甘草利酮或其衍生物在抗艾滋病中的應用
【技術領域】
[0001] 本發明屬醫藥領域，涉及治療艾滋病的藥物，具體涉及一種具有抗HIV潛伏作用 的藥物及其用途，尤其涉及甘草利酮或其衍生物的抗HIV潛伏作用及其在制備治療艾滋病 藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS)是由HIV感染引起的一種嚴重危害人們生命健康 的傳染性疾病。據WHO統計全球艾滋病患者已超過4000萬，每年新增患者500萬，而每年死 亡約為300萬。目前,艾滋病臨床治療方法主要采用高效抗逆傳錄病毒療法（Highly active antiretroviral therapy, HAART)，該療法不僅有效控制HIV復制，并且能重建AIDS患者的 免疫功能，為AIDS的治療打開了希望之門。
[0003] 人們曾寄希望于憑借HAART完全清除體內的HIV，從而達到徹底治愈AIDS的目 的。但隨后的實踐證明，雖然HAART可以最大限度地抑制患者體內病毒復制，使血漿病毒 載量（virus load)降低至現有常規檢測方法測不出的水平，但感染者體內仍有病毒持續存 在，一旦停止藥物治療，病毒載量又會反彈到治療前水平（Ho, D. D. Toward HIV eradication or remission:the tasks ahead. Science，1998. 280:1866 - 1867.)。研究顯不，HIV 難以 在體內被完全清除的一個重要原因是HIV-I能夠潛伏在靜息的記憶CD4+T細胞中，該潛 伏感染細胞是由一小部分HIV感染的活化CD4+T細胞轉化而產生的，其整合的前病毒缺 乏轉錄活性，因而，不會被免疫系統和抗逆轉錄酶病毒的藥物攻擊。盡管感染個體攜帶 潛伏感染細胞數量較少，但衰減率是如此之慢，以至于欲在個體生存期內僅靠 HAART治 療將其徹底清除是不可能的。因此，HIV潛伏感染的靜息CD4+T細胞是構成機體內病毒 儲藏庫（reservoir)的主要部分，同時也是目前臨床治療不能徹底清除HIV的巨大障礙 [Finzi, D. et al. Latent infection of CD4+T cells provides a mechanism for lifelong persistence of HIV-1, even in patients on effective combination therapy. Nature Med. 1999, 5, 512 - 517]。一般認為HIV-I潛伏感染細胞形成的分子機制與整合位點處的染 色質狀態，抑制性核小體nuc-Ι的存在，以乙酰化為代表的表觀遺傳修飾，宿主轉錄因子 如NF-κ B以及病毒轉錄活化因子Tat等因素有關[Coiras, Μ.，M. R. et al. Understanding HIV-Ilatency provides clues for the eradication of long-term reservoirs. Nat. Rev. Microbiol…2009.，7:798-812.]。據此機制，有研究提出了清除潛伏病毒儲存庫的 治療策略，即試圖通過藥物誘導HIV潛伏感染細胞的前病毒表達，使其潛伏病毒再次激 活，同時結合高效抗逆傳錄病毒療法及在人免疫系統作用下，來殺死激活的潛伏感染的 細胞，以此加速病毒庫的清除（Richman et al. The Challenge of Finding a Cure for HIV Infection, Science，2009,1304, 323)。盡管，該策略已在臨床上已有幾個治療方案，但其結 果仍未盡人意，不是激活劑無效，就是雖有效但其毒副作用大，因而，研發安全有效于一體 的能消除病毒儲藏庫的免疫激活劑及相應的治療方案已是當務之急。中藥作為我國所特有 的醫藥資源，中藥來源的化合物以其種類繁多、臨床應用廣泛、療效確切、作用溫和、副作用 少等優點而越來越受到現代醫藥學的關注。
【發明內容】
[0004] 本發明的目的是提供一種具有抗HIV潛伏作用的藥物，尤其涉及甘草利酮或其衍 生物抗HIV潛伏作用及其在制備治療艾滋病藥物中的應用。
[0005] 本發明第一方面，提供了一種甘草利酮或其衍生物的用途，（a)用于制備干預HIV 病毒潛伏的組合物；(b)用于制備治療艾滋病的藥物；或（c)用于制備與抗逆傳錄病毒藥物 聯合使用從而治療艾滋病的藥物，
[0006] 其中，所述的甘草利酮或其衍生物具有式I所示的通式：
[0007]
[0008] Rl 選自 H、OH、OCH3, R2 選自 H、CH2CH = C (CH3) 2, R3 選自 OCH3 或 0H，R4 選自 Η、0H、 CH2CH = C (CH3) 2或其與R3的OH成環，R5選自H、OH或OCH3, R6選自H或OH。
[0009] 在另一優選例中，所述甘草利酮或其衍生物包括甘草利酮、甘草異黃酮乙、甘草瑞 酮、甘草異黃酮甲、或毛蕊異黃酮。
[0010] 在另一優選例中，所述的甘草利酮的化學式如式Ia所示：
[0011]
[0012] 在另一優選例中，所述的甘草異黃酮乙的化學式如式Ib所示：
[0013]
[0014] 在另一優選例中，所述的甘草瑞酮的化學式如式Ic所示：
[0015]
[0016] 在另一優選例中，所述的甘草異黃酮甲的化學式如式Id所示：
[0017]
[0018] 在另一優選例中，所述的毛蕊異黃酮的化學式如式Ie所示：
[0019]
[0020] 在另一優選例中，所述的干預HIV病毒潛伏包括：誘導HIV病毒潛伏感染細胞中 HIV前病毒表達、和/或激活潛伏的HIV病毒；和/或
[0021] 所述的治療艾滋病包括抗HIV潛伏治療。
[0022] 在另一優選例中，所述的甘草利酮或其衍生物通過溶劑提取法、萃取法、和色譜法 制備獲得。
[0023] 在另一優選例中，所述的甘草利酮或其衍生物提取自甘草屬植物。
[0024] 在另一優選例中，所述甘草屬植物包括甘草（Glycyrrhiza uralensis Fisch)、脹 果甘草（G. inf lata Batal)或洋甘草（又叫光果甘草，G. glabra Linn)。
[0025] 在另一優選例中，組合物包括藥物組合物、食品組合物或保健品組合物。
[0026] 在另一優選例中，所述的藥物還包括選自下組的額外組分：抗逆傳錄病毒的藥物 或增強免疫力的藥物。
[0027] 在另一優選例中，所述的組合物或藥物包括：口服制劑和非口服制劑。
[0028] 在另一優選例中，所述的制劑包括：粉劑、顆粒劑、膠囊劑、注射劑、酊劑、口服液、 片劑或含片。
[0029] 本發明第二方面，提供了一種用于治療艾滋病的活性成分，所述的活性成分具備 以下特征：
[0030] (a)該活性成分是提取自甘草屬植物的枝、葉、根、和/或莖的水溶性的和/或脂溶 性的提取物；或提取自甘草屬植物的枝、葉、根、和/或莖的醇提取物；
[0031] (b)該活性成分含有一種或多種選自下組的組分：甘草利酮、甘草異黃酮乙、甘草 瑞酮；和
[0032] (c)該活性成分具有誘導HIV病毒潛伏感染細胞中HIV前病毒表達、和/或激活潛 伏的HIV病毒的功能。
[0033] 在另一優選例中，該活性成分是通過溶劑提取法、萃取法、和色譜法而獲得的。
[0034] 在另一優選例中，所述的活性成分通過以下步驟制備：
[0035] (1)提取：使用提取溶劑對藥材提取，得到提取液；
[0036] (2)萃取：將步驟（2)得到的提取液濃縮，加水溶解，再分別用極性由小到大的萃 取溶劑進行萃取，得到萃取液，萃取液經濃縮后上正相柱用洗脫溶劑進行洗脫；收集洗脫 液，干燥，得到甘草提取物；
[0037] 在另一優選例中，所述的提取溶劑選自水、醇中的一種或兩種。
[0038] 在另一優選例中，所述的提取溶劑為含乙醇質量百分數50~95%的乙醇水溶液。
[0039] 在另一優選例中，步驟（1)中所述的藥材包括甘草植物的根莖或其他含該化合物 的植物部位或人工合成。
[0040] 在另一優選例中，步驟（1)所述提取溶劑與所述藥材的質量比為6~10。
[0041] 在另一優選例中，所述的提取為加熱提取，溫度為90°C~KKTC。
[0042] 在另一優選例中，所述提取為提取2~3次，每次2-3小時。
[0043] 在另一優選例中，所述的藥材為甘草植物的全草、根莖、葉子或花中的至少一種。
[0044] 在另一優選例中，所述的萃取溶劑包括石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇，萃 取時按極性大小依次使用單一溶劑等體積進行萃取。
[0045] 在另一優選例中，所述的萃取溶劑至少包括二氯甲烷。
[0046] 在另一優選例中，步驟2)中，將經過二氯甲烷萃取的萃取液經濃縮后得到的濃縮 物上正相柱。
[0047] 在另一優選例中，所述的洗脫溶劑至少包括由體積比為100 :0~10 :1的石油醚 和乙酸乙酯組成的洗脫溶劑。
[0048] 在另一優選例中，所述的洗脫溶劑包括由體積比為100 :0的石油醚和乙酸乙酯組 成的洗脫溶劑、由體積比為100 :1的石油醚和乙酸乙酯組成的洗脫溶劑、由體積比為50 :1 的石油醚和乙酸乙酯組成的洗脫溶劑、由體積比為30:1的石油醚和乙酸乙酯組成的洗脫 溶劑、由體積比為25:1的石油醚和乙酸乙酯組成的洗脫溶劑、由體積比為10:1的石油醚和 乙酸乙酯組成的洗脫溶劑、由體積比為5:1的石油醚和乙酸乙酯組成的洗脫溶劑、由體積 比為2:1的石油醚和乙酸乙酯組成的洗脫溶劑和由體積比為1:1的石油醚和乙酸乙酯組成 的洗脫溶劑，并進行梯度洗脫。
[0049] 本發明第三方面，提供了一種藥物組合物，含有安全有效量的本發明第二方面所 述的活性成分和藥學上可接受的載體。
[0050] 在另一優選例中，所述的藥物劑型為口