一種普伐他汀鈉長效緩釋微球的制備方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及以特殊物理形狀為特征的醫藥配制品，具體涉及殼質多糖制成的粒狀的載有他汀類化合物的藥物制劑的制備方法。
【背景技術】
[0002]人體膽固醇升高容易導致心血管疾病如動脈硬化、冠心病等疾病的發病和死亡。他汀藥物是一類3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶(HMG-COA還原酶)的競爭性抑制劑，HMG-COA還原酶是膽固醇生物合成過程中的限速酶，他汀藥物可通過抑制該限速酶的活性，阻斷或者減少體內膽固醇的生物合成，刺激肝細胞表面低密度脂蛋白(LDL)受體表達，促進LDL和LDL前體從循環中清除，從而降低血液中膽固醇的濃度。他汀還具有降血脂、加速受損血管內皮化，減緩或減退動脈粥樣硬化斑塊發展的作用，并可用于血管重建手術后的再狹窄防治，并降低血管手術并發癥。
[0003]普伐他汀是一種水溶性他汀藥物，在體內無需代謝轉化就能具有藥理活性，不良反應少。普伐他汀最早由日本三共株式會社研制，1989年在日本以“美百樂鎮”商品名上市，隨后1990年經美國FDA批準，美國施貴寶公司以商品名“普拉固”上市。但他汀類藥物主要采用口服給藥，經過消化道、肝臟的代謝、消除，發生首過效應，生物利用度較低，對于普伐他汀，還具有在低PH環境下比如胃中(pHl.2)很不穩定的特性，容易轉化為其異構體3’_α異普伐他汀，而這種異構體抑制HMG-CoA還原酶的活性只有普伐他汀的1/10?1/40，大大降低了普伐他汀的生物利用度低，且半衰期短(1.5-2小時)。而如果服用高劑量的他汀藥物，有可能對人體產生不可忽視的副作用。
[0004]目前改變普伐他汀給藥方式的研宄不多，仍以口服劑型為主。針對其在酸性環境的不穩定性，現有研宄主要集中在加入可提高藥物微環境PH值的物質，如，公開號為CN101732267A的專利申請公開了一種普伐他汀鈉片劑，該片劑加入甘露醇作為填充劑，并加入堿化劑；公開號為CN101461799A的專利申請公開了一種穩定的普伐他汀藥物組合物，該組合物以葡甲胺為輔料；公開號為CN1518443A的專利申請公開了一種普伐他汀的穩定的藥物，該藥物添加硬脂酰延胡索酸鈉為輔料；公開號為CN1507859A的專利申請公開了一種普伐他汀制劑配方，該配方加入氨基酸及其鹽作為穩定劑；公開號為CN1330538A的專利申請公開了一種包含HMC-CoA還原酶抑制劑的穩定的藥物配方，該配方加入了緩沖劑；公開號為CN1036508A的專利申請公開了一種具有增強的穩定性的藥物制劑，該制劑加入堿化劑；公開號為CN102133187A的專利申請公開了一種普伐他汀鈉脂質體固體制劑，該制劑由普伐他汀鈉、乙酸單甘油酯、泊洛沙姆188和脫氧膽酸鈉制成；公開號為CN 103599077A的專利申請公開了一種注射用普伐他汀鈉組合物凍干粉針，該粉針采用三聚磷酸鈉交聯的殼聚糖納米粒作為助溶劑，與普伐他汀鈉混合制成注射用凍干粉劑。上述專利申請的藥物制劑雖然都具有普伐他汀鈉的治療作用，但都需每天給藥。
【發明內容】
[0005]本發明所要解決的技術問題是提供一種普伐他汀鈉長效緩釋微球的制備方法，該方法所制備的緩釋微球具有藥效長的優點。
[0006]本發明解決上述問題的技術方案為:
[0007]一種普伐他汀鈉長效緩釋微球的制備方法，該方法由以下步驟組成:
[0008](I)將乳化劑與機溶劑按乳化劑:有機溶劑=2: 100?8: 100體積比混合，攪拌均勻，制得油相；其中，所述的乳化劑為span-80、吐溫-80、卡波姆1342或單油酸二甘酯，所述的有機溶劑為液體石蠟、大豆色拉油、橄欖油或苯甲酸乙酯；
[0009](2)將殼聚糖加入到體積濃度為I?3%的醋酸溶液中，磁力攪拌I?24h，使其充分溶解，靜置，配成質量濃度為0.5?3%的殼聚糖溶液；將普伐他汀鈉溶解于水中，使得普伐他汀鈉在水中的濃度13.3?66.6g/L，得到普伐他汀鈉水溶液；然后，將殼聚糖溶液與普伐他汀鈉水溶液均勻，制得含有質量比為普伐他汀鈉:殼聚糖=1:1?1: 5的水相；
[0010](3)將交聯劑京尼平溶于體積濃度為30?90%的乙醇中，配成京尼平在30?90%的乙醇中濃度為1.3?13g/L的交聯劑溶液；
[0011](4)按油相:水相=2: I?15:1的體積比將步驟⑵制得的水相邊攪拌邊滴加到步驟(I)制得的油相中，再繼續攪拌0.5?6h，制得w/o型乳液；
[0012](5)4?60°〇下，按交聯劑在《/0型乳液中濃度為0.085?0.858/1將步驟(3)制得的交聯劑溶液在攪拌的條件下分2次或3次等量滴加到步驟(4)制得的w/o型乳液中，加完后繼續攪拌2?48h，其中，分2次或3次滴加的間隔為10?60min，每次滴加的時間為10?30min ;然后，高速離心，棄去上層液，將下層的固體用石油醚、丙酮、異丙醇、氯仿和乙醇中的兩種或三種各洗滌3次；最后，將所得產物真空干燥，即得所述的普伐他汀鈉長效緩釋微球。
[0013]經上述方法制備得到的普伐他汀鈉長效緩釋微球與現有技術比較，具有以下有益效果:
[0014]本發明所制得的普伐他汀鈉長效緩釋微球，其內的普伐他汀鈉一方面是從微球內向微球外逐漸擴散，另一方面是隨著殼聚糖的降解而逐步釋放。可通過控制殼聚糖微球的交聯程度，形成不同緊密程度的交聯網絡，達到調節普伐他汀的釋放速度的目的。本方法所制得的普伐他汀鈉長效緩釋微球適用于長效釋藥的藥物制劑，施藥時間可長達2月以上，既可用于經皮給藥系統，也可用于皮下植入，還可用作載藥心血管組織工程修復支架。此夕卜，由于采用可降解天然高分子作為載藥基質，材料在體內逐漸降解后，可從體內排出，因此作為植入材料或者血管組織工程支架材料則無需取出。
【附圖說明】
[0015]圖1為下述實施例1所制得的普伐他汀鈉長效緩釋微球的體外釋藥曲線。
[0016]圖2為下述實施例3所制得的普伐他汀鈉長效緩釋微球的電鏡圖。
[0017]圖3為下述實施例6所制得的含普伐他汀鈉的殼聚糖微球的電鏡圖。
【具體實施方式】
[0018]實施例1
[0019]一、普伐他汀鈉長效緩釋微球的制備
[0020](I)將吐溫-80與液體石蠟按吐溫-80:液體石蠟=2: 100的體積比混合，在500r/min速度下電動攪拌混合均勾，制得油相；
[0021](2)將黏度低于200mPa.s的殼聚糖加入到體積濃度為I %的醋酸溶液中，磁力攪拌lh，配成質量濃度為1.5%的殼聚糖溶液；將普伐他汀鈉溶解于水中，使普伐他汀鈉在水中的濃度為66.6g/L，得到普伐他汀鈉水溶液；然后，將配好的殼聚糖溶液與到普伐他汀鈉水溶液，攪拌均勻，制得含有質量比為普伐他汀鈉:殼聚糖=I: I的水相；
[0022](3)將京尼平溶于30%的乙醇水溶液中，使得京尼平在體積濃度為30%的乙醇中的濃度為1.3g/L，得到交聯劑溶液；
[0023](4)按油相:水相=5: I的體積比將步驟⑵制得的水相在600r/min的速度下邊攪拌邊滴加到步驟⑴制得的油相中，再繼續攪拌4h，制得w/o型乳液；
[0024](5) 20°C下，按京尼平在w/o型乳液中濃度為0.085g/L將步驟(3)制得的交聯劑溶液平均分成兩份，分2次在600r/min的速度下邊攪拌邊滴加到步驟(4)制得的w/o型乳液中，間隔30min滴加一次，每次30min滴加完畢，加完后繼續攪拌6h ;然后，高速離心，棄去上層液，將下層的固體用石油醚、丙酮和異丙醇各洗滌3次；最后，將所得產物真空干燥，即得普伐他汀鈉長效緩釋微球。
[0025]二、效果檢測
[0026](I)檢測釋放時間
[0027]取所制備的普伐他汀鈉長效緩釋微球50mg放入透析袋，浸入200ml的PBS溶液(pH = 7.4)中，置于37°C恒溫搖床中(100r/min)。定時取樣，同時補充等量釋放液。在238nm處測其紫外吸光度，根據標準曲線測定載藥量，結果見圖1。由圖1可見，60天累積釋藥量為30.3%，藥物仍在持續釋放。
[0028](2)測試包封率
[0029]準確稱取所制備的普伐他汀鈉長效緩釋微球20mg于瑪瑙研缽中研細，置于錐形瓶中，加入50ml蒸餾水，用細胞粉碎機充分打散，過濾，取濾液于238nm處測其紫外吸光度，根據標準工作曲線計算藥物含量，平行測定三次，按下式計算得包封率為30.9%:
[0030]包封率=微球中包封的藥量/投入的藥量X 100%。
[0031]實施例2
[0032]一、普伐他汀鈉長效緩釋微球的制備
[0033](I)將span-80與苯甲酸乙醋按span-80:苯甲酸乙醋=8: 100的體積比混合，在1000r/min速度下電動攪拌混合均勾，制得油相；
[0034](2)將黏度為200?400mPa.s的殼聚糖加入到體積濃度為I %的醋酸溶液中，磁力攪拌5h，配成質量濃度為3%的殼聚糖溶液；將普伐他汀鈉溶解于水中，使普伐他汀鈉在水中的濃度為16.6g/L，得到普伐他汀鈉水溶液；然后，將配好的殼聚糖溶液與普伐他汀鈉水溶液混合，攪拌均勻，制得含有質量比為普伐他汀鈉:殼聚糖=I: 4的水相；
[0035](3)京尼平溶于40%的乙醇水溶液中，使得京尼平在體積濃度為40%的乙醇中的濃度為7.8g/L，得到交聯劑溶液；
[0036](4)按油相:水相=2: I的體積比將步驟⑵制得的水相在500r/min的速度下邊攪拌邊滴加到步驟⑴制得的油相中，再繼續攪拌3h，制得w/o型乳液；
[0037](5)4°C下，按交聯劑在w/o型乳液中濃度為0.51g/L將步驟(3)制