 本發明的一個目的是提供Desogestrel的新用途。
[0007] 本發明提供的Desogestrel在制備治療結腸癌和/或乳腺癌產品中的應用。
[0008] 本發明的第二個目的是提供Desogestrel的新用途。
[0009] 本發明提供了Desogestrel在制備抑制結腸癌細胞和/或乳腺癌細胞增殖產品中 的應用。
[0010] 本發明的第三個目的是提供Desogestrel的新用途。
[0011] 本發明提供了Desogestrel在制備降低結腸癌細胞和/或乳腺癌細胞IC50值產 品中的應用。
[0012] 上述應用中，所述結腸癌細胞為LOVO或RKO;所述乳腺癌為ER陰性的Ah受體陽 性乳腺癌，所述乳腺癌細胞具體為MDA-MB-468。
[0013] 上述應用中，所述產品為藥物或試劑盒。
[0014] 本發明的第四個目的是提供一種產品。
[0015] 本發明提供的產品，其活性成分為Desogestrel;所述產品具有如下至少一種功 能：
[0016] 1)治療結腸癌和/或乳腺癌；
[0017] 2)抑制結腸癌細胞和/或乳腺癌細胞增殖；
[0018] 3)降低結腸癌細胞和/或乳腺癌細胞IC50值。
[0019] 上述產品中，所述結腸癌細胞為LOVO或RKO;所述乳腺癌為ER陰性的Ah受體陽 性乳腺癌，所述乳腺癌細胞具體為MDA-MB-46。
[0020] 上述產品中，所述產品為藥物或試劑盒。
[0021] 本發明的實驗證明，本發明對FDA，CFDA已獲批準的藥物Desogestrel進行腫瘤藥 物重定位，根據腫瘤不同的細胞系（組織類型）以及突變位點對適應癥不是抗腫瘤的藥物 進行篩選，發現Desogestrel抗結腸癌/ER陰性的Ah受體陽性的乳腺癌這種新用途，實現 舊藥新用。
【附圖說明】
[0022] 圖1為96孔培養板藥篩藥物板型分布。
[0023]圖2為Desogestrel對結腸癌敏感；EC50=136.2267 ;IC50=32.0768 ;R2= 0?9921。
[0024] 圖3為Desogestrel對結腸癌敏感；EC50=26. 3045 ;IC50=26. 2417 ;R2= 0. 9988〇
[0025] 圖4為Desogestrel對ER陰性的Ah受體陽性的乳腺癌敏感；EC50=11. 3284 ; IC50 = 12. 4694 ;R2= 0. 9872。
【具體實施方式】
[0026] 下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明，均為常規方法。
[0027] 下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業途徑得到。
[0028] 下述實施例中待測藥物為Desogestrel，其化學結構式為：
DB00304。
[0030]下面實施例中的結腸癌細胞LOVO和RKO、ER陰性的Ah受體陽性乳腺癌細胞 MDA-MB-468、乳腺導管癌細胞BT-474的產品出處：
[0031]LOVOATCCCCL-229
[0032]RKOATCCCRL-2577
[0033]MDA-MB-468ATCCHTB-132
[0034]BT-474ATCCHTB-20
[0035] 下面實施例中的主要的儀器及耗材
[0036]DMSO(fromSigma,Cat.No.D4540)
[0037] 96-well白色底透細胞培養板（fromCorning,Cat.No. 3610)
[0038]CellTiterGlo試劑盒（fromPromega,Cat.No.G7573)
[0039]Doxorubicin陽性藥（fromMCE,Cat.No.HY-15142)
[0040]FetalBovineSerum(fromGibco,Cat#10099141)
[0041] 100mm培養皿（fromCorning,Cat#430167)
[0042]RPMI-1640medium(fromGibco,Cat#A1049101)
[0043]DMEMmedium(fromGibco,Cat#l1995081)
[0044] DMEM/F12medium(fromGibco,Cat#l1330057)
[0045] EMEMmedium(fromGibco,Cat#10370021)
[0046]Mutidrop384 細胞分液器（Thermo,Cat#5840150)
[0047]EnSpire多功能讀板機（PerkinElmer,Cat#2300_001M)
[0048] 乳腺導管癌細胞BT-474,完全培養基為RPMI-1640,為life產品，A1049101，接板 密度（cells/well)為 4000。
[0049]實施例1、CELLTITER-GL0檢測Desogestrel抗結腸癌
[0050] -、待測孔板的制備
[0051]1、細胞鋪板
[0052]a)配制個細胞所需完全培養基。
[0053]b)實驗開始前，確認標記在IOOmrn培養皿上的藥篩細胞名字，培養基以及傳代時 間，代次等信息，確保實驗無誤。
[0054]c)貼壁細胞操作參考步驟d)到i)，懸浮細胞操作參考步驟j)到1)。
[0055]d)無菌操作時利用真空栗吸取細胞培養基。
[0056]e)用2ml的無菌PBS溶液潤洗細胞表層，再用真空栗吸出PBS廢液。
[0057]f)向培養皿輕輕加入Iml0.25% (w/v)Trypsin-0. 038% (w/v)EDTA溶液消化細 胞，輕輕混勻幾下，溶液覆蓋住細胞表層，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，在細胞將要 脫落時終止胰酶消化作用。
[0058]g)向培養皿中加入5ml37°C預熱好的完全培養基，用移液管輕輕吹打細胞，使其 從培養皿底部脫落下來。
[0059]h)將此細胞懸液轉移到15ml或50ml無菌離心管中，1000 rpm離心5min。
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