用于預防及治療球蟲病的咸豐草及聚炔類化合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發明涉及球蟲病的預防、抑制及治療，且特別關于用于抗球蟲病的植物及植物 性化合物。
【背景技術】
[0002] 球蟲病為家禽的一種主要寄生蟲疾病，且造成家禽養殖業者巨大的經濟損失。由 球蟲病所造成的損失包含肉雞的死亡、吸收不良、飼料利用率低下及生長率降低，以及暫時 性蛋雞產蛋量降低。經估計，球蟲病于英國造成家禽養殖業者每年6, 100萬美元的損失。據 推測，每年的全球損失將達到24億美元。
[0003] 艾美球蟲屬為一種球蟲亞綱，其屬于產孢、單細胞及絕對原生動物。也就是說，它 們必須于動物細胞內才能存活及繁殖。艾美球蟲為一種腸道寄生蟲，并可感染魚類、爬蟲 類、鳥類、哺乳類。值得注意的是，雞只易受至少11種的艾美球蟲感染。對于雞只而言，柔 嫩艾美球蟲（E. tenella)、毒害艾美球蟲（E. necatrix)、布氏艾美球蟲（E. brunetti)及巨 型艾美球蟲（E.maxima)為毒性較強者，而堆型艾美球蟲（E.acervulina)、早熟艾美球蟲 (E.praecox)及和緩艾美球蟲（E.mitis)則為毒性較弱者。艾美球蟲感染通常無癥狀，但對 于年幼及免疫功能低下的動物則顯示出嚴重的臨床癥狀，如腹瀉、血便、脫水、下垂、精神萎 靡、喪失食欲、蒼白、羽毛雜亂以及擠成一團。
[0004] 艾美球蟲的生命周期包含胞內、胞外、無性及有性階段。一旦雞只被艾美球蟲感染 后，此寄生蟲會于雞只體內發育并產生微小的蟲卵（稱為卵囊），其會隨著糞便排出體外。 于適當的溫度及濕度條件下，卵囊會于一至二天內發育成可感染其他雞只的芽孢化卵囊。 于此階段的卵囊含有八個小體（稱為孢子體），當卵囊被吞食后，每一個孢子體可進入雞只 腸內的細胞中。當孢子體進入細胞后，可分裂多次以生成一些或許多的子代（裂殖子）。所 產生的數目取決于球蟲的種類。每一個裂殖子后續可進入其他的腸細胞。此循環可重復數 次。由于此循環的倍增，大量的腸細胞會被破壞。最終，循環停止并產生生殖細胞（雄配子 細胞及雌配子細胞）。雄配子細胞使雌配子細胞受精以生成卵囊，卵囊從腸細胞中破裂而 出，并進入糞便中。數以千計的卵囊可進入受感染雞只的糞便中。因此，若家禽被飼養于擁 擠或不衛生的環境中，將有極高風險被感染。
[0005] 目前使用疫苗接種及化學療法來預防及治療球蟲病。減毒活疫苗被用于預防球蟲 感染，其優點在于在雞肉中不會有殘留的抗生素。然而，球蟲疫苗的跨種類保護無法令人滿 意。相較之下，最被廣泛使用的化合物是離子載體抗生素，孟寧素（monensin)、甲基鹽霉素 (narasin)、鹽霉素（salinomycin)、馬杜霉素（maduramicin)、山度霉素（semduramicin)及 拉沙里菌素（lasalocid)，其可預防艾美球蟲屬的第一代裂殖體的發育。然而，近來已有對 抗生素產生抗藥性的艾美球蟲品系被分離出來。再者，殘留在雞肉中的抗生素也造成公共 健康的憂慮。因此，研宄及發展新穎且安全的抗球蟲藥劑在實務上相當重要。對于人類及 動物醫藥而言，植物被視為是極佳的來源。咸豐草（一種菊科植物）被認為是可用于多種 疾病的民俗醫藥。
【發明內容】
[0006] 在一方面，本發明關于一種用于在有需求的動物內預防、抑制及/或治療球蟲病 的組合物。該組合物包含一有效量的咸豐草、其一活性成分或一由其分離出的活性化合物。
[0007] 在另一方面，本發明關于一種用于在一動物內預防及/或治療球蟲病及/或增強 生長的組合物，該組合物包含一動物飼料以及一有效量的化合物，該化合物包含一種具有 以下化學結構的聚炔類化合物：
[0008]
[0009] 其中 [0010]札為11或013;
[0011] 馬為單醣；
[0012] R3為 H 或 COCH 2C00H ;
[0013] m=3或4;
[0014] !! = 〇或1;
[0015] 〇 = 1 或 2 ;及
[0016] p=l或2。
[0017] 在又一方面，本發明關于一種組合物，其包含：(a) -動物飼料；及（b) -用于在有 需求的動物內預防及/或治療球蟲病及/或增強生長的有效量的咸豐草、其一活性成分或 一經分離的化合物，其包含一具有以下化學結構的聚炔類化合物：
[0018]
[0019] 其中
[0020] &為11或013;
[0021] 1?2為單醣；
[0022] &為 H 或 COCH 2C00H ;
[0023] m = 3 或 4 ;
[0024] n = 0 或 1 ;
[0025] 〇 = 1 或 2 ;及
[0026] p=l或2。
[0027] 本發明是基于無意間發現天然存在的聚炔類化合物可有效用于在有需求的動物 內預防及/或治療球蟲病及/或促進生長。
[0028] 該聚炔類化合物可為式（I)的純化合物：
[0029]
[0030]于此式中，&為11、(：「C1Q烷基、C2_C1Q烯基、C2_C1Q炔基、C3_C2Q環烷基、C3_C2Q環烯 基、Ci-C%雜環烷基、C「C%雜環烯基、芳基或雜芳基；R2為單醣殘基；R3為H或C烷基； m為 2、3 或 4;n為 0、1、2 或 3 ;〇 為 0、1、2、3 或 4 ;及p為 1、2、3 或 4。
[0031] 術語"純化合物"是指一種具有至少80%純度（如95%或99%)的化合物。如式 (I)，上述聚炔類化合物的子集合中，烷基（如甲基）、1?2為葡萄哌喃糖；r3Sh 或CfCi。烷基；m為4 ;n為0 ;〇為2 ;及p為1。
[0032] 術語"烷基"是指飽和、直鏈或支鏈的非芳香族的烴基部分，例如CH3、-CH2_或支鏈 的（CH3)2CH2_。術語"烯基"是指直鏈或支鏈的非芳香族的烴基部分，其具有至少一個雙鍵， 例如CH2=CH-或-CH=CH-。術語"炔基"是指直鏈或支鏈的非芳香族的烴基部分，其具 有至少一個三鍵，例如CH=C-或-C=C-。術語"環烷基"是指飽和的非芳香族的環烴基 部分，例如環己基。術語"環烯基"是指非芳香族的環烴基部分，其環中含有至少一個雙鍵， 例如環己烯基。術語"雜環烷基"是指飽和的非芳香族環基部分，其具有至少一個環雜原子 (如0、N或S)，例如4-四氫哌喃基。術語"雜環烯基"是指非芳香族的環基部分，其環中 具有至少一個環雜原子及至少一雙鍵，例如哌喃基。術語"芳基"是指具有至少一個芳香環 的烴基部分。芳基部分的實例包含苯基、伸苯基、聯苯基、萘基、伸萘基、芘基、蒽基及菲基。 術語"雜芳基"是指具有至少一個芳香環的部分，而該芳香環含有至少一個雜原子。雜芳基 部分的實例包含呋喃基、伸呋喃基（furylene)、弗基、吡咯基、噻吩基、惡唑基、咪唑基、噻唑 基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基、異喹啉基及吲哚基。
[0033] 本文所提及的烷基、條基、炔基、環烷基、環條基、雜環烷基、雜環條基、芳基及雜芳 基包含經取代及非經取代的部分。于環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基及雜芳基上 的取代基實例包含但不限于Ci-C^烷基、C2-Cjt基、c2-c1(l炔基、c3-c2(l環烷基、c3-c2(l環烯 基、Ci-k烷氧基、芳基、芳氧基、雜芳基、雜芳氧基、胺基、C烷胺基、C二烷胺基、芳 胺基、二芳胺基、雜芳胺基、二雜芳胺基、烷磺酰基、芳磺酰基、雜芳磺酰基、c 烷磺 酰胺基、芳磺酰胺基、雜芳磺酰胺基、Ci-Cm烷亞胺基、芳亞胺基、c 烷磺酰亞胺基、芳磺 酰亞胺基、羥基、齒基、硫基、Ci-C^烷硫基、芳硫基、胺硫酰基、甲脒基、胍基、脲基、氰基、硝 基、亞硝基、疊氮基、酰基、硫酰基、酰氧基、羧基、酰胺基、胺甲酰基及羧基以及羧酸酯。于烷 基、烯基及炔基上的取代基實例包含所有前述取代基，除了Ci-Cm烷基、c2-c1(l烯基及c2-c1Q 炔基以外。環烷基、環烯基、雜環烷基、雜環烯基、芳基及雜芳基也可彼此互相稠合。
[0034] 于該聚炔類化合物的子集合中，烷基（如甲基）；1?2為葡萄糖、半乳糖、 海藻糖、甘露糖、古洛糖殘基或H成為H;m為4、n為0、0為2而p為1。聚炔類化合物可 作為醫藥組合物中的純化合物或作為咸豐草萃取物中的組成分而施予至個體。
[0035] 在更一方面，本發明的特征為一種用于在有需求的動物內預防及/或治療球蟲病 及/或促進生長的方法，此通過將一有效量的咸豐草制備物施予至有需求的個體而達成。 此咸豐草制備物可通過下列方式制得：于升高的溫度下（如50°C或100°C )，在水中攪拌經