牛樟芝菌ac09在保護化學性肝損傷中的醫用用圖
【技術領域】
[0001]本發明公開了牛樟芝菌AC09在保護化學性肝損傷中的醫用用途，屬于醫療保健品技術領域，具有涉及一種具有對化學性肝損傷具有保護功能的牛樟芝高產菌株發酵液凍干粉及其在作為保健食品方面的應用。
【背景技術】
[0002]現如今，酒精性肝病是臨床常見肝病之一。酒精中毒死亡率和癌癥及冠心病的死亡率相仿，是中青年死亡的主要原因之一。隨著人們生活條件的改善，酗酒所帶來的身體危害也較為普遍。由于酒精具有成癮性，很多患者經常不顧酗酒傷身的事實，持續大量飲酒，容易造成骨質疏松、心血管疾病、高血壓、視線模糊、胃部疾病及肝臟硬化。我國近年來臨床酒精性肝病的患病率也逐年升高，成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，因此重視酒精性肝病的防治具有重要意義。隨著人們生活水平的提高，安全而有效的保健食品成為人們保護酒精引起的化學性肝損傷一種的手段。
[0003]近年來，市場對許多藥用真菌產品的需求量顯著增加，而傳統的藥用真菌培養方式大多集中于對子實體的栽培，不能滿足需求。液體發酵極大縮短培養周期，不受地理和時間的限制，且可能達到野生藥用真菌具有的多項生理活性及有效成分，優勢明顯。經本發明考察了經液體發酵后的藥用真菌其在保護化學性肝損傷等方面的作用，結果顯示，除對肝功能指標、清除自由基和抗氧化等方面產生影響，該藥用真菌還對白細胞介素、干擾素、月中瘤壞死因子等細胞因子水平產生影響。因此，利用大型真菌液體深層發酵技術制備一種具有保護酒精引起的化學性肝損傷功能的保健食品具有重要的意義。
[0004]樟芝，又名牛樟芝或牛樟菇，屬于擔子菌綱、非褶菌目、多孔科、多年生擔子菌，只生長在臺灣地區的牛樟樹腐朽樹干的內壁。樟芝子實體味苦，具有強烈的樟樹香氣，外形為板狀或鐘狀，無柄。子實體初期新鮮時呈現橘紅色、橘褐色，老熟時會漸漸轉變為棕褐色，之后變為黑色。從近年的研宄報告發現，牛樟芝含有許多復雜成分，如精油、多糖體，其主要化學成分為P-D-葡聚糖、三萜類化合物(如樟萜酸A、B、e、K等)、超氧歧化酶、核酸類(腺苷等物質)、麥角固醇、蛋白質(含免疫蛋白)、維生素、氨基酸、凝聚素及一些微量元素等。這些有效成分中以三萜類化合物最特別，高達200種以上(單一品系的靈芝約20-50種，不同品系靈芝總合約200多種)，含量為10%-45% (靈芝為1%_3%)，是其他菇菌無法相比的；多糖體含量為13.13% (靈芝為2%) ο
【發明內容】
[0005]本發明公開了一種牛樟芝菌AC09在保護化學性肝損傷中的醫用用途，制備的發酵液凍干粉對化學性肝損傷具有保護功能。
[0006]本發明涉及的牛樟芝AC09為誘變菌株，已于2015年5月3日保藏《中國典型培養物保藏中心》，命名為Antrodiacamphorata AC09，牛樟芝AC09，保藏號為:CCTCC Ν0:Μ2015274。
[0007]本發明提供一種牛樟芝菌AC09發酵液凍干粉，由如下方法制備得到:
將牛樟芝菌種ATC09在以下條件下進行發酵:培養基組分蛋白胨10?20g/L，葡萄糖15?25g/L，酵母浸粉10?20g/L，無水硫酸鎂2?4g/L，磷酸二氫鉀2?Ag/UVB1.I?
0.2g/L，發酵條件為:裝液量為60?80升，接種量(v/v) 5?10%，發酵溫度25?27攝氏度，發酵罐轉速150?300轉/分鐘，發酵時間3?5天，得發酵液。
[0008]將發酵液以4000?5000轉/分鐘，離心5?10分鐘，棄上清，收集沉淀并以-30?-50°C凍干60?72小時，得到牛樟芝發酵液凍干粉。
[0009]經動物實驗證明(詳見實施例)，本發明牛樟芝水提物具有保護酒精引起的化學性肝損傷的功能，因而可以在作為保健食品方面得到應用。其主要的功效學作用如下:經用食品級白酒建模后的昆明小鼠在服用本發明的牛樟芝保健食品(即牛樟芝發酵液凍干粉)15天后，其血清中ALT、AST、SOD、GSH、GSHH-PX, TNF- α、NF- κ B等因子的水平發生顯著變化。
[0010]本發明的積極效果在于:提供了牛樟芝菌ATC09在保護化學性肝損傷中的新的醫用用途。本發明工藝制得的牛樟芝發酵液凍干粉安全、無副作用，具有顯著保健功效，可長期服用，且各主要原料可通過深層液體發酵生產，降低了工業化成本、有很好的市場開發前景。
【附圖說明】
[0011]圖1為本發明對酒精引起的化學性肝損傷小鼠血清ALT升高的保護作用；
圖2為本發明對酒精引起的化學性肝損傷小鼠血清AST升高的保護作用；
圖3為本發明對酒精引起的小鼠肝臟GSH耗竭的影響；
圖4為本發明對酒精引起的小鼠肝臟SOD活性的影響；
圖5為本發明對酒精引起的小鼠肝臟GSH-PX活性的影響；
圖6為本發明對酒精引起的小鼠肝臟TNF-α蛋白含量的影響；
圖7為本發明對酒精引起的小鼠肝臟NF-κ B蛋白含量的影響。
[0012]具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步描述，但本發明不受具體實施例限制。
[0013]實施例1
將牛樟芝菌種AC09經百升發酵罐內進行發酵(培養基組分:蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，酵母浸粉10g/L，無水硫酸鎂2g/L，磷酸二氫鉀2g/L，VB10.lg/L，發酵條件為:裝液量為80升，接種量(v/v) 10%，發酵溫度26攝氏度，發酵罐轉速150轉/分鐘，發酵時間4天)，發酵終止后得發酵液73升，以4000轉/分鐘離心10分鐘，棄去上清，收集沉淀并_40°C凍干60小時，得到牛樟芝發酵液凍干粉粉931克。
[0014]實施例2
將牛樟芝高產菌種AC09經百升發酵罐發酵(培養基組分:蛋白胨12g/L，葡萄糖18g/L，無水硫酸鎂4.0g/L，磷酸二氫鉀4.0g/L，VB10.15g/L，發酵條件為:裝液量為75升，接種量(v/v) 5%，發酵溫度25攝氏度，發酵罐轉速175轉/分鐘，發酵時間3天)，發酵終止后得發酵液68升，以4000轉/分鐘離心10分鐘，棄去上清，收集沉淀并_40°C凍干65小時，得到牛樟芝發酵液凍干粉739克。
[0015]實施例3 將誘變選育出的牛樟芝高產菌種AC09經百升發酵罐發酵(培養基組分:蛋白胨15g/L，葡萄糖25g/L，無水硫酸鎂3g/L，磷酸二氫鉀3.0g/L, VB10.15g/L發酵條件為:裝液量為70升，接種量(v/v) 10%，發酵溫度26攝氏度，發酵罐轉速125轉/分鐘，發酵時間5天)，發酵終止后得發酵液63升，以4000轉/分鐘離心10分鐘，棄去上清，收集沉淀并_40°C凍干65小時，得到牛樟芝發酵液凍干粉801克。
[0016]通過以下實驗明白本發明牛樟芝菌種AC09在保護化學性肝損傷中的醫用用途
本試驗例用于說明本發明的牛樟芝保健食品(即牛樟芝發酵液凍干粉)對酒精作用后小鼠化學性肝損傷的保護作用的影響。
[0017]1、動物分組及飼養
準備健康昆明小鼠75只，全雄，體重18?22g，飼養溫度22±2°C，相對濕度40?70%，隨機分為5個大