穿心蓮內酯衍生物在制備治療炎癥性腸病藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬于藥物技術領域，具體涉及一種穿心蓮內酯衍生物在制備治療炎癥性腸 病例如潰瘍性結腸炎的藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 穿心蓮內酯（Andrographolide,Andro)是中藥穿心蓮中的主要有效成分，其結構 如下所示。穿心蓮在亞洲國家，包括中國、印度、日本、韓國等廣泛用于治療炎癥性疾病，包 括風濕性關節炎、咽喉炎、腹瀉、細菌和病毒感染[Chin.Med.J. (Engl) 1991，104:770 - 775 ; J.Nat.Prod. 1993, 56:995 - 999 ；Clin.Exp.Pharmacol.Physiol. 1996,23:675 - 678 ； Clin.Exp.Pharmacol.Physiol. 2000, 27:358 - 363 ;Br.J.Pharmacol. 2002, 35:399 - 406]。 穿心蓮內酯能夠減輕炎癥、發熱、細菌和病毒感染性疾病的臨床癥狀[J.Bacteri ol.2001， 183:7126-7134]。
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[0004] 穿心蓮內酯
[0005]Chiou等[Br.J.Pharmcol. 2009, 129:1553-1560]研究認為穿心蓮內酯在 RAW264. 7細胞中通過降低誘導型NO合酶（iNOS)蛋白表達抑制NO合成，阻止從頭合成和通 過加速降解、降低iNOS蛋白穩定性。Shen等[Br.J.Pharmacol. 2002, 135:399-406]闡明了 穿心蓮內酯在嗜中性粒細胞抑制炎癥反應的機理是通過調節PKC依賴的途徑阻止或部分 阻止活性氧（ROS)的產生，并下調Mac-I高表達。Xia[J.Immunol. 2004, 173:4207-4217]的 研究發現穿心蓮內酯抑制NF-KB活性。Hidalgo等[Br.J.Pharmacol. 2005, 144:680-686] 關于穿心蓮內酯抗炎機理研究發現穿心蓮內酯通過抑制NF-KB與DNA的結合而發揮抗炎 作用，進而降低前炎癥蛋白如C0X-2等的表達。
[0006] 前期本發明人通過化學合成制備穿心蓮內酯和硫辛酸的偶合物，即穿心蓮內酯衍 生物AL-I(如下所示）。
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[0008] 本發明人在深入研究AL-I的作用機理中證實，在體外應用AL-I和Andro分別與 GSH反應，顯示在反應前60分鐘AL-I與GSH巰基結合速率是Andro的7倍，證明AL-I比 Andro更快和更強地與GSH的半胱氨酸巰基結合[Molecules. 2012, 17 (1):728-739]。然 后在體外細胞實驗中發現，通過抑制NF-KB的活性，AL-I具有保護MPP+誘導的SH-SY5Y 和小鼠原代神經元細胞以及IL-I和IFN-y誘導的胰島RIN-m細胞的作用[Pharmacol BiochemBehav. 2014, 122:191-202JTranslMed. 2009, 7:62];動物實驗研究證實AL-I 通過抑制NF-KB的活性改善MPTP誘導的帕金森小鼠的各行為指標[PharmacolBiochem Behav. 2014, 122:191-2022]，并且也顯著地改善2型糖尿病大鼠的胰島素抵抗并抑制高 糖誘導的RIN-m細胞p65和IKBa的磷酸化水平[BrJPharmacol. 2015,doi: 10. 1111/ bph. 13118];因此AL-I適用于作為抗癌藥物或治療具有耐藥性的腫瘤；作為抗微生物藥 物，包括細菌和病毒感染藥物；作為抗糖尿病藥物。本發明人的研究還發現AL-I在制備預 防和治療神經退行性疾病尤其是帕金森病的藥物中的應用。
【發明內容】
[0009] 本發明在深入探討穿心蓮內酯衍生物AL-I的作用基礎上，發現AL-I可以通過減 少結腸組織MPO的含量，減少炎癥細胞因子TNF-a、IL-6和IL-I 的表達，抑制C0X-2和 核轉錄因子NF-KB的表達，激活PPAR-y的表達，從而阻止炎癥相關基因的轉錄和表達，改 善炎癥狀態。因此本發明可使用AL-I治療潰瘍性結腸炎，研究證明它能顯著改善潰瘍性 結腸炎小鼠結腸黏膜的損傷、減輕結腸炎癥狀的作用。這是前期研究未發現的AL-I在治療 疾病方面的新用途。
[0010] 潰瘍性結腸炎（ulcerativecolitis,UC)是一種病因尚不明確的慢性非特異性腸 道炎癥性疾病，病變通常先累及直腸，逐漸向全結腸蔓延，表現為結腸黏膜和黏膜下層連續 性、彌漫性炎癥。其發病機制迄今仍未完全明了，目前一般認為是多因素相互作用的結果， 主要包括環境、遺傳、感染和免疫因素等。2014年最新研究證實，根據世界各個地區不同， 每年UC的發病率約為0. 5-31. 5/10萬人。該病病因復雜，病程漫長，治愈難度大，常反復發 作，并且有癌變的可能。因此，深入研究UC的發病機制和治療措施，對于防治UC具有重要 臨床意義和社會價值。
[0011] 目前，UC的發病機制尚不十分明確，認為與氧化應激、炎癥、細胞凋亡有關。因此， 具有抗氧化、抗炎及抗凋亡活性化合物有可能具炎性結腸保護作用，能延緩潰瘍性結腸炎 的病程。臨床上UC的常規治療藥物主要有三大類：氨基水楊酸類、腎上腺皮質激素類和免 疫抑制劑；第一類藥物服藥周期較長，患者依從性差，病情易反復；而糖皮質激素及免疫抑 制劑不良反應較多，易產生依賴或不耐受。因此本發明無疑提供了一種全新的用于治療潰 瘍性結腸炎的方法和新的藥物。
[0012] 本發明的目的在于提供一種穿心蓮內酯衍生物的新用途，即穿心蓮內酯衍生物 AL-I在預防和治療炎癥性腸病中的應用，特別是預防和治療潰瘍性結腸炎中的應用。
[0013] 本發明的目的還在于提供所述穿心蓮內酯衍生物AL-I在用于制備用于預防和治 療炎癥性腸病的藥物中的應用。
[0014] 本發明提供了AL-I治療潰瘍性結腸炎的機理在于清除自由基、抑制NF-kB信號 通路的激活和C0X-2的表達，激活PPAR-Y的表達，進而阻止炎癥相關基因的轉錄和表達， 改善炎癥狀態。
[0015] 所述穿心蓮內酯衍生物AL-I可與可用藥物載體制成各種劑型；所述劑型包括片 劑、顆粒劑、針劑、粉劑、膠囊劑、懸浮劑。
[0016] 所述穿心蓮內酯衍生物制備的預防和治療潰瘍性結腸炎的藥物可按各種制劑的 常規工藝制備。在藥物制備中使用的可藥用的賦形劑和添加劑包括無毒的可相容的填料、 粘合劑、崩解劑、緩沖劑、防腐劑、抗氧化劑、潤滑劑、矯味劑、增稠劑、著色劑、乳化劑或穩定 劑。
[0017] AL-I可以制成多種劑型，包括固體劑型，半固體劑型，液體制劑和氣霧劑 (Remington?sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany(1995)，Philadelph ia，PA, 19thed)。這幾類劑型中的具體劑型包括片劑、丸劑、糖錠劑、顆粒劑、凝膠劑、膏劑、 溶液劑、栓劑、注射劑、吸入劑以及噴霧劑。這些劑型既能用于局部或全身給藥又能用于速 釋或緩續給藥，此類藥物的給藥方式有很多種，除了上述方式，還有口腔給藥、面頰給藥、直 腸給藥、腹膜給藥、腹膜內給藥、皮表給藥、皮下給藥和氣管內給藥等。
[0018] 當AL-I注射給藥時，可以用水溶性或脂溶性的溶劑將此類化合物配制成溶液劑， 懸濁劑和乳劑。脂溶性溶劑具體包括植物油及類似油類，合成脂肪酸甘油酯，高級脂肪酸酯 以及乙二醇酯（proyleneglycol)。這類化合物更易溶于Hank's溶液，Ringer's溶液或 者生理鹽水。
[0019] 當AL-I口服給藥時，可以采用常用技術將其與藥學可接受的賦形劑制成復合物。 這些賦形劑可以將這些化合物制成多種可以被病人劑型，如片劑、丸劑、混懸劑、凝膠劑等。 口服制劑的配制有多種方法，如先把化合物和固體賦形劑混勻，充分研磨混合物，添加適當 的輔料，加工處理成顆粒。可以用于制成口服劑型的輔料包括：糖類如乳糖、蔗糖、甘露醇或 山梨醇；纖維素類如玉米淀粉、小麥淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、西黃薯膠、甲基纖維素、羥甲基 纖維素（hydroxyproylmethyl-cellulose)、羧甲基纖維素納、聚乙稀吡略酮等。
[0020] 本發明涉及AL-I也可以制成噴霧劑，此種劑型是通過一個加壓器和一個噴霧器 或者一個干粉吸入裝置而實現的。可以用作噴射器里合適的噴射劑如二氯二氟甲烷、氟三 氯甲燒、二氯四氟乙燒、二氧化碳和二甲醚等。氣霧劑給藥的劑量可