治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑及其制備方法與應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種治抗真菌藥物的制劑，具體涉及一種治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑及其制備方法與應用。
【背景技術】
[0002]真菌性角膜炎是一種嚴重致盲性眼病，引起真菌性角膜炎的主要致病菌以腐生性真菌為主，常見有鐮刀菌、曲霉菌等。隨著臨床上廣譜抗菌素、皮質類固醇及抗病毒藥物的普遍濫用，引起細菌的耐藥性增強，近年來真菌性角膜炎發病率逐漸增多，病情也更加嚴重。
[0003]伏立康唑(voriconazole, UK-109,496)是第二代三唑類廣譜抗真菌藥物，較傳統抗真菌藥物如兩性霉素B、伊曲康唑，其抗真菌譜更廣，其療效也更為確切。但因其溶解性困難不能得到很好克服，目前臨床上還沒有開發出伏立康唑的眼藥水或眼膏制劑。伏立康唑用于臨床治療真菌性眼疾時，只能采用玻璃體腔注射，藥物在玻璃體腔內半衰期短(約2.5h)，需反復注射，并且由于反復在玻璃體腔注射有潛在的眼內炎、玻璃體出血及視網膜脫離等風險。目前公開文獻中有報道伏立康唑的注射劑發明專利，如CN200510095595、CN200710143810、CN200910019770等，用這些發明專利方法制備的伏立康唑注射劑均需添加環糊精類輔料，雖然增加了伏立康唑的溶解量，但使用的輔料環糊精或吐溫在眼睛部位，具有較強的生理毒性。中國發明專利CN201110380218報道了使用聚乙二醇400、卵磷脂等輔料制作的納微復合粉體，雖然所用輔料安全高，得到的藥物顆粒粒徑小、分散液透明，但藥物釋放時易突釋，長效緩釋效果還不理想。
[0004]目前，臨床上常用的眼用抗真菌制劑多是滴眼液，以水或者緩沖液制成，生物利用度低，需要頻繁給藥，病人順從性差。因此，有必要開發出新的眼藥劑型以彌補傳統給藥方式的不足，并同時確保抗真菌作用的優良效果。
【發明內容】
[0005]為了克服現有技術的不足和缺點，本發明的首要目的在于提供一種治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑，該制劑采用殼聚糖及其衍生物/石墨烯類物質為載體，負載伏立康唑眼藥，本身具有良好的抑菌活性，可以貼敷于患者角膜上，定點長效緩釋藥物，增強了對角膜病灶區真菌的抑菌效果，并且延長了給藥時間，極大提高了新制劑的藥物生物利用度。
[0006]本發明的另一目的在于提供上述治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑的制備方法。
[0007]本發明的再一個目的在于提供上述治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑的應用。
[0008]本發明的目的通過下述技術方案實現:
[0009]一種治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑的制備方法，包含如下步驟:
[0010](I)將殼聚糖類物質溶于乙酸溶液，得到殼聚糖類物質-乙酸溶液；
[0011](2)將步驟(I)制備得到的殼聚糖類物質-乙酸溶液與石墨烯類物質分散液混合，在20?80°C下攪拌反應I?5h，得到殼聚糖類物質靜電結合石墨烯類物質的復合材料；
[0012](3)在步驟(2)制備得到的殼聚糖類物質靜電結合石墨烯類物質的復合材料中添加抗真菌類藥物伏立康唑，然后在30?80°C下反應3?12h，透析，得到治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑；
[0013]步驟(I)中所述的乙酸溶液的體積分數優選為1%?2% (v/v);
[0014]步驟(I)中所述的殼聚糖類物質為殼聚糖和殼聚糖衍生物中的任意一種或者至少兩種；
[0015]所述的殼聚糖衍生物優選為殼聚糖季銨鹽；
[0016]步驟(I)中優選將殼聚糖類物質加入乙酸溶液后充分攪拌I?3d，使其充分溶解；所述的攪拌時間優選為I?3d ;
[0017]步驟(2)中所述的石墨烯類物質為石墨烯和改性石墨烯中的任意一種或者至少兩種；
[0018]所述的改性石墨烯優選為羧基石墨烯；
[0019]步驟(2)中所述的石墨烯類物質分散液需充分分散，所述的分散方式優選為超聲30min ?3h ；
[0020]步驟(2)中所述的石墨烯類物質在殼聚糖類物質靜電結合石墨烯類物質的復合材料中的質量分數為0.1%?1% ;
[0021]步驟(2)中所述的殼聚糖類物質靜電結合石墨烯類物質的復合材料中殼聚糖和石墨烯類物質的質量比為(100:1)?(200:1)；
[0022]步驟(3)所述的伏立康挫在復合材料中的終濃度為5?10mg/mL ；
[0023]步驟(3)中所述的透析的時間為12?24h ;
[0024]所述的治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑可進一步加工制備得到混懸劑、凝膠類制劑或者真空干燥成膜，得到載藥膜制劑；
[0025]本發明制備得到的治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑的基體由石墨烯類材料靜電結合載藥殼聚糖類物質構成，藥物負載于石墨烯類材料的片狀結構上，結構穩定，負載量大。所述載藥制劑具有良好的生物相容性，對身體的正常細胞沒有抑制作用，對真菌性角膜炎具有良好的療效，能對角膜上真菌和細菌的生長產生明顯的抑制作用，具有良好的細胞相容性和柔韌性和抗拉伸強度。
[0026]本發明相對于現有技術具有如下的優點及效果:
[0027](I)本發明所制備的新型載藥制劑載藥量大，能達到70%，而且制劑穩定。
[0028](2)本發明所制備的載藥制劑具有良好的生物相容性，對正常細胞的生長沒有明顯的抑制作用。
[0029](3)本發明所制備的制劑可以貼敷于患者角膜上，定點長效緩釋藥物，增強了對角膜病灶區真菌的抑菌效果，并且延長了給藥時間，極大提高了新制劑的藥物生物利用度。
[0030](4)本發明所制備的載藥膜具有優良的機械性能，制備方法簡便。
【附圖說明】
[0031]圖1是實施例1所得載藥膜的表面形貌圖。
[0032]圖2是實施例5藥物緩釋實驗結果分析圖。
【具體實施方式】
[0033]下面結合實施例及附圖對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。
[0034]實施例1
[0035](I)取2g殼聚糖溶于200mL的2% (v/v)乙酸溶液中，機械攪拌，2天后轉移至三口燒瓶中，制備得到殼聚糖-乙酸溶液；取7.6mL的2mg/mL石墨烯分散液，300W超聲30min，使其充分分散；
[0036](2)將步驟(I)超聲充分分散后的石墨烯分散液滴加于步驟(I)制備得到的殼聚糖-乙酸溶液中，60°C下持續持續攪拌5h，得到殼聚糖靜電結合石墨烯的復合材料；
[0037](3)取伏立康唑的注射液用生理鹽水稀釋，攪拌狀態下滴加于步驟(2)制備得到的殼聚糖靜電結合石墨烯的復合材料中，使伏立康唑在復合材料中的最終濃度為5mg/mL，30°C下持續攪拌12h;裝入透析袋(截留大小800Da)中，置于去離子水中除去未載上的藥物，透析Ia后，得到治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑，置于4°C保存。可進一步濃縮后得到新型凝膠制劑，或者進一步流延于玻璃上干燥后得到載藥膜制劑(圖1)。
[0038]實施例2
[0039](I)取2g殼聚糖季錢鹽溶于200mL的1% (v/v)乙酸溶液中，機械攪拌，I天后轉移至三口燒瓶中，制備得到殼聚糖季銨鹽-乙酸溶液；取1mL的2mg/mL石墨烯分散液，300W超聲Ih，使其充分分散；
[0040](2)將步驟(I)超聲充分分散后的石墨烯分散液滴加于步驟(I)制備得到的殼聚糖季銨鹽-乙酸溶液中，20°C下持續持續攪拌3h，得到殼聚糖季銨鹽靜電結合石墨烯的復合材料；
[0041](3)取伏立康唑的注射液用生理鹽水稀釋，攪拌狀態下滴加于步驟(2)制備得到的殼聚糖季銨鹽靜電結合石墨烯的復合材料中，使伏立康唑在復合材料中的最終濃度為8mg/mL，80°C下持續攪拌3h ;裝入透析袋(截留大小800Da)中，置于去離子水中除去未載上的藥物，透析18h后，得到治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑，置于4°C保存。可進一步濃縮后得到新型凝膠制劑，或者進一步流延于玻璃上干燥后得到載藥膜制劑。
[0042]實施例3
[0043](I)取2g殼聚糖溶于200mL的1.5% (v/v)乙酸溶液中，機械攪拌，3天后轉移至三口燒瓶中，制備得到殼聚糖-乙酸溶液；取20mL的2mg/mL羧基石墨烯分散液，300W超聲Ih，使其充分分散；
[0044](2)將步驟(I)超聲充分分散后的羧基石墨烯分散液滴加于步驟(I)制備得到的殼聚糖-乙酸溶液中，80°C下持續持續攪拌lh，得到殼聚糖靜電結合石墨烯的復合材料；
[0045](3)取伏立康唑的注射液用生理鹽水稀釋，攪拌狀態下滴加于步驟(2)制備得到的殼聚糖靜電結合羧基石墨烯的復合材料中，使伏立康唑在復合材料中的最終濃度為10mg/mL，50°C下持續攪拌8h ;裝入透析袋(截留大小800Da)中，置于去離子水中除去未載上的藥物，透析24h后，得到治療真菌性角膜炎的長效緩釋制劑，置于4°C保存。可進一步濃縮后得到新型凝膠制劑，或者進一步流延于玻璃上干燥后得到載藥膜制劑。
[0046]實施例4
[0047](I)取2g殼聚糖季銨鹽溶于200mL的2% (v/v)乙酸溶液中，機械攪拌，2天后轉移至三口燒瓶中，制備得到殼聚糖-乙酸溶液；取7.6